CN101522609A - 癌症的治疗 - Google Patents

Abstract

本发明提供物质的组合物、试剂盒及其用于治疗癌症的方法。特别是，本发明提供通过抑制聚－ADP－核糖聚合酶在对象中治疗癌症的组合物和方法，以及提供施用该组合物的剂型和方式。

Description

癌症的治疗

交叉引用

本申请要求2006年9月5日提交的60/842474号美国临时申请的优先权，该文献通过引证全文引入。

背景技术

癌症是对现代社会的严重威胁。恶性的癌生长由于其独特的特性而对现代医学形成了重大的挑战。它们的特性包括导致恶性组织不受约束地生长的不可控的细胞增殖、侵入局部组织和甚至远端组织的能力、缺乏分化、缺乏可检测的症状和最重要的，缺乏有效的治疗和预防方法。

癌症可以在任何器官的任何组织中或任何年龄者的组织中发生。癌症的病因还没有得到清楚的阐明，但如遗传易感性、染色体断裂异常、病毒、环境因素和免疫异常的多种机理都与恶性细胞生长和转化相关联。癌症包括了影响到全世界的数百万个人的许多种类的医学状态。当身体局部的细胞开始不分化(undifferentiated)或不受控制地生长时癌症发生了。所有类型的癌症都以异常细胞的不受控制的生长开始。

存在许多类型的癌症，包括乳腺癌、肺癌、卵巢癌、膀胱癌、前列腺癌、胰腺癌、子宫颈癌和白血病。目前，可采用的一些主要治疗方法是手术、放射疗法和化疗。手术通常是激烈的措施且可能具有严重的后果。例如，卵巢癌的所有治疗方法都可能导致不育。子宫颈癌和膀胱癌的一些治疗可能引起不育和/或性功能障碍。治疗胰腺癌的手术疗法可能导致胰腺的部分或整体切除并可能对患者产生重大的风险。乳腺癌手术总是涉及部分或整个乳房的切除，并且在严重的情况下包括周围组织的切除。前列腺癌的一些手术治疗产生小便失禁和阳萎的风险。肺癌患者的手术治疗经常导致剧烈的术后疼痛，因为必须切入肋骨以接近和切除癌性的肺组织。另外，同时具有肺癌和另一种肺疾病(如肺气肿或慢性支气管炎)的患者通常在手术后出现呼吸急促增加的情况。

放射疗法具有杀死癌症细胞的优势，但它也同时损伤非癌性的组织。化疗包括向患者施用各种抗癌药物，但经常伴有不利的副作用。

全世界范围内，每年有超过一千万人被诊断出患有癌症，且估计到2020年这一数字将增长到每年一千五百万新病例。癌症每年引起六百万人死亡或者占全世界死亡数的12％。一直存在着对治疗癌症的方法的需要。这些方法可以为用于预防和治疗人类或其它哺乳动物的癌症的药物组合物提供基础。

已经确认了一系列的抗肿瘤药物。这些药物包括硝基和亚硝基化合物及它们的代谢物，它们是以下专利的主题：1995年11月7日授权的名称为“Aromatic Nitro and Nitroso Compounds and theirMetabolites Useful as Anti-viral and Anti-tumor Agents”的5464871号美国专利，1997年9月23日授权的名称为“Aromatic Nitro and NitrosoCompounds and their Metabolites Useful as Antiviral and Anti-tumorAgents”的5670518号美国专利和1999年12月21日授权的名称为“Methods of Treating Cancer with Aromatic Nitro and NitrosoCompounds and their Metabolites”的6004978号美国专利，这些文献的公开内容通过引证并入本申请中。这些化合物已经在现有技术中描述为可用于治疗乳腺的腺癌、乳腺的导管癌、淋巴细胞性白血病、患有AIDS的免疫抑制患者的卡波济肉瘤和肿瘤生长，如非霍奇金淋巴瘤和原发淋巴瘤。但是，仍需要鉴别另外的具有抗肿瘤活性的化合物。与前体化合物分离的代谢物提供了可针对各种癌细胞单独地使用或与其它化合物联用的抗肿瘤剂的一种来源。从苯甲酰胺前体化合物分离的代谢物就提供了这样的一个来源。

发明内容

本发明一般地涉及使用芳香硝基苯甲酰胺代谢化合物治疗肿瘤发生疾病的方法。更具体地说，本发明涉及源自硝基化合物苯甲酰胺前体分子的硝基苯甲酰胺代谢化合物，和所述代谢物或其盐、溶剂合物、异构体、互变异构体、代谢物、类似物或前药在哺乳动物中阻止或抑制肿瘤生长的用途。

在本发明的一个方面中，提供了治疗癌症和与癌症相关的病症的方法，包括施用包含式(Ia)的化合物和一种或多种另外的药物活性物质的药物组合物。在另一方面中，提供了治疗癌症和与癌症相关的病症的方法，包括施用源自式(Ia)化合物的代谢化合物和丁硫氨酸亚砜亚胺(buthionine sulfoximine，BSO)的组合。所述代谢物也可以在有或没有BSO的情况下与式(II)的苯并吡喃酮化合物联用。

这些方面的实施方式包括治疗各种癌症的方法，包括白血病、乳腺癌、卵巢癌、肺癌、膀胱癌、前列腺癌、胰腺癌和子宫颈癌，以及这里描述的其它类型的癌症。

本发明涉及物质的组合物和药物组合物，并涉及使用它们治疗癌症的方法。例如，本发明的组合物可以是这里描述的两种或多种化合物的组合和/或这里描述的两种或多种化合物形式的组合。本发明的药物组合物可以是适合于向对象施用的组合物。

通过引证引入

本说明书中提及的所有公开出版物和专利申请在此通过引证引入，就如各单个的出版物和专利申请特别地和单独地表明通过引证引入一样。

附图简要说明

本发明的新特征在所附的权利要求中详细地阐明。参照下面给出示例性实施方式的详细说明和附图将获得对本发明的特征和优势的更好的理解，在这些实施方式中利用了本发明的原理。附图中：

图1显示(FACS点图和柱状图)用PARP-1抑制剂(4-碘-3-硝基苯甲酰胺或“BA”)处理19小时的HTC116细胞的细胞周期分析。BA处理引起G1期的细胞数目(48.6％)与对照(18.6％)相比增加，伴随着细胞周期S期细胞数目的降低。

图2(FACS点图和柱状图)显示用PARP-1抑制剂BA、4-碘-3-亚硝基苯甲酰胺(BNO)和4-碘-3-羟氨基苯甲酰胺(BNHOH)处理24小时的Hela细胞的细胞周期分析。BrdU染色标记处于细胞周期S期的细胞。GF7染色标记有丝分裂的细胞。

图3(FACS点图和柱状图)显示PARP-1抑制剂BA、4-碘-3-亚硝基苯甲酰胺(BNO)和4-碘-3-羟氨基苯甲酰胺(BNHOH)处理72小时的Hela细胞的细胞周期分析。BrdU染色标记处于细胞周期S期的细胞。GF7染色标记有丝分裂的细胞。

图4显示BA在雌性SCID小鼠中的人OVCAR-3卵巢腺瘤异种移植物中的活性。BA每日两次以50mg/kg/剂的量口服给药或通过渗透泵以25mg/kg/周的量皮下给药。

图5显示BA以上调MDR1的多药抗性细胞以及MDR1-阴性细胞为目标。图5A显示KB3-1细胞中MDR1表达的水平。图5B显示KB V-1细胞中MDR1表达的水平。FACS柱状图表明KB V-1细胞中MDR1的过度表达。由于MDR1的过度表达与多药抗性有关，可以注意到，如图5C中所示，BA在KB 3-1和KB V-1细胞中都导致剂量依赖性的细胞死亡。

具体实施方式

定义

“硝基苯甲酰胺前体化合物”意思是式(Ia)的化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、互变异构体、代谢物、类似物或前药：

其中，R₁、R₂、R₃、R₄和R₅独立地选自氢、羟基、氨基、硝基、碘、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、(C₃-C₇)环烷基和苯基，其中R₁、R₂、R₃、R₄和R₅五个取代基中的至少两个总是为氢，五个取代基中的至少一个总是为硝基，且位置与硝基相邻的至少一个取代基总是为碘。R₁、R₂、R₃、R₄和R₅也可以是如氯、氟或溴的卤素。“前体化合物”是经历生成代谢化合物的一种或多种化学或生物化学过程(例如，在细胞中或在生物体中)的化合物。术语“前体”、“前体化合物”、“苯甲酰胺前体”或“硝基苯甲酰胺前体”在这里可互换使用。

“代谢物”意思是通过生成结构上与起始化合物不同的产物的任何体外或体内代谢过程产生的化合物。术语“代谢物”包括硝基苯甲酰胺代谢化合物。代谢物可以包括相对于前体化合物(例如在式(Ia)中所示的前体化合物)存在于任何位置的不同数目或类型的取代基。另外，代谢物可以在相对于这里所示的化合物存在于任何位置的取代基的数目或类型上发生变化。另外，术语“代谢物”、“代谢化合物”、“苯甲酰胺代谢化合物”或“硝基苯甲酰胺代谢化合物”在这里可互换使用。

“手术”意思是对人或其它哺乳动物的身体进行的包括用手或手和仪器一起的方法行为以产生治愈、治疗或诊断效果的任何治疗或诊断过程。

“放射疗法”意思是将患者暴露于高能射线，包括但不限于X射线、伽马射线和中子辐射。这一类型的治疗包括但不限于外照射疗法、内照射疗法、植入物放射疗法、近距放射疗法、全身放射疗法和放射疗法(radiotherapy)。

“化疗”意思是通过各种方法(包括静脉内、口服、肌肉内、腹膜内、膀胱内、皮下、透皮、含服或吸入，或者栓剂的形式)向癌症患者施用一种或多种抗癌药物和/或其它物质。化疗可以在手术之前进行以使大的肿瘤缩小，随后通过手术过程切除，或者在手术或放射疗法之后进行以防止体内任何残留的癌细胞的生长。

术语“有效量”或“药学有效量”指的是无毒的但足以提供希望的生物的、治疗的和/或预防的结果的物质量。该结果可以是疾病的征兆、症状或诱因的减少和/或减轻，或者任何其它希望的生物系统的改变。例如，用于治疗用途的“有效量”是产生临床上疾病的显著减轻所需的如这里所公开的硝基苯甲酰胺代谢化合物本身或包含这里的硝基苯甲酰胺代谢化合物的组合物的量。在任何个别情况中的合适的有效量可以由本领域普通技术人员使用常规的试验确定。

“药学上可接受的”或“药理学上可接受的”意思是一种物质在生物学上或其它方面不是不合需要的，即该物质可以施用于个体而不引起不希望的生物学效应或不以有害的方式与包含该物质的组合物中的任何成分发生相互作用。

术语“治疗”及这里使用的其语法上的同义词包括实现治疗效果和/或预防效果。治疗效果意思是进行治疗的基础病症的根除或缓解。例如，在癌症患者中，治疗效果包括基础癌症的根除或缓解。治疗效果还通过一种或多种与基础病症相关的生理症状的根除或缓解而获得，从而在患者中观察到改善，尽管事实是患者可能仍受到基础病症的折磨。对于预防效果，可以在具有发生癌症的风险的患者身上，或者尽管可能还没有诊断出这一状态，但报告有这些状态的一种或多种生理学症状的患者身上实行本发明的方法，或者对这些患者施用本发明的组合物。

这里使用的“BA”意思是4-碘-3-硝基苯甲酰胺；“BNO”意思是4-碘-3-亚硝基苯甲酰胺；“BNHOH”意思是4-碘-3-羟氨基苯甲酰胺。

(i)硝基苯甲酰胺代谢化合物

用于本发明的前体化合物是式(Ia)化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、互变异构体、代谢物、类似物或前药，

其中，R₁、R₂、R₃、R₄和R₅独立地选自氢、羟基、氨基、硝基、碘、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、(C₃-C₇)环烷基和苯基，其中R₁、R₂、R₃、R₄和R₅五个取代基中的至少两个总是为氢，五个取代基中的至少一个总是为硝基，且位置与硝基相邻的至少一个取代基总是为碘。R₁、R₂、R₃、R₄和R₅也可以是如氯、氟或溴取代基的卤素。

优选的式Ia前体化合物是：

4-碘-3-硝基苯甲酰胺

(BA)

用于本发明中的代谢物是式(IIa)的化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、互变异构体、代谢物、类似物或前药：

其中，或者(1)R₁、R₂、R₃、R₄和R₅取代基中的至少一个总是为含硫的取代基，且R₁、R₂、R₃、R₄和R₅中其它的取代基独立地选自氢、羟基、氨基、硝基、碘、溴、氟、氯、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、(C₃-C₇)环烷基和苯基，其中R₁、R₂、R₃、R₄和R₅五个取代基中的至少两个总是为氢；或者(2)R₁、R₂、R₃、R₄和R₅取代基中的至少一个不为含硫的取代基且五个取代基R₁、R₂、R₃、R₄和R₅中的至少一个总是为碘，且其中所述碘总是与为硝基、亚硝基、羟氨基、羟基或氨基的R₁、R₂、R₃、R₄或R₅基团相邻。在某些实施方式中，(2)中的化合物为使得碘基总是与为亚硝基、羟氨基、羟基或氨基的R₁、R₂、R₃、R₄或R₅基团相邻。在某些实施方式中，(2)中的化合物为使得碘基总是与为亚硝基、羟氨基或氨基的R₁、R₂、R₃、R₄或R₅基团相邻。

