CN101522686A

CN101522686A - 制备喜树碱酯的方法

Info

Publication number: CN101522686A
Application number: CNA2007800380564A
Authority: CN
Inventors: 曹志松
Original assignee: Stehlin Foundation for Cancer Research
Current assignee: Stehlin Foundation for Cancer Research
Priority date: 2006-08-11
Filing date: 2007-08-02
Publication date: 2009-09-02
Also published as: BRPI0714277A2; EP2049545B1; JP2010500350A; KR20090036585A; MX2009001505A; US7928235B2; CA2658720A1; WO2008021015A3; RU2009108641A; US20080045717A1; RU2441008C2; EP2049545A2; WO2008021015A2

Abstract

描述了制备CPT－酯的方法。该方法包括在喜树碱的酯化反应或酰化反应中使用至少一种酸。

Description

制备喜树碱酯的方法

本申请根据35 U.S.C.§119(e)要求2006年8月11日提交的在先美国临时专利申请60/837,437号的权益，将该申请全文引入本申请作为参考。

发明领域

本发明涉及制备喜树碱酯的方法。

发明背景

已经证明喜树碱，即首先由Wall及其合作者分离自喜树(CamptothecaAcuminata)(珙桐科(Nyssaceae))的木材和树皮的细胞毒性生物碱(J.Am.Chem.Soc.88，3888，1966)具有对小鼠白血病L1210系统的抗肿瘤活性。喜树碱，即具有通常存在的吲哚生物碱基团的生物碱，其结构(Heckendorf等，JOrg.Chem.41，2045，1976)为如下面式(X)所示。

该化合物(＂CPT＂)具有五环环系，该环系仅在环E上有一个具有20(S)-构型的不对称中心。该五环环系包括吡咯并[3，4-b]喹啉部分(环A，B和C)，共轭吡啶酮(环D)和含有α-羟基的6-元内酯(环E)。喜树碱从其开始被分离以来因其在小鼠白血病L 1210系统显著的活性而具有重要意义。早期喜树碱的抗肿瘤活性数据通过在小鼠中使用实验移植的恶性肿瘤，诸如白血病L1210，或在大鼠中的Walker 256肿瘤获得(Chem.Rev.23，385，1973，CancerTreat.Rep.60，1007，1967)。随后的临床研究说明该化合物因其高毒性而不能用作体内抗癌药。喜树碱自身不溶于水。因此，早期在临床上评价了喜树碱的水溶性羧酸钠盐。这种形式的喜树碱产生严重的毒性并且看起来没有抗癌活性(Gottlieb等，Cancer Chemother.Rep.54，461，1970，和56,103，1972，Muggia等，Cancer Chemother.Rep.56，515，1972，Moertel等，CancerChemother.Rep.56，95，1972，和Schaeppi等，Cancer Chemother.Rep.5：25，1974)。这些结果导致II期试验停止。对该活性剂的持续评价表明羧酸钠盐仅有具有完整闭合内酯环的天然喜树碱有效性的10％(Wall等，InInternational Symposium on Biochemistry And Physiology of The Alkaloids，Mothes等，eds.，Academie-Verlag，Berlin，77，1969，Giovanella等，Cancerres.51，3052，1991)。此外，已经建立了喜树碱家族中抗肿瘤活性的重要参数(Wall等，Ann.Rev.，Pharmacol.Toxicol.17，117，1977)。这些结果表明完整的内酯环E和α-羟基对抗肿瘤活性是必不可少的。

在1989年，Giovanella等发现某些喜树碱的非水溶性衍生物对人肿瘤的异种移植物具有高度抗肿瘤活性(Giovanella等，Science，246，1046，1989)。还说明给药具有闭合内酯环的喜树碱优于注射水溶性羧酸盐(Giovanella等，Cancer Res.，51，3052，1991)。这些发现进一步证明完整内酯环对生物活性的重要性。

20(S)-喜树碱(＂CPT＂)的开环导致在小鼠中的抗癌活性远比在人中更有效。实际上，已经证明经肌内(＂i.m.＂)，皮下(＂s.c＂)和胃内(＂i.s.＂)给药的CPT为针对小鼠中的人肿瘤的很有效的抗癌药，即当作为异种移植物在裸鼠中生长时(Giovanella等，Cancer Res.51：3052，1991)。然而，当在人体中用CPT治疗肿瘤时，显示出在人体中比在小鼠中抗癌活性的程度低(Stehlin等，InCamptothecins：New Anticancer Agents，1995，CRC Press，pp.59-65)。

使用其它CPT-衍生物观察到了相同的现象。在小鼠中，已经证明9-硝基喜树碱(＂9NC＂)对人体肿瘤异种移植物的有效性是CPT的2-3倍，能全部根除所有被治疗的人体恶性肿瘤(Pantazis等，Cancer Res.53：1577，1993；Pantazis等，Int.J.Cancer 53：863，1995)。

药理学研究证明在i.s给药后血浆中大部分(57％)的9NC药物以闭合内酯形式存在。对I期临床试验患者口服给药后的9NC血浆水平的药理学研究证明平均仅有～3％的药物以闭合内酯形式存在。

与这类发现更完全一致的是，在这组患者中的临床反应，尽管高于使用CPT获得的那些反应，但是远低于在小鼠中获得的结果(在小鼠中32/32完全肿瘤消退，与之相比，在人体中为2/32)。显然，对减缓和延缓在进入血液循环时内酯环开环的改进存在迫切需求。

开环特别存在的问题在于喜树碱在生理学pH，即7或7以上时以两种不同形式存在，正如下列平衡式所示；

在较高pH下喜树碱的生物活性内酯环与水的水解反应得到生物学上无活性的开环形式。另外，使用CPT及其类似物水解的问题在人体血液中加剧，因为主要的人血清白蛋白(HSA)优先结合羧酸酯形式，这使得内酯/羧酸酯平衡向无活性形式方向移动(J.Biochem.，212，285-287，1993；Biochemistry，33，10325-10336，1994；Biochemistry，33，12540-12545，1994)。因此，保持该分子的内酯环足够的时间以使肿瘤细胞通过S-期循环成为一个主要的挑战并且已经成为大量研究的焦点。

已经进行了大量试验以便得到具有较高生物活性和增加的稳定性的喜树碱衍生物。这些化合物中的许多为分子的A，B和C环上的修饰产物，但这些修饰中很少在生理条件下增加内酯环稳定性。其它手段更为成功。例如，酰化20-OH基团提供了保护内酯环E的有用方法。Wall等在美国专利4,943,579中描述了几种具有水溶性的酰化的喜树碱化合物，不过，该内酯在生理条件下可能无法完整保留。Cao等的美国专利5,968,943中披露了为有效抗肿瘤药的CPT-衍生物。

在文献中报导了制备喜树碱酯的许多不同反应。

使用吡啶作为催化剂用有机酸酐直接酰化喜树碱用于制备烷基和链烯基喜树碱酯(如上所示)。该反应通常得到高产率，但有机酸酐的有效利用率限制了该反应的范围。

因此，二环己基碳二亚胺(DCC)/二甲基氨基吡啶(DMAP)试剂系统用于羧酸与醇和硫醇的酰化反应。以前将该方法用于制备芳族喜树碱酯(如下所示)。

然而，该方法仅在羧酸很亲电子时得到了良好的反应产率。当酸为低亲电子时，反应得到较低产率或完全是非预计的产物。例如，当使用丙酸用该方法制备喜树碱丙酸酯时，基本上未获得该酯产物，且原料喜树碱几乎为100％回收。