下面的成分为优选的代谢化合物，各由以下化学式表示：

R₆选自氢、烷基(C₁-C₈)、烷氧基(C₁-C₈)、异喹啉酮、吲哚、噻唑、噁唑、噁二唑、噻吩或苯基                MS328

尽管不限于任何一种特定的机理，下面提供经由硝基还原酶或谷胱甘肽结合机制的MS292代谢的实例：

硝基还原酶机制

BA谷胱甘肽结合和代谢：

本发明提供前述硝基苯甲酰胺代谢化合物用于治疗其它乳腺癌(包括乳腺的导管癌)、其它形式的白血病(包括外周血中的急性早幼粒细胞白血病)、卵巢癌、肺癌、膀胱癌、前列腺癌、胰腺癌和子宫颈癌以及这里描述的其它癌症类型的用途。

已报道硝基苯甲酰胺代谢化合物对恶性癌细胞具有选择性细胞毒性，但对非恶性癌细胞没有。参见Rice等，Proc.Natl.USA 89：7703-7707(1992)。在一种实施方式中，本发明的方法中采用的硝基苯甲酰胺代谢化合物对肿瘤细胞比对非肿瘤细胞可以表现出更高选择性的毒性。

已经报道，当BSO共同施用于癌细胞时，增强了硝基苯甲酰胺和亚硝基苯甲酰胺化合物的抗肿瘤性。参见Mendeleyev等，Biochemical Pharmacol.50(5)：705-714(1995)。丁硫氨酸亚砜亚胺(BSO)抑制γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶，它是谷胱甘肽生物合成中的一种关键酶，而谷胱甘肽是造成细胞对化疗的抗性的部分原因。参见Chen等，Chem.Biol.Interact.Apr 24；111-112：263-75(1998)。本发明还提供治疗癌症的方法，包括与BSO联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和/或苯并吡喃酮化合物。或者，代谢化合物可以与前体化合物和/或苯并吡喃酮一起施用。

除了BSO以外，其它γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶抑制剂也可以与硝基苯甲酰胺和/或苯并吡喃酮化合物组合使用。BSO的其它合适的类似物包括，但不限于丙硫氨酸亚砜亚胺(proprothionine sulfoximine)、甲硫氨酸亚砜亚胺、乙硫氨酸亚砜亚胺、甲基丁硫氨酸亚砜亚胺、γ-谷氨酰-α-氨基丁酸和γ-谷氨酰半胱氨酸。

苯并吡喃酮化合物

在某些实施方式中，代谢化合物与苯甲酰胺化合物和/或式II的苯并吡喃酮化合物联合施用。式II的苯并吡喃酮化合物为，

式II

其中R₁、R₂、R₃和R₄独立地选自H、卤素、任选取代的羟基、任选取代的胺、任选取代的低级烷基、任选取代的苯基、任选取代的C₄-C₁₀杂芳基和任选取代的C₃-C₈环烷基，或其盐、溶剂合物、异构体、互变异构体、代谢物或前药。

在优选的实施方式中，本发明涉及下面的式II的苯并吡喃酮化合物，

6-氨基-5-碘-苯并吡喃酮

(BP)

(ii)硝基苯甲酰胺代谢化合物的机理

并不意图受某一作用机理的限制，据认为这里描述的化合物通过调节聚(ADP-核糖)聚合酶而具有抗癌性质。该药物的作用机理与它们作为核酶聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP-1)的配体的能力有关。参见Mendeleyev等，同上，(1995)。PARP-1在细胞核中表达并催化β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD⁺)转化成烟酰胺和聚-ADP-核糖(PAR)。PARP-1在稳态条件下的作用看起来局限于DNA转录和修复。但是，当细胞应激引起DNA损伤时，PARP-1活性急剧提高，这好象是基因组的完整性所必要的。Shall等，Mutat Res.Jun 30；460(1)：1-15(2000)。另外，尽管PARP-1是PARP酶家族中最著名的成员，但该作用机理可同样地应用于PARP家族的任何成员(例如，PARP-2至PARP-18，或者发现通过类似的作用机理起作用或与PARP-1共有类似结构的另外的成员)。

PARP-1的一个功能是生物聚合物—聚(ADP-核糖)的合成。聚(ADP-核糖)和PARP-1都与DNA修复、细胞凋亡、基因组稳定性的维持和癌的发生相关。参见Masutani等，Genes，Chromosomes，andCancer 38：339-348(2003)。PARP-1在DNA修复中，具体地说在碱基切除修复(BER)中发挥作用。BER是哺乳动物细胞中对于单碱基DNA断裂的保护机制。PARP-1通过其具有高亲和力的锌指结构域与DNA片段的端部结合，因而起到DNA损伤探测器的作用。Gradwohl等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87：2990-2994(1990)；Murcia等，TrendsBiochem.Sci 19：172-176(1994)。DNA断裂触发PARP-1与断裂位点的结合响应。然后PARP-1将其催化活性提高几百倍(参见Simonin等，J Biol.Chem.278：13454-13461(1993))并开始转化其本身(Desmarais等，Biochim.Biophys.Acta 1078：179-186(1991))和BER蛋白质(如DNA-依赖的蛋白激酶(DA-PKcs)和分子支架蛋白质XRCC-1)的聚ADP-核糖基化。参见Ruscetti等，J.Biol.Chem.Jun 5；273(23)：14461-14467(1998)和Masson等，Mol Cell Biol.June，18(6)：3563-71(1998)。BER蛋白质被迅速地招集到DNA损伤位点。El-Kaminsy等，Nucleic Acid Res.31(19)：5526-5533(2003)；Okano等，Mol Cell Biol.23(11)：3974-3981(2003)。PARP-1与DNA断裂位点解离，但保持在DNA修复场合的附近。

抑制PARP分子的活性包括降低这些分子的活性。术语“抑制”及其语法上的变形形式(如“抑制性的”)不意味着要求PARP活性的完全降低。这一降低优选为在不存在抑制效应时，例如在没有如本发明的硝基苯甲酰胺代谢化合物的抑制剂存在时，分子活性降低至少约50％、至少约75％、至少约90％，且更优选为至少约95％。最优选地，该术语指的是活性的可观察的或可测量的降低。在治疗的情况下，优选抑制作用足以在所治疗的状态中产生治疗和/或预防效果。短语“不抑制”和其语法上的变形形式不要求对该活性完全没有作用。例如，它指的是在如本发明的硝基苯甲酰胺代谢化合物的抑制剂存在的情况下PARP活性的降低低于约20％、低于约10％和优选低于约5％的情况。

另一作用机理可能包括肌苷一磷酸脱氢酶(IMPDH)的抑制。IMPDH是提供鸟苷酸(包括GTP和dGTP)的分支嘌呤核苷酸合成途径的限速酶。IMPDH存在两种同工型，I型组成性地存在于所有细胞中，而II型为可诱导的并存在于高增殖的细胞(如癌细胞)中。后一种酶的抑制导致肿瘤细胞生长和复制必需的细胞内鸟嘌呤核苷酸的严重耗竭。本发明的一种或多种代谢化合物可以作用于IMPDH，因此抑制肿瘤细胞生长。

再另一种作用机理可能包括组蛋白脱乙酰酶(HDAC)的抑制。转录因子池(transcription factor pool)中的肿瘤相关的改变可能导致对正常生长和发育具有重要性的基因的失调。嵌合的转录因子通过转录共阻遏物的异常募集作用和其相关的HDAC活性引起生长调节目标基因的转录抑制。在人急性早幼粒细胞白血病中，已发现涉及视黄酸受体的嵌合转录因子(PML-RARα和PLZF-RARα)抑制如RARβ基因的目标基因的转录。转录共阻遏物复合物包含HDAC活性，转录共活化物复合物包含组蛋白乙酰基转移酶活性。如制滴菌素A或NaBu的HDAC抑制剂能够减轻由嵌合转录因子PML-RARα和PLZF-RARα引起的转录抑制。HDAC抑制剂单独或与类维生素A组合已证明在急性早幼粒细胞白血病动物模型中引起白血病缓解和生存期延长而没有明显的副作用。

组蛋白的乙酰化和去乙酰化通过影响组蛋白与DNA的相互作用改变高级的染色质结构。转录因子也可以被乙酰化，且这些蛋白质的乙酰化状态可以影响它们与DNA的相互作用，以及它们与其它转录共调节蛋白质相互作用的能力。例如，p53的乙酰化增强了其序列特异性的DNA结合活性。去乙酰化的组蛋白与细胞生长有关，而高度乙酰化的组蛋白与细胞生长停滞、分化和/或细胞凋亡有关。

例如，Saito等人评价了MS-27-275(一种合成的苯衍生物)抑制HDAC的效力。Saito等，Proc.Natl.Acad.Sci.，1999；96：4592-4597。在多个成体肿瘤细胞系中，MS-27-275以亚微摩尔范围内的IC50抑制肿瘤细胞生长。细胞生长的抑制伴随着细胞周期的停滞和细胞周期抑制剂p21的诱导。MS-27-275经口给药以最低的毒性抑制经皮下植入裸鼠体内的已建立的成体肿瘤细胞系的生长。另外参见Jaboin等，Cancer Research，2002；62：6108-6115。

如此，本发明的化合物作为HDAC抑制剂可以调节转录活性。因此，本发明的化合物也可以起到阻止血管生成和细胞周期的作用，并促进细胞凋亡和分化。通过作用于肿瘤增殖的这些关键要素，HDAC抑制剂具有在快速变化的细胞生长抑制剂市场上占据不可替代(indomitable)的位置的潜力。HDAC抑制剂可以起到这种关键作用的两个主要原因是因为它们可以与其它治疗方案同时使用从而提高现有细胞生长抑制剂(如类维生素A)的效力，且此外，它们能够作用于特定的引起疾病的基因的转录，从而为癌症治疗提供前所未有的治疗窗。

苯甲酰胺代谢化合物的用途

癌症类型

本发明提供治疗一些具体的癌症或肿瘤的方法。例如，癌症类型包括肾上腺皮质癌、肛门癌、再生障碍性贫血、胆管癌、膀胱癌、骨癌、骨转移、成人CNS脑肿瘤、儿童CNS脑肿瘤、乳腺癌、血管滤泡性淋巴组织增生(Castleman病)、子宫颈癌、幼年期非霍奇金淋巴瘤、结肠和直肠癌、子宫内膜癌、食道癌、尤文氏(Ewing’s)肿瘤家族、眼癌、胆囊癌、胃肠道类癌肿瘤、胃肠道基质肿瘤、妊娠性滋养层细胞病、霍奇金氏病、卡波济肉瘤、肾癌、喉和下咽癌、急性淋巴细胞性白血病、急性骨髓性白血病、儿童白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性骨髓性白血病、肝癌、肺癌、肺类癌瘤、非霍奇金淋巴瘤、男性乳腺癌、恶性间皮瘤、多发性骨髓瘤、骨髓发育异常综合征、鼻腔和鼻旁癌、鼻咽癌、成神经细胞瘤、口腔和口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、阴茎癌、垂体瘤、前列腺癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、肉瘤(成人软组织癌症)、黑色素皮肤癌、非黑色素皮肤癌、胃癌、睾丸癌、胸腺癌、甲状腺癌、子宫肉瘤、阴道癌、外阴癌和瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症。

甲状腺癌是内分泌系统最常见的恶性肿瘤。甲状腺癌包括分化的肿瘤(乳头状的或滤泡性的)和弱分化的肿瘤(髓性的或间变的)。阴道癌包括鳞状细胞癌、腺癌、黑色素瘤和肉瘤。睾丸癌大体上分成精原细胞瘤和非精原细胞瘤型。

胸腺瘤是胸腺的上皮细胞瘤，其可能会或不会被非肿瘤性淋巴细胞广泛地浸润。术语胸腺瘤通常用于描述不显示出上皮成分的明显异型的肿瘤。表现出轮廓鲜明的细胞学异型和不再限于胸腺的组织学特征的胸腺上皮细胞瘤被称为胸腺癌(也称作C型胸腺瘤)。

本发明提供的方法可以包括与其它疗法结合施用苯甲酰胺代谢化合物。对可以与本发明的组合物共同施用的疗法的选择部分地取决于所治疗的状态。例如，对于治疗急性骨髓性白血病，本发明某些实施方式的苯甲酰胺化合物可以与放射疗法、单克隆抗体治疗、化疗、骨髓移植、基因疗法、免疫疗法或其组合结合使用。

乳腺癌

在一个方面中，本发明提供治疗乳腺癌的方法，该乳腺癌优选为乳腺导管组织中的导管癌。

可以通过本发明提供的方法治疗的乳腺癌存在几个类型。原位小叶癌和原位导管癌是分别在小叶和导管中发生，但不扩散到环绕乳腺的脂肪组织或身体的其它区域的乳腺癌。浸润性(或扩散性)小叶和导管癌是分别在小叶和导管中发生并扩散到乳腺的脂肪组织和/或身体的其它部分的癌症。将从本发明提供的方法的治疗中获得益处的其它乳腺癌是髓样癌、胶样癌、小管癌和炎性乳腺癌。

乳腺癌患者可用的治疗为手术、免疫疗法、放射疗法、化疗、内分泌疗法或其组合。乳房肿瘤切除术和乳房切除术是两种可能的乳腺癌患者可用的手术方法。

化疗采用抗肿瘤药物防止癌细胞增殖、扩散、转移和杀死患者。几种药物可用于治疗乳腺癌，包括细胞毒性药物，如阿霉素、环磷酰胺、氨甲蝶呤、紫杉醇、噻替派、米托蒽醌、长春新碱或其组合。内分泌疗法可能是剩余的乳腺组织保持内分泌敏感性的有效治疗方法。应用于该疗法的药物包括它莫西芬、醋酸甲地孕酮、氨鲁米特(aminoghitethimide)、氟甲睾酮、亮脯利特、戈舍瑞林(gosserelin)和泼尼松。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和手术、放射疗法、化疗或内分泌疗法而为乳腺癌患者提供有益的效果。

在某些实施方式中，本发明提供所谓的“三阴性”乳腺癌的治疗方法。有几种通过典型生物标志识别的乳腺癌亚类，如雌激素受体(ER)和/或黄体酮受体(PR)阳性肿瘤、HER2-扩增肿瘤和ER/PR/HER2-阴性肿瘤。这三种亚型已经通过多种乳腺癌中的基因表达分布型可再现地识别，并表现出基底细胞样(basal-like)亚型表达分布和较差的预后。三阴性乳腺癌的特征在于ER/PR/HER2-阴性肿瘤。

卵巢癌

在另一方面中，本发明提供治疗包括上皮性卵巢肿瘤在内的卵巢癌的方法。优选地，本发明提供治疗选自以下类型的卵巢癌的方法：卵巢中的腺癌和已经从卵巢转移到腹腔中的腺癌。手术、免疫疗法、化疗、激素治疗、放射疗法或其组合是卵巢癌患者可用的一些可能的治疗方法。一些可能的手术方法包括肿瘤减积术(debulking)，及单侧或双侧卵巢切除术和/或单侧或双侧输卵管切除术。

可以使用的抗癌药物包括环磷酰胺、依托泊苷、六甲蜜胺和异环磷酰胺。采用药物它莫西芬的激素治疗可以用于减小卵巢肿瘤。放射疗法可以是外照射疗法和/或近距放射疗法。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和手术、放射疗法、化疗、内分泌疗法或其组合而为卵巢癌患者提供有益的效果。

子宫颈癌

在另一方面中，本发明提供治疗子宫颈癌的方法，该子宫颈癌优选为子宫颈上皮中的腺癌。这一癌症存在两个主要的类型：鳞状细胞癌和腺癌。前者占到所有子宫颈癌的大约80-90％并在外宫颈(最靠近阴道的部分)和宫颈内膜(是靠近子宫的部分)相接的地方发生。后者在宫颈内膜的粘液产生腺细胞中发生。某些子宫颈癌同时具有这两者的特征并被称为腺鳞癌或混合癌。

子宫颈癌可用的主要治疗方法是手术、免疫疗法、放射疗法和化疗。一些可能的手术选择是冷冻手术、子宫切除术和子宫根治术。子宫颈癌患者的放射疗法包括外照射放射疗法或近距放射疗法。可以作为化疗的部分施用而治疗子宫颈癌的抗癌药物包括顺铂、卡铂(carboplatin)、羟基脲、伊立替康、博来霉素、长春新碱、丝裂霉素、异环磷酰胺、氟尿嘧啶、依托泊苷、氨甲蝶呤和其组合。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和手术、放射疗法、化疗或其组合而为子宫颈癌患者提供有益的效果。

前列腺癌

在一个另外的方面中，本发明提供治疗前列腺癌的方法，该前列腺癌优选选自腺癌或已转移到骨骼的腺癌的前列腺癌。前列腺癌在男性的环绕尿道第一部分的前列腺器官中发生。前列腺具有几种细胞类型，但99％的肿瘤是在负责产生精液的腺细胞中发生的腺癌。

手术、免疫疗法、放射疗法、冷冻手术、激素治疗和化疗是前列腺癌患者可用的一些治疗方法。治疗前列腺癌的可能的手术方法包括根治性耻骨后前列腺切除术、根治性经会阴前列腺切除术和腹腔镜根治性前列腺切除术。一些放射疗法的选择是外照射，包括三维适形放射疗法、调强放射疗法和适形质子束放射疗法。近距放射疗法(粒子植入(seed implantation)或组织间放射疗法)也是前列腺癌治疗可用的方法。冷冻手术是用于治疗局部前列腺癌细胞的另一种可能的方法。

激素治疗，也称作雄激素去势疗法(androgen deprivation therapy)或雄激素抑制疗法(androgen suppression therapy)，可以用于治疗前列腺癌。这一疗法可用的几种方法包括睾丸切除术，其中产生90％的雄激素的睾丸被切除。另一种方法是施用黄体生成素释放激素(LHRH)类似物以降低雄激素水平。可用的LHRH类似物包括亮脯利特、戈舍瑞林、曲普瑞林(triptorelin)和组氨瑞林(histrelin)。也可以施用LHRH拮抗剂，如阿巴瑞克(abarelix)。

用在身体内阻断雄激素活性的抗雄激素物质进行治疗是另一种可用的治疗方法。这类物质包括氟他胺、比卡鲁胺(bicalutamide)和尼鲁米特(nilutamide)。这一疗法通常与施用LHRH类似物或睾丸切除术结合，这称作联合雄激素阻断(CAB)。

在前列腺肿瘤扩散到前列腺外且激素治疗无效的情况下化疗可能是适宜的。可以施用抗癌药物(如阿霉素、雌氮芥、依托泊苷、米托蒽醌、长春花碱、紫杉醇、多西他赛、卡铂和泼尼松)以减缓前列腺癌的生长，减轻症状和改善生活质量。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和手术、放射疗法、化疗、激素治疗或其组合而为前列腺癌患者提供有益的效果。

胰腺癌

在另一方面中，本发明提供治疗胰腺癌的方法，该胰腺癌优选选自胰腺导管组织中的上皮样癌和胰腺导管中的腺癌的胰腺癌。

最常见的胰腺癌类型是在胰腺导管内层中发生的腺癌。胰腺癌可用的可能的治疗方法是手术、免疫疗法、放射疗法和化疗。可能的手术治疗选择包括胰末端切除或胰全切除和胰十二指肠切除术(惠普尔手术)。

放射疗法可以是胰腺癌患者的选择，具体地说，通过体外的仪器使射线聚焦于肿瘤上的外照射放射。另一种选择是在手术过程中采用的术中电子束照射。

化疗可以用于治疗胰腺癌患者。合适的抗癌药物包括5-氟尿嘧啶(5-FU)、丝裂霉素、异环磷酰胺、阿霉素、链脲菌素、氯脲菌素及其组合。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和手术、放射疗法或化疗而为胰腺癌患者提供有益的效果。

膀胱癌

在另一方面中，本发明提供治疗膀胱癌的方法，该膀胱癌优选为膀胱中的移行细胞癌。膀胱癌是尿道上皮癌(移行细胞癌)或衬于膀胱内的尿道上皮细胞中的肿瘤。膀胱癌的其它情况有鳞状上皮细胞癌、腺癌和小细胞癌。尿道上皮癌的几种亚型取决于它们是否是扩散性的和它们是乳头状的还是扁平的。非扩散性的肿瘤是在尿道上皮，膀胱的最内层中，而扩散性的肿瘤从尿道上皮扩散到膀胱的主肌肉壁的更深层中。扩散性的乳头状尿道上皮癌是分叉到膀胱的中空中心中的细长手指样突起，且还向外生长到膀胱壁中。非扩散性的乳头状尿道上皮肿瘤朝向膀胱的中心生长。非扩散性的扁平尿道上皮肿瘤(也称作原位扁平癌)限制于最靠近膀胱的内部中空部分的细胞层，而扩散性的扁平尿道上皮癌侵入更深层，特别是肌肉层。

为治疗膀胱癌，可以采用手术、放射疗法、免疫疗法、化疗或其组合。一些可能的手术选择是经尿道切除术、膀胱切除术或根治性膀胱切除术。膀胱癌的放射疗法可以包括外照射和近距放射疗法。

免疫疗法是可以用于治疗膀胱癌患者的另一种方法。通常，这通过膀胱内方式完成，它是通过导管将治疗物质直接施用于膀胱中。一种方法是卡介苗(BCG)，其中有时用于结核病疫苗的细菌通过导管直接给予膀胱。身体发动对细胞的免疫应答，从而攻击和杀死癌细胞。

免疫疗法的另一方法是施用调节免疫应答的干扰素类、糖蛋白类。干扰素α经常用于治疗膀胱癌。

可以用于治疗膀胱癌的化疗的抗癌药物包括塞替哌、氨甲蝶呤、长春花碱、阿霉素、环磷酰胺、紫杉醇、卡铂、顺铂、异环磷酰胺、吉西他滨或其组合。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和手术、放射疗法、免疫疗法、化疗或其组合而为膀胱癌患者提供有益的效果。

血液癌

淋巴瘤

B-细胞淋巴瘤

由恶性(癌性)B-淋巴细胞引起的非霍奇金淋巴瘤代表已知的淋巴瘤类型的一个大的亚类(在美国为大约85％)(另外两个亚类是T-细胞淋巴瘤和细胞类型为自然杀伤细胞或未知细胞类型的淋巴瘤)。细胞依赖于细胞之间的复杂信号处理过程和与身体中的外源物质的相互作用在其生命周期中发生许多的变化。各种类型的淋巴瘤或白血病可以在B-细胞生命周期中发生。

急性骨髓性白血病

在另一方面中，本发明提供治疗急性骨髓性白血病(AML)的方法，该AML优选为外周血中的急性早幼粒细胞白血病。AML在骨髓中开始，但可以扩散到身体的其它部分，包括淋巴结、肝脏、脾脏、中枢神经系统和睾丸。它是急性的，意味着它发展迅速且如果没有在几个月内进行治疗则可能是致命的。AML的特征是持续增殖和聚集的未成熟骨髓细胞，通常是粒细胞或单核细胞。

AML可以通过免疫疗法、放射疗法、化疗、骨髓或外周血干细胞移植或其组合进行治疗。放射疗法包括外照射且可能具有副作用。可以用于治疗AML的化疗中的抗癌药物包括阿糖胞苷、蒽环类抗生素、蒽二酮、伊达比星、柔红霉素、伊达比星、米托蒽醌、硫鸟嘌呤、长春新碱、泼尼松、依托泊苷或其组合。

单克隆抗体疗法可以用于治疗AML患者。为了提供杀死身体中的白血病细胞的手段，小分子或放射性化学物质可以在施用于患者之前连接到这些抗体上。结合AML细胞上的CD33的单克隆抗体，吉姆单抗奥佐米星(gemtuzumab ozogamicin)，可以用于治疗不能耐受现有的化疗方案的AML患者。

骨髓或外周血干细胞移植可以用于治疗AML患者。一些可能的移植方法是同种异体或自体移植。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和手术、放射疗法、化疗或移植疗法而为白血病患者提供有益的效果。

还存在也可以通过本发明提供的方法治疗的其它类型的白血病，包括但不限于急性淋巴细胞性白血病、急性骨髓性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性骨髓性白血病、毛细胞白血病、脊髓发育不良和骨髓增生性疾病。

肺癌

在另一方面中，本发明提供治疗肺癌的方法。肺癌的最常见的类型是非小细胞肺癌(NSCLC)，其占到肺癌的大约80-85％且被分成鳞状细胞癌、腺癌和大细胞未分化癌。小细胞肺癌占到肺癌的15-20％。

肺癌的治疗选择包括手术、免疫疗法、放射疗法、化疗、光动力学疗法或其组合。用于治疗肺癌的一些可能的手术选择是分段或楔形切除术、肺叶切除术或肺切除术。放射疗法可以是外照射疗法或近距放射疗法。

可用于治疗肺癌的化疗中的一些抗癌药物包括顺铂、卡铂、紫杉醇、多西他赛、吉西他滨、长春瑞滨、依立替康、依托泊苷、长春花碱、吉非替尼、异环磷酰胺、氨甲蝶呤或其组合。光动力学疗法(PDT)可以用于治疗肺癌患者。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和手术、放射疗法、化疗、光动力学疗法或其组合而为肺癌患者提供有益的效果。

皮肤癌

在另一方面中，本发明提供治疗皮肤癌的方法。有几种开始于皮肤的癌症类型。最常见的类型是基底细胞癌和鳞状细胞癌，其为非黑素瘤皮肤癌。光线性角化病为有时发展成鳞状细胞癌的皮肤状态。非黑素瘤皮肤癌很少扩散到身体的其它部分。黑色素瘤，皮肤癌中最少见的形式，更可能侵入附近组织并扩散到身体的其它部分。患有非黑素瘤和黑素瘤皮肤癌及光线性角化病的患者可用的不同类型的治疗包括手术、放射疗法、化疗和光动力学疗法。治疗皮肤癌的一些可能的手术选择是莫氏显微手术(MMS)、简单切除、电干燥法和刮除术、冷冻手术、激光手术。放射疗法可以是外照射疗法或近距放射疗法。正在临床试验中测试的其它类型的治疗有生物疗法或免疫疗法、化学免疫疗法、采用氟尿嘧啶的局部化疗和光动力学疗法。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和手术、放射疗法、化疗、光动力学疗法或其组合而为皮肤癌患者提供有益的效果。

眼癌，视网膜母细胞瘤

在另一方面中，本发明提供治疗眼视网膜母细胞瘤的方法。视网膜母细胞瘤是视网膜的恶性肿瘤。虽然视网膜母细胞瘤可以在任何年龄发生，但它最可能在较小的儿童(通常在5岁之前)中发生。该肿瘤可以仅在一只眼睛中或在两只眼睛中发生。视网膜母细胞瘤通常局限于眼睛且不扩散到邻近的组织或身体的其它部分。试图治愈患者和维持视力的治疗选择包括摘出术(手术以除去眼睛)、放射疗法、冷冻疗法、光凝固术、免疫疗法、温热疗法和化疗。放射疗法可以是外照射疗法或近距放射疗法。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和手术、放射疗法、冷冻疗法、光凝固术、温热疗法和化疗或其组合而为眼视网膜母细胞瘤患者提供有益的效果。

眼癌，眼内黑色素瘤

在另一方面中，本发明提供治疗眼内(眼)黑色素瘤的方法。眼内黑色素瘤，一种稀有的癌症，是在称为葡萄膜的眼部分中发现癌细胞的疾病。葡萄膜包括虹膜、睫状体和脉络膜。眼内黑色素瘤最经常在中年的人群中发生。用于眼内黑色素瘤的治疗包括手术、免疫疗法、放射疗法和激光疗法。手术是最常见的眼内黑色素瘤治疗方法。一些可能的手术选择是虹膜切除术、虹膜小梁切除术、虹膜睫状体切除术、脉络膜切除术、摘出术和眶内容摘除术。放射疗法可以是外照射疗法或近距放射疗法。激光疗法可以是用于毁灭肿瘤的强有力的光束、温热疗法或光凝固术。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和手术、放射疗法和激光疗法或其组合而为眼内黑色素瘤患者提供有益的效果。