还将壬酰基氯用作酰化剂酯化喜树碱，其中在二氯甲烷中使用吡啶作为HCl-俘获试剂。该反应(如下所示)以低产率(6％)进行。

尽管存在许多制备喜树碱酯的方法，但是每种方法均具有如上所述的一定局限。因此，对研发制备喜树碱酯的可替代方法仍然存在需求。

发明概述

因此，本发明的一个目的在于提供限制性较低的制备喜树碱酯的新方法。

本发明的其他目的和优点部分列在下文的描述中，部分从该描述中显而易见，或可以通过实施本发明认识到。通过特别在权利要求书中指出的要素和组合会实现和达到本发明的目的和优点。

为了实现本发明的目的，如本文具体实施和广泛描述的，本发明部分涉及制备喜树碱酯的方法，包括使喜树碱化合物与至少一种被至少一种酸质子化的酰化剂反应。

本发明的其他特征和优点部分列在下文的描述中，部分从该描述中显而易见，或可以通过实施本发明认识到。通过特别在说明书和权利要求书中指出的要素和组合会实现和达到本发明的目的和其它优点。

将本申请上下文中提及的所有专利，申请和公开文献完整地引入本文作为参考并且构成本申请的组成部分。

应理解上面一般性描述和下文的详细描述仅为示例性和解释性的，并且用于提供要求保护的本发明的进一步说明。

发明详述

本发明涉及制备喜树碱酯的方法。喜树碱(＂CPTs＂)具有明显的抗肿瘤和抗癌活性，但这些化合物在正常生理条件下容易降解，并且产生的代谢物通常显示出毒性。因此，本发明提供了制备CPT衍生物或类似物的新方法，这些CPT衍生物或类似物优选在哺乳动物体内，特别是人体内完整保留的时间更长，由此增加抗肿瘤和抗癌作用，又不会产生不需要的副作用。

本发明的一个或多个实施方案提供了制备喜树碱的脂肪酸酯的方法，包括下列步骤：使原料喜树碱化合物与至少一种被至少一种酸，诸如硫酸质子化的酰化剂反应。所述的酰化剂可以包含在原料喜树碱上形成的酯基。在下文中提供了进一步的详细描述。

在一个或多个实施方案中，原料喜树碱反应物可以为喜树碱或9-硝基喜树碱或9-氨基喜树碱。原料喜树碱可以为CPT或CPT衍生物的非酯形式和/或可以为能够被酯化的任何CPT化合物。

原料喜树碱可以具有下式：

在该式中，R基团表示上述结构环之一上的取代基。特别地R表示H，NO₂，NH₂，N₃，-OH，卤素(例如F、Cl、Br、I)，羧基(COOH)，C_1-16烷基，C_2-16链烯基，C_3-8环烷基，C_1-8烷氧基，芳氧基，CN，SO₃H，C_1-8卤代烷基，(CH₂)_nNR₂ ⁷(其中R⁷可以为H或C_1-8烷基，n可为1至约8的整数)，羟基，SH，SR⁸(其中R⁸可以为C_1-8烷基、未被取代的苯基或取代的苯基)，羰基(例如COR⁹，其中R⁹可以为C_1-8烷基、未被取代的苯基或取代的苯基)，SiR₃ ¹⁰(其中R¹⁰可以为C_1-4烷基)。R基团可以分别位于环A的9或10或11或12位上。R还可以为二取代的10，11-O-(CH₂)_y-O-基团(其中y可以为1-3的整数)。R还可以为C_2-12链烯基(s)，CF₃(s)，CCl₃(s)，CH₂F(s)，CH₂Cl(s)，CHF₂(s)，CHCl₂(s)，OH(s)，OR¹²(s)(其中R¹²可为C_1-8烷基或C_2-8链烯基、或芳族基团)，NR₂ ¹³(s)(其中R¹³可为H或C_1-4烷基)。X表示H，C_1-8烷基，C_2-8链烯基，C_1-8烷氧基，芳氧基，SiR₃ ¹¹基团(其中R¹¹可以为C_1-4烷基)，或CH₂NZY，其中Z和Y可独立地为H，C_1-4烷基或C_1-4卤代烷基。优选R可以为氢，卤素，含卤素的基团，烷基(例如C₁-C₁₅烷基)，-NO₂，-OH，烷氧基或-NH₂。