子宫内膜癌

在另一方面中，本发明提供治疗子宫内膜癌的方法。子宫内膜癌是开始于子宫内膜(子宫的内衬)中的癌症。子宫癌和子宫内膜癌的一些实例包括，但不限于腺癌、腺棘皮瘤、腺鳞状细胞癌、乳头状浆液性腺癌、透明细胞腺癌、子宫肉瘤、基质瘤、恶性混合中胚叶肿瘤和平滑肌肉瘤。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和手术、放射疗法、化疗、基因疗法、光动力学疗法、抗血管生成疗法和免疫疗法或其组合而为子宫内膜癌患者提供有益的效果。

肝癌

在另一方面中，本发明提供治疗原发肝癌(在肝脏中开始的癌症)的方法。原发肝癌在成人和儿童中都可发生。对患有原发肝癌的患者可采用不同类型的治疗。这些包括手术、免疫疗法、放射疗法、化疗和经皮乙醇注射。可以使用的手术类型是冷冻手术、部分肝切除术、全肝切除术和射频消蚀(radiofrequency ablation)。放射疗法可以是外照射疗法、近距放射疗法、放射致敏剂或放射标记抗体。其它类型的治疗包括高温疗法和免疫疗法。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和手术、放射疗法、化疗、经皮乙醇注射、高温疗法和免疫疗法或其组合而为肝癌患者提供有益的效果。

肾癌

在另一方面中，本发明提供治疗肾癌的方法。肾癌(也称作肾细胞癌或肾腺癌)是在肾脏的小管内衬中发现恶性细胞的疾病。肾癌可以通过手术、放射疗法、化疗和免疫疗法治疗。一些可能的治疗肾癌的手术选择是肾部分切除术、简单肾切除术和根治性肾切除术。放射疗法可以是外照射疗法或近距放射疗法。干细胞移植可用于治疗肾癌。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和手术、放射疗法、化疗、免疫疗法和干细胞移植或其组合而为肾癌患者提供有益的效果。

甲状腺癌

在另一方面中，本发明提供治疗甲状腺癌的方法。甲状腺癌是在甲状腺组织中发现癌(恶性)细胞的疾病。甲状腺癌的四种主要类型是乳头状甲状腺癌、滤泡性甲状腺癌、甲状腺髓样癌和甲状腺间变癌。甲状腺癌可以通过手术、免疫疗法、放射疗法、激素疗法和化疗进行治疗。手术是甲状腺癌最常见的治疗方法。用于治疗甲状腺癌的一些可能的手术选择是叶切除术、甲状腺近全切除术、甲状腺全切除术和淋巴结清扫术(lymph node dissection)。放射疗法可以是外照射疗法或可能需要摄入含有放射性碘的液体。激素疗法使用激素阻止癌细胞生长。在治疗甲状腺癌时，激素可以用于阻止身体产生可能使癌细胞生长的其它激素。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和手术、放射疗法、激素疗法和化疗或其组合而为甲状腺癌患者提供有益的效果。

AIDS相关癌症

AIDS-相关淋巴瘤

在另一方面中，本发明提供治疗AIDS-相关淋巴瘤的方法。AIDS-相关淋巴瘤是在患有获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的患者的淋巴系统中形成恶性细胞的疾病。AIDS是由攻击和削弱人体的免疫系统的人类免疫缺陷病毒(HIV)引起的。然后免疫系统不能够迎击感染和侵袭人体的疾病。患有HIV疾病的人具有增大的发生感染、淋巴瘤和其它类型癌症的风险。淋巴瘤是影响淋巴系统的白细胞的癌症。淋巴瘤分成两个总的类型：霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤。霍奇金淋巴瘤和非霍奇金淋巴瘤都可以在AIDS患者中发生，但非霍奇金淋巴瘤更常见。当患有AIDS的人具有非霍奇金淋巴瘤时，这称为AIDS-相关淋巴瘤。非霍奇金淋巴瘤可以是进展缓慢的(生长迟缓的)或侵袭性的(生长快速的)。AIDS-相关淋巴瘤通常是侵袭性的。AIDS-相关淋巴瘤的三种主要类型是弥漫性大B-细胞淋巴瘤、B-细胞免疫母细胞淋巴瘤和小无裂细胞淋巴瘤。

AIDS-相关淋巴瘤的治疗将淋巴瘤的治疗与AIDS的治疗结合。患有AIDS的患者具有被削弱的免疫系统，且治疗可以引起进一步的损伤。因为这一原因，具有AIDS-相关淋巴瘤的患者通常使用比不具有AIDS的淋巴瘤患者更低剂量的药物进行治疗。高效抗逆转录病毒疗法(HAART)用于减缓HIV的进展。也使用防止和治疗(可能是严重的)感染的药品。AIDS-相关淋巴瘤可以通过化疗、免疫疗法、放射疗法和伴随干细胞移植的高剂量化疗进行治疗。放射疗法可以是外照射疗法或近距放射疗法。AIDS-相关淋巴瘤可以通过单克隆抗体疗法进行治疗。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和化疗、放射疗法和高剂量化疗或其组合而为AIDS-相关淋巴瘤患者提供有益的效果。

卡波济肉瘤

在另一方面中，本发明提供治疗卡波济肉瘤的方法。卡波济肉瘤是在皮肤或内衬于口、鼻和肛门的粘膜下的组织中发现癌细胞的疾病。典型卡波济肉瘤通常发生于犹太人、意大利人或地中海种族的年长男性中。这一类型的卡波济肉瘤进展缓慢，有时超过10-15年。卡波济肉瘤可以在服用免疫抑制剂的人中发生。在患有获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的患者中的卡波济肉瘤被称为流行性卡波济肉瘤。在患有AIDS的人中的卡波济肉瘤通常比其它种类的卡波济肉瘤更快地扩散且经常在身体的许多部分中发现。卡波济肉瘤可以用手术、化疗、放射疗法和免疫疗法治疗。外照射疗法是卡波济肉瘤的常用治疗方法。治疗卡波济肉瘤的一些可能的手术选择是局部切除术、电干燥法和刮除术、及冷冻疗法。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和手术、化疗、放射疗法和免疫疗法或其组合而对卡波济肉瘤提供有益的效果。

病毒诱导的癌症

在另一方面中，本发明提供治疗病毒诱导的癌症的方法。几种常见的病毒在特定恶性肿瘤的病因学中是清楚的或可能的病原。这些病毒或者正常地潜伏或者少数可能变成持续感染。肿瘤发生可能与受感染的宿主中病毒活化的水平提高相关联，从而反映了重病毒剂量或受抑的免疫控制。主要的病毒-恶性肿瘤系统包括乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)和肝细胞癌；1型人嗜T淋巴细胞病毒(HTLV-1)和成人T-细胞白血病/淋巴瘤；和人乳头状瘤病毒(HPV)和子宫颈癌。一般，这些恶性肿瘤在一生中相对较早地发生，典型地在中年或更早的时间达到高峰。

病毒诱导的肝细胞癌

HBV和HCV两种病毒与肝细胞癌或肝癌之间的因果关系已经通过大量的流行病学证据得到确定。这两种病毒都经由肝脏中的慢性复制通过引起细胞死亡和随后的再生而发挥作用。肝癌患者可使用不同类型的治疗。这些包括手术、免疫疗法、放射疗法、化疗和经皮乙醇注射。可以使用的手术的类型是冷冻手术、部分肝切除术、全肝切除术和射频消蚀。放射疗法可以是外照射疗法、近距放射疗法、放射致敏剂或放射标记抗体。其它类型的治疗包括高温疗法和免疫疗法。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和手术、放射疗法、化疗、经皮乙醇注射、高温疗法和免疫疗法或其组合而为病毒诱导的肝细胞癌患者提供有益的效果。

病毒诱导的成人T-细胞白血病/淋巴瘤

慢病毒(例如，HTLV-1)和成人T-细胞白血病(ATL)之间的关联已经确定。与在全世界范围内发现的其它致肿瘤病毒不同，HTLV-1受到高度的地理限制，主要在日本南部、加勒比地区、西非和中非及南太平洋岛屿发现。因果性的证据包括在携带者的几乎所有ATL病例中病毒基因组的单克隆整合。HTLV-1相关恶性肿瘤的危险因素表现为围产期感染、高病毒载量(viral load)和为男性(雄性)。

成人T-细胞白血病是血液和骨髓的癌症。成人T-细胞白血病/淋巴瘤的标准治疗方法是放射疗法、免疫疗法和化疗。放射疗法可以是外照射疗法或近距放射疗法。治疗成人T-细胞白血病/淋巴瘤的其它方法包括免疫疗法和伴随干细胞移植的高剂量化疗。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和放射疗法、化疗、免疫疗法和伴随干细胞移植的高剂量化疗或其组合而为成人T-细胞白血病患者提供有益的效果。

病毒诱导的子宫颈癌

子宫颈被人乳头状瘤病毒(HPV)感染是子宫颈癌最常见的原因。但是，并不是所有患有HPV感染的妇女都将发生子宫颈癌。子宫颈癌通常随时间缓慢地发生。在癌出现于子宫颈中之前，子宫颈细胞经历称为发育异常的变化，其中不正常的细胞开始出现在子宫颈组织中。后来，癌细胞开始生长并更深地扩散到子宫颈和周围区域中。子宫颈癌的标准治疗方法是手术、免疫疗法、放射疗法和化疗。可以使用的手术的类型是宫颈锥形切除术、全子宫切除术、双侧输卵管卵巢切除术、子宫根治术、盆腔廓清术、冷冻手术、激光手术和袢电外科切除术(loop electrosurgical excision procedure)。放射疗法可以是外照射疗法或近距放射疗法。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和放射疗法、化疗或其组合而对成人子宫颈癌提供有益的效果。

CNS癌症

脑和脊髓肿瘤是在作为中枢神经系统(CNS)主要部分的颅骨或骨质脊柱内部发现的组织的非正常生长。良性肿瘤是非癌性的，而恶性肿瘤是癌性的。CNS封装于刚性的、骨质处所中(即，颅骨和脊柱)，所以任何非正常的生长，不论是良性的还是恶性的，都可能对敏感组织施加压力和损害其功能。源于脑或脊髓的肿瘤被称为原发肿瘤。大多数原发肿瘤是由环绕和支持神经元的细胞中的不受控制的生长引起的。在少数的个体中，原发肿瘤可以由特定的遗传疾病(例如，神经纤维瘤病、结节性硬化症)引起或由于暴露于辐射或致癌化学物质而引起。大多数原发肿瘤的原因仍然是个谜。

诊断脑和脊髓肿瘤的第一步是神经学检查。也可以采用特殊的成像技术(计算机断层扫描和磁共振成像、正电子发射断层扫描)。实验室检验包括EEG和脊椎穿刺。活组织检查，一种从可疑的肿瘤抽取组织样本的手术方法，有助于医生诊断肿瘤的类型。

按照肿瘤看起来从其起源的细胞的种类对肿瘤进行分类。成人中最常见的脑肿瘤来自于被称为星形细胞的脑细胞，星形细胞构成血脑屏障并有助于中枢神经系统的营养。这些肿瘤被称为神经胶质瘤(星形细胞瘤、间变星形细胞瘤或多形性成胶质细胞瘤)并占到所有原发性中枢神经系统肿瘤的65％。这些肿瘤中的一些是，但不限于少突神经胶质细胞瘤、室管膜瘤、脑脊膜瘤、淋巴瘤、神经鞘瘤和成神经管细胞瘤。

CNS的神经上皮肿瘤

星形细胞肿瘤，如星形细胞瘤；间变(恶性)星形细胞瘤，如大脑半球的、间脑的、眼的、脑干的、小脑的；多形性成胶质细胞瘤；毛细胞性星形细胞瘤，如大脑半球的、间脑的、眼的、脑干的、小脑的；室管膜下的巨细胞星形细胞瘤；和多形性黄色瘤型星形细胞瘤。少突神经胶质肿瘤，如少突神经胶质细胞瘤和间变(恶性)少突神经胶质细胞瘤。室管膜细胞肿瘤，如室管膜瘤、间变性室管膜瘤、粘液乳头形室管膜瘤和亚室管膜瘤(subependymoma)。混合神经胶质瘤，如混合性少突星形细胞瘤、间变(恶性)少突星形细胞瘤和其它的(例如，室管膜星形细胞瘤)。起源不确定的神经上皮肿瘤，如极性成胶质细胞瘤、星形母细胞瘤和大脑胶质瘤病。脉络丛的肿瘤，如脉络丛乳头状瘤和脉络丛癌(间变性脉络丛乳头状瘤)。神经细胞和混合神经细胞神经胶质肿瘤，如神经节细胞瘤；小脑发育不良性神经节细胞瘤(Lhermitte-Duclos)；神经节神经胶质瘤；间变(恶性)神经节神经胶质瘤；婴儿型促纤维增生型神经节神经胶质瘤，如婴儿型促纤维增生型星形细胞瘤；中枢神经细胞瘤；胚胎发育不良性神经上皮肿瘤；嗅神经母细胞瘤(成感觉神经细胞瘤)。松果体实质(Pineal Parenchyma)肿瘤，如松果体瘤、成松果体细胞瘤和混合松果体瘤/成松果体细胞瘤。带有成神经细胞或成神经胶质细胞因素的肿瘤(胚胎性肿瘤)，如髓上皮瘤；具有多能分化的原始神经外胚层肿瘤，如成神经管细胞瘤；大脑原始神经外胚层肿瘤；神经母细胞瘤；视网膜母细胞瘤和成室管膜细胞瘤。

其它CNS肿瘤

鞍区(Sellar Region)的肿瘤，如垂体腺瘤、垂体腺癌和颅咽管瘤。造血系统肿瘤，如原发恶性淋巴瘤、浆细胞瘤和粒细胞肉瘤。生殖细胞肿瘤，如生殖细胞瘤、胚胎性癌、卵黄囊瘤(内胚层窦瘤)、绒毛膜癌、畸胎瘤和混合生殖细胞肿瘤。脑脊膜的肿瘤，如脑脊膜瘤、非典型脑脊膜瘤和间变(恶性)脑脊膜瘤。脑脊膜的非脑膜上皮肿瘤，如良性间充质肿瘤；恶性间充质肿瘤；原发黑色素细胞性病变；造血系统肿瘤；和组织发生不确定的肿瘤，如成血管细胞瘤(毛细血管成血管细胞瘤)。脑神经和脊神经的肿瘤，如许旺氏细胞瘤(神经鞘瘤(neurinoma)、神经鞘瘤(neurilemoma))；神经纤维瘤；恶性外周神经鞘肿瘤(恶性神经鞘瘤)，如上皮样的、不同的间质或上皮分化的和黑变病的肿瘤。区域性肿瘤的局部扩展，如副神经节瘤(化学感受器瘤)、脊索瘤、chodroma、软骨肉瘤和癌。转移性肿瘤，未分类肿瘤和肿瘤样病变，如Rathke裂囊肿、表皮样瘤、皮样囊肿、第三脑室的胶样囊肿、肠原囊肿、神经胶质囊肿、粒细胞肿瘤(迷芽瘤、垂体细胞瘤)、下丘脑神经细胞错构瘤、鼻部神经胶质异位(nasal glial herterotopia)和浆细胞肉芽肿。

可用的化学治疗剂包括，但不限于烷化剂，如环磷酰胺、异环磷酰胺、美法仑、苯丁酸氮芥、BCNU、CCNU、氮烯唑胺(Decarbazine)、甲苄肼、白消安和噻替派；抗代谢物，如甲氨蝶呤(Methotraxate)、5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、吉西他滨(Gemzar

)、6-巯基嘌呤、6-硫鸟嘌呤、氟达拉滨和克拉屈滨；蒽环类，如柔红霉素、阿霉素、伊达比星、表柔比星和米托蒽醌；抗生素类，如博来霉素；喜树碱类，如依立替康和托泊替康；紫杉烷类，如紫杉醇和多西他赛；及铂类，如顺铂、卡铂和奥沙利铂。

治疗方法是手术、放射疗法、免疫疗法、高温疗法、基因疗法、化疗和放射与化疗的组合。医生也可以开类固醇类以减轻CNS内部的肿胀。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和放射疗法、化疗或其组合而对成人子宫颈癌提供有益的效果。

PNS癌症

外周神经系统由从脑和脊髓分枝的神经组成。这些神经形成CNS和身体部分之间的通讯网络。外周神经系统进一步细分成躯体神经系统和植物性神经系统。躯体神经系统由到达皮肤和肌肉并参与意识活动的神经组成。植物性神经系统由将CNS连接到脏器(如心脏、胃和肠)的神经组成。它介导非意识活动。

听神经瘤是从平衡神经(也称为第八脑神经或前庭蜗神经)产生的良性纤维性生长。这些肿瘤是非恶性的，意味着它们不扩散或转移到身体的其它部分。这些肿瘤的位置深入到颅骨内部，邻近脑干中的关键脑中枢。随着肿瘤增大，它们累及到必须发挥关键功能的周围结构。在大多数情况中，这些肿瘤在数年的时间内缓慢地生长。

恶性外周神经鞘瘤(MPNST)是良性软组织瘤(如神经纤维瘤和神经鞘瘤)的恶性对应体。它最常见于深部软组织中，通常在神经干的非常近处。最常见的位置包括坐骨神经、臂丛和骶丛(sarcal plexus)。最常见的症状是通常促使进行活组织检查的疼痛。它是通常产生于成人三叉神经的感觉分枝的极少见的、侵袭性的和致命的眼窝肿瘤。恶性PNS肿瘤沿神经扩散以累及到脑，且大多数患者在临床诊断后5年内死亡。MPNST可以分成具有上皮样的、间充质的或腺性的特征的三个主要类别。MPNST中的一些包括，但不限于带软骨分化的皮下恶性上皮样神经鞘瘤、腺性的恶性神经鞘瘤、带神经束膜分化的恶性外周神经鞘瘤、带杆状特征的皮下上皮样恶性神经鞘瘤、表皮的上皮样MPNST、蝾螈瘤(带成横纹肌细胞分化的MPNST)、带成横纹肌细胞分化的神经鞘瘤。稀有MPNST病例包含多种肉瘤性组织类型，特别是骨肉瘤、软骨肉瘤和血管肉瘤。这些肿瘤有时不能与软组织的恶性间质瘤区分开。

其它类型的PNS癌症包括，但不限于恶性纤维性细胞瘤、恶性纤维性组织细胞瘤、恶性脑脊膜瘤、恶性间皮瘤和恶性混合苗勒氏肿瘤。

治疗方法是手术、放射疗法、免疫疗法、化疗和放射与化疗的组合。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和放射疗法、化疗或其组合而对PNS癌症提供有益的效果。

口腔和口咽癌症

对患有中枢神经系统(CNS)癌症的患者的治疗仍是一个难于完成的任务。已经用手术、免疫疗法、化疗、化疗与放射疗法的组合治疗如下咽癌、喉癌、鼻咽癌、口咽癌等等的癌症。依托泊苷和放线菌素D这两种常用的抑制拓扑异构酶II的抗肿瘤药物不能以有效的量穿过血脑屏障。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和放射疗法、化疗或其组合而对口腔和口咽癌症提供有益的效果。

胃癌

胃癌是在胃内衬中的细胞变化的结果。有三种主要类型的胃癌：淋巴瘤、胃基质瘤和类癌瘤。淋巴瘤是有时在胃壁中发现的免疫系统组织癌症。胃基质瘤从胃壁的组织发生。类癌瘤是胃的激素产生细胞的肿瘤。

胃癌的原因一直在争论。但都认为遗传和环境(饮食、抽烟等)的结合起到部分作用。常见的治疗方法包括手术、免疫疗法、化疗、放射疗法、化疗和放射疗法的组合或生物学疗法。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和放射疗法、化疗或其组合而对胃癌提供有益的效果。

睾丸癌

睾丸癌是通常在年轻男性的一个或两个睾丸中发生的癌症。睾丸的癌症在被称为生殖细胞的特定细胞中发生。在男性中发生的生殖细胞肿瘤(GCT)的两个主要类型是精原细胞瘤(60％)和非精原细胞瘤(40％)。肿瘤也可以在睾丸的支持和激素产生组织或基质中发生。这些肿瘤被称为性腺基质细胞瘤。两个主要类型是睾丸间质细胞瘤和睾丸支持细胞瘤。继发睾丸瘤是在另一器官中开始，然后扩散到睾丸的肿瘤。淋巴瘤是最常见的继发睾丸瘤。

常用的治疗方法包括手术、免疫疗法、化疗、放射疗法、化疗和放射疗法的组合或生物学疗法。几种药物通常用于治疗睾丸瘤：顺氯氨铂(顺铂)、足叶乙苷或VP-16(依托泊苷)和Blenoxane(硫酸博来霉素)。另外，可以使用异环磷酰胺粉针剂(Ifex)(异环磷酰胺)、长春花碱(Velban)(硫酸长春碱)和其它药物。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和放射疗法、化疗或其组合而对睾丸癌提供有益的效果。

胸腺癌

胸腺是位于胸腔上/前部中的小器官，从喉基部延伸到心脏前部。胸腺包含两种主要类型的细胞，胸腺上皮细胞和淋巴细胞。胸腺上皮细胞可以是胸腺瘤和胸腺癌的起源。淋巴细胞(不论是在胸腺中还是在淋巴结中)可以变成恶性并发展成被称为霍奇金氏病和非霍奇金淋巴瘤的癌症。胸腺也包含另一种被称为嗜银(Kulchitsky)细胞或神经内分泌细胞的极不常见的细胞类型，其通常释放特定的激素。这些细胞可以引起被称为类癌或类癌瘤的癌症，这些癌通常释放相同类型的激素，并类似于从身体中其它地方的神经内分泌细胞发生的其它肿瘤。

常见的治疗方法包括手术、免疫疗法、化疗、放射疗法、化疗和放射疗法的组合或生物学疗法。已经用于胸腺瘤和胸腺癌治疗的抗癌药物为阿霉素(亚德里亚霉素)、顺铂、异环磷酰胺、和皮质激素类(泼尼松)。通常，这些药物联合使用以提高其效力。用于治疗胸腺癌的组合包括顺铂、阿霉素、依托泊苷和环磷酰胺，及顺铂、阿霉素、环磷酰胺和长春新碱的组合。

本发明提供的方法可以通过施用硝基苯甲酰胺代谢化合物或联合施用硝基苯甲酰胺代谢化合物和放射疗法、化疗或其组合而对胸腺癌提供有益的效果。

联合疗法

本发明的一个方面提供了使用治疗方案的不同组合治疗癌症的方法。例如，这类组合可以包括，但不限于一种或多种硝基苯甲酰胺化合物与一种或多种不同抗肿瘤化学治疗剂、化学预防剂和/或限制副作用的物质结合使用。

抗肿瘤化学治疗物质

在本发明中使用的合适的抗肿瘤化学治疗剂包括，但不限于烷化剂、抗代谢物、天然抗肿瘤物质、激素抗肿瘤物质、血管生成抑制剂、分化试剂(differentiating reagent)、RNA抑制剂、DNA抑制剂、病毒复制的抑制剂、抗体或免疫治疗剂、肽物质、基因治疗物质、小分子酶抑制剂、生物效应调节剂和抗转移物质。

烷化剂

已知烷化剂通过癌细胞的巨分子(如DNA)的烷基化发挥作用，并通常是强亲电子试剂。这一活性可以破坏DNA合成和细胞分裂。这里适于使用的烷化剂的例子包括氮芥及其类似物和衍生物，包括环磷酰胺、异环磷酰胺、苯丁酸氮芥、雌氮芥、盐酸氮芥、美法仑和尿嘧啶芥。烷化剂的其它例子包括烷基磺酸盐(例如，白消安)、亚硝基脲(例如，卡莫司汀、洛莫司汀和链脲菌素)、三氮烯(例如，氮烯唑胺和替莫唑胺)、乙烯亚胺/甲基蜜胺(例如，六甲蜜胺和噻替派)和甲基肼衍生物(例如，甲苄肼)。包括在烷化剂组中的有烷化样含铂药物，包括卡铂、顺铂和奥沙利铂。

抗代谢物

抗代谢的抗肿瘤物质结构上与天然代谢物相似，并参与癌细胞的正常代谢过程，例如核酸和蛋白质的合成。它们与天然代谢物的不同足以干扰癌细胞的代谢过程。在本发明中使用的合适的抗代谢抗肿瘤物质可以按照它们影响的代谢过程分类，可以包括，但不限于叶酸类似物和衍生物、嘧啶类、嘌呤类和胞苷。适合于这里使用的叶酸类物质的成员包括，但不限于甲氨蝶呤(氨甲蝶呤)、培美曲塞及其类似物和衍生物。适合于这里使用的嘧啶类物质包括，但不限于阿糖胞苷、氟尿苷、氟尿嘧啶(5-氟尿嘧啶)、卡培他滨、吉西他滨及其类似物和衍生物。适合于这里使用的嘌呤物质包括，但不限于巯基嘌呤(6-巯基嘌呤)、喷司他丁、硫鸟嘌呤、克拉屈滨及其类似物和衍生物。适合于这里使用的胞苷物质包括，但不限于阿糖胞苷(胞嘧啶阿拉伯糖苷)、阿扎胞苷(5-阿扎胞苷)及其类似物和衍生物。

天然抗肿瘤物质

天然抗肿瘤物质包括抗有丝分裂物质、抗生素类抗肿瘤物质、喜树碱类似物和酶。适合于这里使用的抗有丝分裂物质包括，但不限于生物碱样长春花碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨及其类似物和衍生物。它们源自马达加斯加长春花植物并通常是对M期的细胞周期特异性的，从而结合癌细胞微管中的微管蛋白。适合于这里使用的其它抗有丝分裂物质是鬼臼毒素类，其包括，但不限于依托泊苷、替尼泊苷及其类似物和衍生物。这些物质主要作用于细胞周期的G2和晚S期。

天然抗肿瘤物质中还包括抗生素类抗肿瘤物质。抗生素类抗肿瘤物质是通常通过与癌细胞DNA相互作用而具有抗肿瘤性能的抗微生物药物。适合于这里使用的抗生素类抗肿瘤物质包括，但不限于博来霉素、更生霉素、阿霉素、伊达比星、表柔比星、丝裂霉素、米托蒽醌、喷司他丁、光辉霉素及其类似物和衍生物。

天然抗肿瘤物质分类还包括适合于这里使用的喜树碱类似物和衍生物，包括喜树碱、托泊替康和依立替康。这些物质主要地通过作用于核酶拓扑异构酶I发挥作用。天然抗肿瘤物质的另一个亚类是酶，L-天冬酰胺酶及其变异体。L-天冬酰胺酶通过催化循环的天冬酰胺水解为天冬氨酸和氨而使某些癌细胞耗竭L-天冬酰胺，从而发挥作用。