原料喜树碱化合物的量可以为任何所需的用量，只要存在足够的酰化剂将原料喜树碱的至少部分转化成如本文所述的喜树碱的酯。例如，原料喜树碱化合物的量可以为约1g至约100g或100g以上。

就酰化剂而言，在一个或多个实施方案中，酰化剂一般包含在原料喜树碱上形成的酯基。所述的酰化剂可以为有机酸衍生物，诸如酰基卤或酸酐。例如，酰化剂可以具有式R¹COX¹或(R¹CO)₂O，其中X¹为卤素(halide)，诸如氯(chloride)或溴(bromide)，并且R¹表示有机基团且一般R¹基团为形成连接在原料喜树碱化合物上的酯的有机部分的基团。更具体地说，且仅就举例目的而言，R¹基团可以为烷基，诸如C₁-C₁₅烷基，环烷基，诸如C₃-C₈环烷基，链烯基，诸如C₂-C₁₅链烯基，或环氧基，诸如C₂-C₁₅环氧基。R¹基团的具体实例包括，但不限于：CH₂CH₃；CH₂CH₂CH₃；CH₂CH₂CH₂CH₃；CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃；CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃；或

或

CH_3.CH₂CH_3:或CH₂CH₂CH_3:CH＝＝CH CH₃(反式)；

或

此外，对于本发明来说，下文描述了各种喜树碱的酯，并且确定为下式中R²的基团可以为用于本发明方法的酰化剂中的R¹基团。用于本发明反应的酰化剂的量可以为足以在原料喜树碱化合物上形成酯基的用量。酰化剂的合适的用量包括，但不限于约10mL至约1L，以酰化20g至30g原料喜树碱为基准。下述实例提供了可以用于所述反应的酰化剂的典型用量。

就用于本发明反应的酸而言，该酸可以以催化量使用，使得原料喜树碱的酰化可以使用有机酸衍生物，诸如酰基卤或酸酐进行。所述的酸可以为硫酸或其它酸，诸如HCl，HNO₃或HClO₄。该酸可以为浓酸，诸如浓硫酸。该酸可以具有任意摩尔浓度，诸如约0.0001M至约0.02M或0.02M以上。用于该反应的酸的用量可以为催化量，诸如约0.1ml至约1.0ml且更优选约0.20ml至约0.75ml或约0.5ml，以与20g至30g原料喜树碱反应为基准。用于催化酯化反应的酸的用量可以根据涉及的反应规模而改变。

在本发明的一个或多个实施方案中，可以以任何次序，依次或者同时，或者以任何的组合将各种反应物组合在一起。可以使用任何反应容器。反应可以在任何高于反应物凝固点的温度，诸如约20℃或20℃以上的温度下进行。反应可以在环境温度下或高温下进行，诸如约20℃至约110℃或110℃以上进行。反应可以快捷地进行，诸如进行约1分钟至约1小时或1小时以上。反应时间取决于所用的反应物的量和原料CPT转化成喜树碱的酯的目标转化量。反应可以在惰性气氛或空气中进行。惰性气氛的实例可以为氮气氛或氩气氛。