激素抗肿瘤物质

激素抗肿瘤物质主要地作用于与前列腺组织、胸腺组织、子宫内膜组织、卵巢组织、淋巴瘤和白血病有关的激素依赖癌细胞。这些组织可能对这类物质发生反应并依赖于它们，如糖皮质激素类、孕激素类、雌激素类和雄激素类。作为激动剂或拮抗剂的类似物和衍生物都适合于在本发明中用于治疗肿瘤。适合于这里使用的糖皮质激素激动剂/拮抗剂的例子是地塞米松、氢化可的松、皮质酮、泼尼松、米非司酮(RU486)、它们的类似物和衍生物。适合于这里使用的孕激素激动剂/拮抗剂亚类物质包括，但不限于羟孕酮、甲孕酮、醋酸甲地孕酮、米非司酮(RU486)、ZK98299、它们的类似物和衍生物。适合于这里使用的雌激素激动剂/拮抗剂亚类物质包括，但不限于雌激素、它莫西芬、托瑞米芬、RU58668、SR16234、ZD164384、ZK191703、氟维司群、它们的类似物和衍生物。适合于这里使用的抑制雌激素产生的芳香酶抑制药的例子包括，但不限于雄甾烯二酮、福美坦、依西美坦(exemestane)、氨鲁米特、阿那曲唑(anastrozole)、来曲唑、它们的类似物和衍生物。适合于这里使用的雄激素激动剂/拮抗剂亚类物质包括，但不限于睾酮、二氢睾酮、氟甲睾酮、睾内酯、庚酸睾酮、丙酸睾酮、促性腺激素释放激素激动剂/拮抗剂(例如，亮脯利特、戈舍瑞林、曲普瑞林、布舍瑞林)、己烯雌酚、阿巴瑞克(abarelix)、环孕酮、氟他胺、尼鲁他胺、比卡鲁胺、它们的类似物和衍生物。

血管生成抑制剂

血管生成抑制剂通过抑制肿瘤的血管形成而发挥作用。血管生成抑制剂涵盖了很多种物质，包括小分子物质、抗体物质和作用于RNA功能的物质。适合于这里使用的血管生成抑制剂的例子包括，但不限于兰尼单抗(ranibizumab)、贝伐单抗、SU11248、PTK787、ZK222584、CEP-7055、血管酶(angiozyme)、达肝素(dalteparin)、沙立度胺、苏拉明、CC-5013、考布他汀(combretastatin)A4磷酸酯、LY317615、大豆异黄酮、AE-941、干扰素α、PTK787/ZK222584、ZD6474、EMD121974、ZD6474、BAY543-9006、塞来考昔、氢溴酸卤夫酮(halofuginone hydrobromide)、贝伐单抗、它们的类似物、变异体或衍生物。

分化试剂

分化试剂通过诱导癌细胞分化的机制抑制肿瘤生长。适合于这里使用的这些物质的一个这种亚类包括，但不限于维生素A类似物或类维生素A和过氧化物酶体增生物激活受体激动剂(PPAR)。适合于这里使用的类维生素A包括，但不限于维生素A、维生素A醛(视黄醛)、视黄酸、芬维A胺、9-顺式-视黄酸、13-顺式-视黄酸、全反式视黄酸、异维甲酸、全反维生素A酸、棕榈酸视黄酯、它们的类似物和衍生物。适合于这里使用的PPAR激动剂包括，但不限于曲格列酮、环格列酮、替格列扎(tesaglitazar)、它们的类似物和衍生物。

RNA抑制剂

特定的RNA抑制物质可以用于抑制与癌症表型相关的信使RNA(“mRNA”)的表达和翻译。适合于这里使用的这些物质的例子包括，但不限于短干扰RNA(“siRNA”)、微小RNA(“miRNA”)、核酶和反义寡核苷酸。适合于这里使用的RNA抑制物质的特定例子包括，但不限于Cand5、Sirna-027、福米韦生(fomivirsen)和血管酶。

抗体/免疫治疗物质

抗体物质结合在癌细胞中选择性表达的靶标，并可以或者利用结合物杀死与靶标关联的细胞或者引起身体的免疫应答以毁灭癌细胞。免疫治疗物质可以由多克隆或单克隆抗体组成。抗体可以由非人类的动物(例如，小鼠)和人的成分组成，或者由完全的人的成分组成(“人源化抗体”)。适合于这里使用的单克隆免疫治疗物质的例子包括，但不限于作用于CD-20蛋白的利妥昔单抗、托西莫单抗(tosibtumomab)、替伊莫单抗(ibritumomab)。适合于这里使用的其它例子包括曲妥珠单抗、依决可单抗、贝伐单抗、西妥昔单抗、癌胚抗原抗体、吉妥珠单抗、阿仑单抗、mapatumumab、帕尼单抗(panitumumab)、EMD72000、TheraCIM hR3、2C4、HGS-TR2J和HGS-ETR2。

基因治疗物质

基因治疗物质将基因拷贝插入特定的患者细胞组中，并可以作用于癌细胞和非癌细胞。基因疗法的目标可以是用功能基因替换改变的基因，以刺激患者对癌症的免疫反应、使癌细胞对化疗更敏感、将“自杀”基因置于癌细胞中或抑制血管生成。可以使用病毒、脂质体或其它的载体(carrier)或媒介(vector)将基因输送到目标细胞。这可以通过将基因-载体组合物直接注射到患者体内或者使在体外感染的细胞回输到患者体内而完成。这样的组合物适合于本发明中使用。

小分子酶抑制剂

特定的小分子治疗物质能够作用于酪氨酸激酶的酶活性或特定细胞受体(如表皮生长因子受体(“EGFR”)或血管内皮生长因子受体(“VEGFR”))的下游信号转导信号。小分子治疗剂的这种定向作用可产生抗癌效果。适合于这里使用的这类物质的例子包括，但不限于伊马替尼、吉非替尼、埃罗替尼、拉帕替尼、卡奈替尼、ZD6474、索拉非尼(BAY43-9006)、ERB-569和它们的类似物和衍生物。

生物效应调节剂

特定的蛋白质或小分子物质可以通过直接的抗肿瘤作用或通过间接效应用于抗癌治疗。适合于这里使用的直接作用物质的例子包括，但不限于分化试剂，如类维生素A和类维生素A衍生物。适合于这里使用的间接作用物质包括，但不限于改变或增强免疫或其它系统的物质，如干扰素、白介素、造血生长因子(例如，促红细胞生成素)和抗体(单克隆的和多克隆的)。

抗转移物质

癌细胞从原肿瘤的位置扩散到身体的其它位置的过程被称为癌转移。一些物质具有抗转移特性，设计用于抑制癌细胞的扩散。适合于这里使用的这类物质的例子包括，但不限于马立马司他、贝伐单抗、曲妥珠单抗、利妥昔单抗、埃罗替尼、MMI-166、GRN163L、猎人-杀手肽(hunter-killer peptide)、金属蛋白酶的组织抑制剂(TIMP)、它们的类似物、衍生物和变异体。

化学预防物质

特定的药剂可以用于防止癌症的最初发生，或防止复发或转移。这些化学预防物质与一种或多种其它抗癌物质(包括硝基苯甲酰胺化合物)联用可以同时起到治疗和预防癌症复发的作用。适合于这里使用的化学预防物质的例子包括，但不限于它莫西芬、雷洛昔芬、替勃龙、二磷酸盐、伊班膦酸、雌激素受体调节剂、芳香酶抑制剂(来曲唑、阿那曲唑)、促黄体激素释放激素激动剂、戈舍瑞林、维生素A、视黄醛、视黄酸、芬维A胺、9-顺式-视黄酸、13-顺式-视黄酸、全反式视黄酸、异维甲酸、全反维生素A酸、维生素B6、维生素B12、维生素C、维生素D、维生素E、环氧酶抑制剂、非甾体抗炎药(NSAID)、阿司匹林、布洛芬、塞内昔布、多酚类、多酚E、绿茶提取物、叶酸、葡糖二酸、干扰素-α、茴香脑二硫杂环戊二烯(anethole dithiolethione)、锌、吡哆醇、非那雄胺、多沙唑嗪、硒、吲哚-3-甲醛(indole-3-carbinal)、α-二氟甲基鸟氨酸、类胡萝卜素、β-胡萝卜素、番茄红素、抗氧化剂、辅酶Q10、黄酮类化合物、槲皮苷、姜黄素、儿茶素、表焙儿茶素没食子酸酯、N-乙酰半胱氨酸、吲哚-3-甲醇、肌醇六磷酸酯、异黄酮、葡萄糖酸(glucanic acid)、迷迭香、大豆、锯榈和钙。适合于在本发明中使用的化学预防物质的其它例子是癌疫苗。它们可以通过用作为接种过程的目标的癌细胞类型的全部或部分对患者进行免疫而产生。

副作用限制物质

用硝基苯甲酰胺化合物单独或与其它抗肿瘤化合物结合治疗癌症可以同时施用能够缓解由抗肿瘤物质引起的副作用的药剂。适合于这里使用的这些物质包括，但不限于抗呕吐药、抗粘膜炎药、疼痛处理药、感染控制药和抗贫血/抗血小板减少药。适合于这里使用的抗呕吐药的例子包括，但不限于5-羟色胺3受体拮抗剂、灭吐灵、类固醇、劳拉西泮、昂丹司琼、大麻类物质、它们的类似物和衍生物。适合于这里使用的抗粘膜炎药的例子包括，但不限于帕利夫明(palifermin)(角化细胞生长因子)、胰高血糖素样肽-2、替度鲁肽(teduglutide)、L-谷氨酰胺、氨磷汀和成纤维细胞生长因子20。适合于这里使用的疼痛处理药的例子包括，但不限于阿片样物质、阿片制剂和非甾体抗炎化合物。适合于这里使用的感染控制药的例子包括，但不限于抗菌药物，如氨基糖苷类、青霉素类、头孢菌素类、四环素类、氯林可霉素、林可霉素、大环内酯类、万古霉素、碳青霉烯类、单环内酰胺类、氟喹诺酮类、磺胺类、硝基呋喃妥英类、它们的类似物和衍生物。适合于这里使用的可以治疗与化疗有关的贫血症或血小板减少症的药物的例子包括，但不限于促红细胞生成素和血小板生成素。

还有几种与硝基苯甲酰胺化合物和这里描述的其它化合物联用的其它合适的疗法。例如，参见Goodman & Gilman的ThePharmacological Basis of Therapeutics第11版。Brunton LL，Lazo JS和Parker KL编辑，McGraw-Hill，New York，2006。

制剂、给药途径和有效剂量

本发明的另一方面涉及包含硝基苯甲酰胺代谢化合物的药物组合物的制剂和给药途径。这些药物组合物可以用于以上面详细描述的方法治疗癌症。

在某些实施方式中，上面描述的代谢化合物可以单独地或组合地作为前药提供和/或可以允许在施用后在体内互变为亚硝基苯甲酰胺形式。此外，所述代谢化合物可以以式Ia的硝基苯甲酰胺施用，其可以作为前药提供和/或可以允许在施用后在体内互变为亚硝基苯甲酰胺形式。也就是说，或者硝基苯甲酰胺形式和/或亚硝基苯甲酰胺形式，或者药学上可接受的盐可以用于开发本发明中使用的制剂。此外，在某些实施方式中，代谢化合物可以与一种或多种其它化合物组合或以一种或多种其它的形式使用。例如，一种制剂可以同时包含特定比例的硝基苯甲酰胺代谢化合物和酸形式，取决于各物质的相对效力和预期的适应症。这两种形式可以一起配制在同一剂量单位中，例如在一个乳剂、栓剂、片剂、胶囊剂或将溶解于饮料中的粉末包装中；或者各形式可以配制在独立的单位中，例如两个乳剂、两个栓剂、两个片剂、两个胶囊剂、片剂和用于溶解该片剂的液体、粉末包装和用于溶解该粉末包装的液体等等。

包含硝基苯甲酰胺代谢化合物与另一种活性物质的组合的组合物可能是有效的。两种化合物和/或化合物形式可以一起配制在同一剂量单位中，例如在一个乳剂、栓剂、片剂、胶囊剂或将溶解于饮料中的粉末包装中；或者各形式可以配制在独立的单位中，例如两个乳剂、栓剂、片剂、两个胶囊剂、片剂和用于溶解该片剂的液体、粉末包装和用于溶解该粉末包装的液体等等。

术语“药学上可接受的盐”意思是保持本发明中使用的化合物的生物学效力和性质的那些盐，且其在生物学上或其它方面不是不合需要的。例如，药学上可接受的盐不干扰本发明的化合物治疗癌症的有益效果。

典型的盐是无机离子的那些盐，例如，举例来说，钠、钾、钙和镁离子的盐。这些盐包括与无机或有机酸生成的盐，这些酸如盐酸、氢溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、甲磺酸、对甲苯磺酸、醋酸、富马酸、琥珀酸、乳酸、扁桃酸、苹果酸、柠檬酸、酒石酸或马来酸。另外，如果本发明中使用的化合物含有羧基或其它酸性基团，它可以与无机或有机碱转化成药学上可接受的加成盐。合适的碱的例子包括氢氧化钠、氢氧化钾、氨水、环己胺、二环己基-胺、乙醇胺、二乙醇胺和三乙醇胺。

对于口服给药，代谢化合物可以很容易地通过混合活性化合物和本领域中公知的药学上可接受的载体进行配制。这些载体使得本发明的化合物能够配制成供所治疗的患者口服的片剂，包括咀嚼片剂、药丸、糖衣丸、胶囊、锭剂、硬糖剂、液体、凝胶、糖浆、膏剂、粉末、悬浮液、酏剂、糯米纸囊剂等等。这些制剂可以包含药学上可接受的载体，包括固体稀释剂或填充剂、无菌水性介质和各种非毒性的有机溶剂。一般地，包含的本发明的化合物的浓度水平在口服剂型总组合物重量的大约0.5％、大约5％、大约10％、大约20％或大约30％至大约50％、大约60％、大约70％、大约80％或大约90％的范围内，为足够提供希望的剂量单位的量。

水性悬浮液可以包含硝基苯甲酰胺代谢化合物和药学上可接受的赋形剂，如悬浮剂(例如，甲基纤维素)、湿润剂(例如，卵磷脂、溶血卵磷脂和/或长链脂肪醇)，以及着色剂、防腐剂、调味剂等等。