可以通过本发明方法制备的CPT酯的代表性的实例包括以下式为特征的CPT酯：

在该式中，R基团表示上述结构环之一上的取代基。特别地R表示H，NO₂，NH₂，N₃，-OH，卤素(例如F、Cl、Br、I)，羧基(COOH)，C_1-16烷基，C_2-16链烯基，C_3-8环烷基，C_1-8烷氧基，芳氧基，CN，SO₃H，C_1-8卤代烷基，(CH₂)_nNR₂ ⁷(其中R⁷可以为H或C_1-8烷基，n可以为1至约8的整数)，羟基，SH，SR⁸(其中R⁸可以为C_1-8烷基，未被取代的苯基或取代的苯基)，羰基(例如COR⁹，其中R⁹可以为C_1-8烷基，未被取代的苯基或取代的苯基)，SiR₃ ¹⁰(其中R¹⁰可以为C_1-4烷基)。R基团可以分别位于环A的9或10或11或12位上。R还可以为二取代的10，11-O-(CH₂)_y-O-基团(其中y可以为1-3的整数)。R还可以为C_2-12链烯基(s)，CF₃(s)，CCl₃(s)，CH₂F(s)，CH₂Cl(s)，CHF₂(s)，CHCl₂(s)，OH(s)，OR¹²(s)(其中R¹²可以为C_1-8烷基或C_2-8链烯基，或芳族基团)，NR₂ ¹³(s)(其中R¹³可以为H，或C_1-4烷基)。X表示H，C_1-8烷基，C_2-8链烯基，C_1-8烷氧基，芳氧基，SiR₃ ¹¹基团(其中R¹¹可以为C_1-4烷基)，或CH₂NZY，其中Z和Y可以独立为H，C_1-4烷基或C_1-4卤代烷基。优选R可以为氢，卤素，含卤素的基团，烷基(例如C₁-C₁₅烷基)，-NO₂，-OH，烷氧基或-NH₂。R²可以为烷基(诸如C₁-C₁₅烷基)，环烷基(诸如C₂-C₈环烷基)，链烯基(诸如C₂-C₁₅链烯基)或环氧基(诸如C₁-C₁₅环氧基)。

通过本发明方法制备的优选CPT酯以如下所示的式为特征：

在该式中，R可以为H或NO₂。当R为H时R²表示C₂-C₁₅烷基(诸如C₂-C₄烷基或C₆-C₁₅烷基)，C₃-C₈环烷基，C₂-C₁₅链烯基或C₂-C₁₅环氧基。当R为NO₂时，R²为C₁-C₁₅烷基，C₃-C₈环烷基，C₂-C₁₅链烯基或C₂-C₁₅环氧基。优选当R为H时，R²为

CH₂CH₃；CH₂CH₂CH₃；CH₂CH₂CH₂CH₃；CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃；CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃；或

或

CH_3:CH₂CH_3.或CH₂CH₂CH_3:CH＝＝CH CH₃(反式)；

或

反应产率可以为至少90重量％或至少90重量％-99重量％的原料喜树碱被转化成喜树碱的酯。优选该反应产率为至少95％的喜树碱转化为喜树碱的酯。更优选反应产率为至少99％。

原料CPT或反应物的纯度和/或浓度并不重要。不同的纯度和不同的浓度可能影响从该反应中形成的CPT酯的产率百分比。优选原料CPT反应物的纯度约30％-约100％。更优选纯度约80％-约100％或90％-99.9％或99.9％以上。优选CPT或CPT衍生物反应物的用量占反应物总体积的约0.1％-约50％。更优选该用量占反应物总体积的约0.5％-约5.0％。

所述酸的pH、浓度和纯度并不重要，只要该酸中的杂质不与CPT或酰化剂反应。该酸的酸度应足够强以便能够使用于反应的酰化剂质子化。强无机酸，诸如H₂SO₄，HCl，HNO₃和HClO₄具有这一能力。其它酸，诸如AlCl₃和BF₃可以用于这类催化酯化反应。该酸的pH可以是约0.5-约5。优选该酸为浓酸并且纯度高。例如，浓度可以是约60％-约100％。优选浓度是约95％-约98％。酸的纯度可以是约30％-约100％。优选纯度约90％-约100％。所述酸，诸如浓硫酸优选用量占反应物总体积的约0.1％-约10％。更优选占反应物总体积的约0.5％-约8.5％。

优选将酸加入到CPT和酰基卤的混合物中，同时搅拌该混合物。优选地，可以加入到混合物中的酸的用量为足以使酸起催化剂作用的量。优选可以将约4-约8玻璃移液管的酸加入到约70-100ml酰基卤中(当酰化剂不是酰基卤时，可以使用类似用量的酸)。不过，如果必要，可以将更多或更少的酸加入到CPT和酰基卤的混合物中，优选同时搅拌该混合物。