在某些实施方式中，由于，例如大的亲脂性结构的存在，可能需要油或非水性溶剂以使代谢化合物变成溶液。或者，可以使用乳液、悬浮液或其它制剂，例如脂质体制剂。对于脂质体制剂，可以使用制备治疗病症的脂质体的任何已知方法。参见，例如Bangham等，J.Mol.Biol，23：238-252(1965)和Szoka等，Proc.Natl Acad.Sci 75：4194-4198(1978)，这些文献通过引用引入本文。配体也可以连接到脂质体上以将这些组合物指引到特定的作用位点。本发明的化合物也可以合并到食物中，例如奶油干酪、黄油、沙拉调味料或冰淇淋中，以促进溶解、施用和/或特定患者群体的顺应性。

用于口服的药物制剂可以通过加入固体赋形剂，任选地研磨获得的混合物和在加入适当的辅剂(如果需要)后加工颗粒混合物获得，以获得片剂或糖衣丸芯。具体而言，合适的赋形剂是填充剂，如糖，包括乳糖、蔗糖、甘露醇、或山梨醇；调味成分；纤维素制剂，例如，举例来说，玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉、土豆淀粉、明胶、西黄蓍胶、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮(PVP)。如果需要，可以加入崩解剂，如交联聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、或者海藻酸或其盐，如海藻酸钠。化合物也可以配制为缓释制剂。

糖衣丸芯可以有合适的包衣。为这一目的，可以使用浓的糖溶液，其可以任选地包含阿拉伯胶、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮、卡波普凝胶、聚乙二醇和/或二氧化钛、漆溶液和合适的有机溶剂或溶剂混合物。染料或颜料可以加入到片剂或糖衣丸包衣中以用于识别或用于表征活性化合物剂量的不同组合。

可以口服使用的药物制剂包括由明胶制成的压合胶囊(push-fitcapsule)，以及由明胶和增塑剂(例如甘油或山梨醇)制成的软密封胶囊。压合胶囊可以包含与填充剂(如乳糖)、粘合剂(如淀粉)和/或润滑剂(如滑石粉或硬脂酸镁)以及任选的稳定剂混合的活性成分。在软胶囊中，活性化合物可以溶解或悬浮在合适的液体例如脂肪油、液体石蜡或液体聚乙二醇中。另外，可以加入稳定剂。所有口服施用的制剂应当具有适于施用的剂量。

对于注射，本发明的抑制剂可以在水性溶液中，优选在生理相容的缓冲液(例如，Hank′s液、Ringer′s液或生理盐水缓冲液)中配制。这些组合物还可以包括一种或多种赋形剂，例如防腐剂、增溶剂、填充剂、润滑剂、稳定剂、白蛋白等等。配制的方法是本领域已知的，例如在Remington′s Pharmaceutical Sciences，最新版，Mack PublishingCo.，Easton P中公开的方法。这些化合物也可以配制成经粘膜给药、口腔给药、吸入给药、肠胃外给药、经皮给药和直肠给药的制剂。

除了先前描述的制剂外，代谢化合物还可以配制成长效(depot)制剂。这些长时间有效的制剂可以通过植入或透皮输送(例如，皮下或皮内)、肌肉内注射或使用透皮贴片而施用。因此，例如，化合物可以用合适的聚合或疏水材料(例如，为可接受的油中的乳液)或离子交换树脂配制，或者作为微溶的衍生物，例如作为微溶的盐。

适于在本发明中使用的药物组合物包括其中活性成分以有效量，即在至少一种这里描述的癌症中获得治疗和/或预防效果的有效量存在的组合物。对于特定应用有效的实际量将取决于待治疗的一种或多种病症、对象的状态、制剂和给药途径，以及本领域技术人员已知的其它因素。硝基苯甲酰胺代谢化合物的有效量的确定可以由本领域技术人员根据本发明的公开来完成，且将使用常规的优化技术来确定。

实施例

实施例1：苯甲酰胺代谢物的鉴定

从狗、大鼠和小鼠获得血浆样品，其中动物施用了4-碘-3-硝基苯甲酰胺(BA)。通过用3倍体积(150μl)的乙腈沉淀血浆(50μl)对血浆和肿瘤样品进行制备以用于HPLC注射。通过每毫克组织加入1μl的乙腈对组织样品进行制备以用于HPLC注射，然后用电匀浆器进行匀浆。在离心后，150μl的各上清液蒸发至干，在50μl的0.2％甲酸水溶液中重新配制，并通过色谱和质谱技术(LC/MS/MS条件)进行分析。LC/MS/MS条件是：HPLC(Shimadzu VP System)；流动相：0.2％甲酸水溶液(A)和0.18％甲酸甲醇溶液(B)；柱：1 x 50mm Thermo BetaBasicC18柱；注射量：25μL；梯度：30分钟内0-60％ B；流速：100μL/min；质谱仪：Applied Biosystems/MDS SCIEX Q-STAR；界面：1/10分流的IonSpray；母离子扫描：200-900amu的TOF阳性；产物离子扫描：母离子扫描中60-900amu的最强离子的TOF产物离子；TOF校准：使用肾素底物进行外部校准。来自狗和小鼠血浆的代谢物鉴定的结果显示于如下的表1-3中：

表1.通过LC/MS/MS对来自狗血浆的BA代谢物进行鉴定的总结

^a大致ng/ml当量使用1μg/ml添加样品(spike sample)中的BSI-201作为参照标准进行测量。

为清楚起见，上面表1中的名称对应于上面公开的如下化合物(名称：化合物)：M2：MS472、M3：MS213和M4：MS263。

表2.通过LC/MS/MS对来自鼠血浆的BA代谢物进行鉴定的总结

^a大致ng/ml当量使用1μg/ml添加样品中的BSI-201作为参照标准进行测量。

为清楚起见，上面表2中的名称对应于这里公开的如下化合物(名称：化合物)：M3：MS472、M6：MS328、M7：MS213和M8：MS263。

表3.通过LC/MS/MS对来自狗血浆和红细胞的BA代谢物进行鉴定的总结

^a大致ng/ml当量使用5μg/ml添加样品中的BSI-201的207nmUV峰面积作为参照标准进行测量。

为清楚起见，上面表3中的名称对应于这里公开的如下化合物(名称：化合物)：M2：MS472和第二M2：MS601。

实施例2：体外研究-细胞毒性分析

不同起源的癌细胞系或原代细胞的不同类型可以接种在48孔板上(5 x 10⁴)或96孔板上(2 x 10⁴)。细胞可以在适宜的培养基中培养。培养物可以在37℃的培养箱中维持在95％ O₂/5％ CO₂的湿润气氛中。在细胞接种(24小时)后，除去培养基并在有或没有200μM的BSO存在的情况下用存在各种浓度的INO2BA或INH2BP的培养基替换。在37℃孵育6天后，使用Cell Titer-Blue，细胞存活性检测(Promega)测量细胞存活率(参见O′Brien，J.等，(2000)Investigation of the AlamarBlue(resazurin)fluorescent dye for the assessment of mammalian cellcytotoxicity.Eur.J.Biochem.267，5421-26及Gonzalez，R.J.和Tarloff，J.B.，(2001)Evaluation of hepatic subcellular fractions for Alamar Blueand MTT reductase)。这一分析采用基于检测活体染料减少的荧光/比色生长指标。细胞毒性通过生长抑制测量。

细胞毒性也可以通过计数活细胞的数目评估。通过用PBS清洗单层，随后在0.25％的胰蛋白酶和0.02％ EDTA中进行简短孵育而收获细胞。然后收集细胞，通过离心清洗两次并重悬于PBS中。通过用0.2％台盼蓝盐水溶液对小量的细胞悬液进行染色和在血细胞器中检查细胞而确定细胞数目和存活率。参见Kerley-Hamilton等，(2005)，p53-dominant transcriptional response to cisplatin in testicular germ celltumor-derived human embryonal carcinoma和Cheol等，(2005)，Induction of apoptosis and inhibition of cyclooxygenase-2 expression byN-methyl-N′-nitro-N-nitrosoguanidine in human leukemia cells。

实施例3：用BrdU-ELISA测量的细胞增殖

细胞可以在各种浓度的测试物质(药物)存在的情况下在37℃和潮湿气氛中以100μl/孔的终体积在黑色96孔MultiPlate(组织培养级；扁平，透明底)中孵育。如果细胞以100μl/孔进行培养，加入10μl/孔的BrdU标记溶液(终浓度：10μM BrdU)，且细胞在37℃下重孵育另外的2-24小时(如果细胞以200μl/孔进行培养，则加入20μl/孔的BrdU标记溶液)。MP以300xg离心10分钟，且用套管(canulla)吸除标记培养基。细胞使用吹风机干燥大约15分钟，或者可选择地在60℃干燥1小时。将200μl/孔的FixDenat加入到细胞中并在15-25℃孵育30分钟。通过轻弹和轻拍完全除去FixDenat溶液。加入100μl/孔的抗-BrdU-POD工作液并在15-25℃孵育大约90分钟。或者，这一孵育时间可以根据个别的要求在30-120分钟之间变化。通过轻弹除去抗体结合物，且孔用200-300μl/孔的清洗液漂洗3次。通过轻拍除去清洗液，然后向各孔中加入100μl/孔底物溶液。可以在具有光电倍增器的微板光度计中测量样品的光发射。

实施例4：体内植入和肿瘤生长

向100只雌性NU/NU-nuBR小鼠(Charles River，5-6周)中植入0.72mg的17β-雌二醇(人类)小球，用耳夹进行标记并在肿瘤细胞移植前24-48小时称重。肿瘤细胞，BT474，(2 x 10⁷细胞/小鼠)被注射到肩胛下乳房脂垫中(0.2ml体积)。在第21天开始卡尺测量且此后每周测量三次(周一、三、五)。按照是否存在肿瘤将动物分开，然后按照肿瘤体积将动物分开。动物在植入后的第三周开始每周称重两次(周一和周五)。当肿瘤体积为150-250mm³(L^*W^*H)时开始药物处理。药物和载体(vehicle)的给药通过管饲法(BP+BSO)每日两次(BID)或通过IP(BA)每日一次(SID)施用五天。在下一周期开始前有两天的休息期。动物可接受三个周期(每个周期5天)，除非出现意外的毒性。体重减轻超过初始值的15％或显示出特定的症状可以用作杀死动物的判断标准。药物通过管饲法或IP以5ml/kg的量施用。药物和载体在4℃贮存于箔覆盖的瓶子中。

研究设计

 

组	植入条件	植入的细胞	#小鼠	#需要的肿瘤	治疗(BID)
						1	Sc	2 x 107	20	10	无
2	Sc	2 x 107	20	10	载体(盐水中的10％DMSO)
						3	Sc	2 x 107	20	10	BP+BSO(175mg/kg+220mg/kg)P.O.
4	Sc	2 x 107	20	10	BA(5g/kg)I.P.
						5	Sc	2 x 107	20	10	Combo*(30mg/kg)I.P.和P.O.

^*BP+BSO和BA的组合

实施例4：异种移植研究

代谢化合物的效果可以在裸鼠中的人卵巢癌细胞(OVCAR)异种移植体上验证。

雌性NU/NU 37-BU-04-BAC小鼠(Charles River，5-6周)使用耳夹进行标记并在肿瘤细胞移植前24-48小时称重。将肿瘤细胞Ovcar3(5x 10⁶细胞/小鼠)皮下植入到雌性裸鼠宿主的肩胛下乳房脂垫中。在肿瘤细胞移植后的第7天开始卡尺测量且此后每周测量两次(周一和周五)。按照是否存在肿瘤将动物分开，然后按照肿瘤体积将动物分开。动物每周称重一次。当肿瘤尺寸为最大直径0.4-0.5cm时开始药物处理。4-碘-3-硝基苯甲酰胺(BA)(在50μl的100％ DMSO中/小鼠)和载体(50μl的100％ DMSO/小鼠)每天通过IP注射两次，进行五天。在下一周期开始前有两天的休息期。

研究设计

组植入植入的治疗

        条件         细胞

1       SC           5 x 10⁶           载体x2(50μl的100％ DMSO/小鼠)

2       SC           5 x 10⁶           BA 25g/kg x2/天(在50μl的100％ DMSO中/

                                                   小鼠)

3       SC           5 x 10⁶           BA 50g/kg x2/天(在50μl的100％ DMSO中/

                                                   小鼠)

4       SC           5 x 10⁶           无(对照)

实施例5：代谢化合物效力的评价

一般方法

将MDA MB 231人乳腺癌细胞皮下注射到雌性裸鼠的右侧腹中。对于任务1，BP可以在肿瘤细胞移植前施用连续五天，且此后的4-8周时间一周连续5天施用药物。对于任务2，在肿瘤达到50-60mm³的平均肿瘤体积时注射癌细胞，且小鼠分成每组八只的组并用玉米油：PEG 400(对照)、BP或CTX(MDA MB 231阳性对照)处理。在开始处理后监测肿瘤体积90天(对于MDA MB 231)。

细胞系

MDA MB 231是在1973年从创立细胞系前已用5-FU、阿霉素、氨甲蝶呤和CTX治疗3个月的患者的胸腔积液建立的人乳腺癌细胞系。该细胞系是雌激素受体阴性的并已经用于筛选不以激素拮抗剂为目标的抗癌药物。MDA MB 231在含有1.5g NaHCO₃/L、10％胎牛血清(FBS)和2mM L-谷氨酰胺的Dulbecco′s改良Eagle培养基(DMEM)中生长并在37℃维持在潮湿的5％ CO₂/空气培养箱中。培养基中不加抗生素。

动物肿瘤模型

小鼠

雌性CB.17 SCID小鼠(Charles River)为8-11周龄，并在研究的第一天具有12.6-23.0g的体重(BW)范围。动物随意饲喂水(反渗透，1ppm Cl)和由18.0％粗蛋白、5.0％粗脂肪和5.0％粗纤维组成的NIH 31改良和照射Lab 

。小鼠饲养在静止微隔离器中的照射

实验动物寝具上，12小时的光周期，21-22℃(70-72℉)的湿度和40-60％的湿度，实验室获得国际实验动物评估和认可委员会(Association for Assessment and Accreditation of Laboratory(AAALAC)International)的认证，其确保了符合实验动物的管理和使用的公认的标准。

肿瘤移植

在本研究中采用的人OVCAR-3(NIH-OVCAR-3)卵巢腺癌通过系列接种在无胸腺的裸鼠中维持。将肿瘤碎片(1mm³)皮下(s.c.)植入到各测试小鼠的右侧腹中。肿瘤每周监测两次，然后在其体积接近80-120mm³时每天监测。在研究的第一天，将动物分入具有63-221mm³肿瘤尺寸和大约105mm³的组平均肿瘤尺寸的处理组中。

以mm³计的肿瘤尺寸由下式计算：

肿瘤重量可以通过假设1mg相当于1mm³的肿瘤体积而估计。

处理

小鼠分成九组(n＝10)并按照方案进行处理。口服组从第一天下午到第68天上午每天两次口服接受BA(b.i.d.(每天两次)到结束)。Alzet型蠕动泵在第1、15和29天植入。该泵在37℃预温大约1小时，然后s.c.植入用异氟醚(isofluorane)麻醉的小鼠的左侧腹中。每个泵在14天的时间内输送总剂量25mg/kg/周的BA。

终点

肿瘤在研究期间每周进行两次卡尺测量。各动物在肿瘤达到预定终点尺寸(1,000mm³)时处死。各小鼠达到终点的时间通过下面的等式计算：

其中TTE以天表示，终点值以mm³表示，b为log-转换的肿瘤生长数据集的线性回归获得的直线的截距，且m为斜率。

数据集由超过研究终点值的第一观测值和直接在到达终点值前的三个连续的观测值组成。计算的TTE通常小于动物由于肿瘤尺寸而被处死的天数。未达到终点的动物在研究结束时处死，且指定TTE值等于最后天数(68天)。疗效由肿瘤生长延迟(TGD)确定，其定义为处理组与对照组相比中值TTE的增加：

TGD＝T-C，以天数表示，或者表示为对照组中值TTE的百分比：

$\%\mathrm{TGD}=\frac{T-C}{C}\×100$

其中，

T＝处理组的中值TTE

C＝对照组1的中值TTE

这些研究的结果显示于图4中。

瑞士NCr裸(nu/nu)雌性小鼠，4-5周龄，从Taconic(Germantown，NY)购得。动物每笼三只饲养于从Bio Bubble，Inc.(Fort Collins，CO)购买的屏障洁净室(barrier clean room)中的顶部装有除菌过滤器的(filter-topped)笼中。在到达时，在使用前对它们进行四个工作日的检疫。温度维持在72±5℉和相对湿度维持在35-70％，且采用12小时的光/暗周期。小鼠随意饲喂无菌的、可高压加热的、经检定的Purina鼠饲料。饮用水进行酸化和高压消毒，且水源水进行再循环、去离子化、UV-处理和5μm过滤。

在动物通过检疫后，小鼠用1或5 x 10⁶MDA MB 231细胞(0.1ml注射体积)在右侧腹进行皮下注射。用于任务1的小鼠在细胞注射前接受5天的预处理。每周测量两次肿瘤尺寸和体重。用游标卡尺在三个平面内测量肿瘤，且肿瘤体积(V)如下计算：V＝π(x×y×z)/6，其中x、y和z是肿瘤测量值减去皮肤厚度。在实验结束时，小鼠通过吸入CO²后颈椎脱位处死。

药剂

MS472可以以30mg/ml和100mg/ml的浓度在玉米油：PEG400(2:1，V/V)中制备。药物可以是这些浓度下的悬浮液。阳性对照药物以磷酸盐缓冲盐水(PBS)和15mg/ml的CTX制备。两种药物都在使用前过滤除菌(0.2μm过滤器)。

处理方案

对于任务1，将要植入MDA MB 231肿瘤细胞的小鼠用MS472(300或1000mg/kg)预处理5天，且在皮下注射细胞悬液后，在最少4周内每周连续5天(周一至周五)进行药物处理。

对于任务2，在肿瘤体积达到预定尺寸(平均肿瘤体积50-60mm³)后，将小鼠分成每组8只小鼠的处理组。所有BP处理在至少4周的时间每周进行5次(周一至周五)。CTX仅以150mg/kg的剂量腹膜内施用一次。所有BP处理口服施用，对于移植了MDA MB 231细胞的那些动物其剂量为1000或2000mg/kg。对于各项任务，所有处理在同一天开始。

肿瘤在第一次处理后每周测量两次，至少9周(MDA MB 231)。在各时间点计算各组的平均肿瘤体积。特定时间的组间对比使用非配对的双侧t-检验进行，且结果使用变量分析(ANOVA)进行分析。对于任务2，单个肿瘤体积(V)表示为第0天(处理的第一天)时肿瘤体积(V0)的分数。对于各组，比率V/V0的平均值作为处理后时间的函数作图。根据肿瘤对处理的反应，处理效应通过两种方式进行测量。在对处理有反应的组中，通过时间-log(肿瘤体积)函数曲线图的线性回归确定各肿瘤的肿瘤体积倍增时间(VDT)和肿瘤体积四倍倍增时间(VQT)。确定各处理组的肿瘤生长延迟并使用ANOVA对组间对比进行分析。

从处理后体重的减轻评估系统毒性。小鼠在随访期结束时处死，或者在更早的时间在其肿瘤体积达到1600mm³或出现肿瘤溃疡时处死。

统计分析

统计分析可以使用InStat(Graphpad Software，San Diego，CA)进行。

肿瘤生长

MDA MB 231肿瘤可能在肿瘤细胞注射的3周内是可测量的，且通常更缓慢地生长，倍增时间为7天。可以从对照组计算各值。在处理开始时的平均肿瘤体积和体重可以以下表所示的形式显示，表4用于任务1，表5用于任务2。

表4 处理开始时的小鼠参数-任务1

^*SEM＝平均值的标准误

表5 处理开始时的小鼠参数-任务2

^*SEM＝平均值的标准误

上述实施例并不意图以任何方式限制本发明的范围。此外，本领域技术人员可以理解的是，可以对本发明作出许多改变和修饰而不脱离所附的权利要求的精神和范围，且这些改变和修饰预期在本发明的范围内。

实施例6：细胞周期分析

HCT116和Hela细胞从ATCC获得。对于DNA含量分析，用PBS清洗2 x 10⁵细胞两次并在70％乙醇中固定。细胞在37℃用100单位/mL的RNase A处理20分钟，按照制造商的方案重悬在含有AlexaFluor

 405荧光染料(Invitrogen)的冷PBS中。细胞通过流式细胞仪进行分析。图1显示(FACS点图和柱状图)用PARP-1抑制剂(4-碘-3-硝基苯甲酰胺或“BA”)处理19小时的HTC116细胞的细胞周期分析。BA处理引起G1期的细胞数目(48.6％)与对照(18.6％)相比增加，伴随着细胞周期S期细胞数目的降低。

对于DNA复制分析，2 x 10⁵细胞与50μmol/L的溴脱氧尿苷(BrdUrd)一起孵育30分钟。细胞在70％乙醇中固定，并按照制造商的方案通过使用抗-BrdUrd-FITC抗体(Becton Dickinson，FranklinLakes，NJ)的流式细胞分析确定BrdUrd掺入量。为评价G2/M检查点的水平，有丝分裂细胞使用有丝分裂特异性抗体GF-7通过流式细胞仪进行分析。固定的细胞与GF7-藻红蛋白(PE)抗体(BD BiosciencesPharmingen)一起孵育30分钟，用PBS清洗并通过流式细胞仪进行分析。图2比较了用BA、BNO(4-碘-3-亚硝基苯甲酰胺)和BNHOH(4-碘-3-羟氨基苯甲酰胺)在24小时孵育时获得的结果。图3显示了BA、BNO和BNHOH在72小时时的结果。

图象分析和显微术。在盖玻片上生长的细胞用PBS中的4％多聚甲醛固定10分钟并在70％乙醇中通透化。在清洗后，盖玻片在50％PBS/50％甘油中安置在载玻片上。通过显微方法分析图象。

MDR1表达FACS分析

KB-V1是KB-3-1人癌细胞系的长春花碱抗性克隆(Fojo，A.T.，J.Whang-Peng，M.M.Gottesman和I.Pastan.1985.Amplification of DNAsequences in human multidrugresistant KB carcinoma cells.Proc.Nail.Acad.Sci.USA 82：7661-7665.，Shen，D.-W.，C.Cardarelli，J.Iwang，M.Cornwell，N.Richert，S.Ishii，I.Pastan和M.M.Gottesman.1986.Multiple drug-resistant human KB carcinoma cells independentlyselected for high-level resistance to colchicine，Adriamycin，orvinblastine show changes in expression of specific proteins.J.Biol.Chem.261：7762-7770)。细胞在含有10％胎牛血清的Eagle基本必需培养基中增殖。

对于MDR1，染色的细胞通过胰蛋白酶化收获，在补充有5％ PBS的Iscove′s改良Dulbecco′s培养基中清洗，然后重悬在含有抗-Mdr1抗体UIC2的IMDM/5％ FBS中。在与第一抗体一起孵育后，对细胞进行清洗，然后与偶联到藻红蛋白(PE)抗体(BD BiosciencesPharmingen)上的第二抗体一起孵育。对抗体处理的细胞进行清洗，然后在FACSCalibur

仪(Becton Dickinson)上进行分析。在FACS分析中使用的对照是没有与抗体一起孵育的细胞，已经与同种型对照抗体一起孵育的细胞。分析了一式三份的样品，且对它们的柱状图进行分析。荧光度中值在log坐标上作图。图5A和5B分别显示了KB3-1和KB V-1细胞中MDR1的水平。因此，FACS柱状图表明了MDR1在KB V-1细胞中的过度表达。MDR1的过度表达与多药抗性有关。

集落形成分析

细胞进行胰蛋白酶消化、计数并稀释到10⁶细胞/ml的终浓度。集落形成分析通过将适宜数目的细胞接种到培养皿(一式三份)进行，并用0-100μM的化合物处理。14天后，固定细胞并用1％结晶紫染色，对集落进行计数。图5C显示了这一试验在KB 3-1和KB V-1细胞中的结果。在图5C中可以看出，BA以剂量依赖的方式减少了过度表达MDR1的细胞和MDR1正常细胞的细胞集落数目。由于MDR1的过度表达与多药抗性有关，这一结果表明BA将对多药抗性肿瘤有效。

尽管这里显示和描述了本发明的优选实施方式，但对本领域技术人员显而易见的是，这些实施方式只是以举例的方式给出。现在本领域技术人员想到的多种变形、改变或替换不脱离本发明的范围。应当理解，这里描述的本发明实施方式的各种替代方式可以用于实施本发明。下面的权利要求限定本发明的范围，因而本发明涵盖这些权利要求范围内的方法和结构及其等同方法和结构。

Claims (10)

1、结构式(IIa)的化合物及其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、互变异构体、代谢物、类似物或前药：

其中，R₁、R₂、R₃、R₄和R₅取代基中的至少一个总是为硫，且这些R基团独立地选自氢、羟基、氨基、硝基、碘、溴、氟、氯、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、(C₃-C₇)环烷基和苯基，其中R₁、R₂、R₃、R₄和R₅五个取代基中的至少两个总是为氢；或者其中，如果R₁、R₂、R₃、R₄和R₅取代基中的至少一个不为硫，则五个取代基中的至少一个总是为碘，且其中所述碘总是与为亚硝基、羟氨基、羟基或氨基的R基团相邻。

2、选自MS213、MS472、MS601、MS328、MS263、MS276、MS278、MS456、MS183、MS261、MS182、MS635a、MS635b、MS471、MS414和MS692的化合物。

3、如权利要求2所述的化合物，其中所述化合物为其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、互变异构体、代谢物、类似物或前药的形式。

4、一种治疗癌症的方法，包括向需要的对象施用有效量的包含式(IIa)的化合物和其药学上可接受的盐、溶剂合物、异构体、互变异构体、代谢物、类似物或前药的组合物：

其中R₁、R₂、R₃、R₄和R₅取代基中的至少一个总是为硫，且这些R基团独立地选自氢、羟基、氨基、硝基、碘、溴、氟、氯、(C₁-C₆)烷基、(C₁-C₆)烷氧基、(C₃-C₇)环烷基和苯基，其中R₁、R₂、R₃、R₄和R₅五个取代基中的至少两个总是为氢；或者其中，如果R₁、R₂、R₃、R₄和R₅取代基中的至少一个不为硫，则五个取代基中的至少一个总是为碘，且其中所述碘总是与为亚硝基、羟氨基、羟基或氨基的R基团相邻。

5、一种治疗癌症的方法，包括向需要的对象施用有效量的包含选自MS213、MS472、MS601、MS328、MS263、MS276、MS278、MS456、MS183、MS261、MS182、MS635a、MS635b、MS471、MS414和MS692的化合物的组合物。

6、如权利要求4或5所述的方法，进一步包括施用有效量的丁硫氨酸亚砜亚胺。

7、如权利要求4或5所述的方法，其中在患者体内，聚-ADP-核糖聚合酶(PARP)分子受到式(Ia)和/或式(IIa)的化合物的抑制。

6、如权利要求4或5所述的方法，其中患者体内的肿瘤细胞经历凋亡、细胞周期停滞和/或坏死。

7、如权利要求4或5所述的方法，进一步包括施用有效量的式(II)的苯并吡喃酮化合物。

8、治疗癌症的方法，包括向需要的对象施用有效量的一种或多种化合物，其中各所述的一种或多种化合物为MS213、MS472、MS601、MS328、MS263、MS276、MS278、MS456、MS183、MS261、MS182、MS635a、MS635b、MS471、MS414、MS692或其组合。

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