可以将CPT，酰基卤和酸的混合物放入反应器中，其中优选包括惰性气氛，诸如N₂，并且可以从约80℃加热至约120℃。优选将该混合物从约90℃加热至约110℃或更高，且更优选将反应器加热至约100℃。

优选反应进行至形成所需产物。反应时间可以短至几小时至长至几天。优选反应时间在惰性气氛，诸如N₂下可以为约15小时。

反应的实例如下方案1中所示。

方案1

尽管不希望受到任何理论约束，但是认为使用酸，诸如硫酸使酰化剂(RCOX)质子化形成活化的中间体A。使中间体A的阳离子羰基碳与喜树碱结合形成中间体B。随后从B中除去XH分子得到最终的酯产物。

根据溶液颜色改变确定反应完成后，可以将该溶液冷却至室温。通过通常公知的分离方法，诸如蒸发法或过滤法除去溶剂。可以通过在醇溶剂，诸如乙醇中回流来纯化在除去反应溶剂后获得的粗产物。从醇中重结晶和/或再沉淀以获得结晶形式的终产物。

通过下列实施例进一步阐明本发明，但这些实施例仅仅为本发明的举例说明。

实施例

实施例1

如下制备喜树碱-20-丙酸酯(CZ48)。

将20g喜树碱(0.05747mole)和100ml丙酸酐(97％，Aldrich ChemicalCo.，Milwaukee，WI)加入到安装了磁搅拌器和砂浴的200ml圆底烧瓶中。通过砂浴加热该混合物，同时搅拌。在砂浴温度达到80℃时滴加几滴(8-10滴)浓硫酸(95-98％，A.C.S.试剂，Aldrich Chemical Co.)。然后将该混合物在110±10℃下搅拌过夜(～14小时)。在冷却至室温后，将该反应混合物分批倾倒在1000ml冰水上，同时搅拌。在搅拌约45分钟后，过滤该混合物。将通过过滤获得的残余物风干24小时。将干燥的粗产物转移至安装了加热套的500ml圆底烧瓶中。

向该粗产物中加入200ml无水乙醇(99.5％，200标准强度(proof)，AldrichChemical Co.)。将该混合物回流2小时，且然后冷却至室温。在从乙醇中结晶后获得纯的结晶产物。使用高效液相色谱法(HPLC)显示纯度为99.8％，并且经测定熔点(mp)为242℃。薄层色谱法(TLC)显示与在实验室中以前制备的真实的喜树碱-20-丙酸酯具有相同的R_f(保留因子)值。质子核磁共振(NMR)也显示与真实的样品具有相同的光谱。

实施例2

使用与实施例1相同的方法，通过使用相应的有机酸酐或有机酰基氯作为酰化剂制备如下所示的表1中的所有列出的产物。产物的反应产率如表1中所示。

通常将干燥氮气用作表1中所示制备的所有反应中的反应气氛。使用前，在70+/-10℃下将所有玻璃器具烘干最少2小时。使用MEL-TEMP

熔点仪测定熔点并且未校准。喜树碱购自中国并且购来就使用。在实验室中通过使用Cao等，Synthesis 1998，1724建立的方法制备9种硝基喜树碱，并且将该文献全部地引入本文作为参考。

使用过量的有机酸衍生物，诸如酰基氯(或酰基溴)和酸酐作为酰化剂，和反应介质，使喜树碱在室温或高温下和在N₂气氛下用几滴浓硫酸作为催化剂与上述酰化剂反应。在随后的制备后，获得高产率的喜树碱的酯产物。表1中显示了本发明的H₂SO₄-催化的酰化方法与文献报导的方法分别制备的13种喜树碱的酯的反应产率对比。正如表1中所示，喜树碱-20-丙酸酯、丁酸酯、戊酸酯和庚酸酯均以高产率获得。

常用的酸酐/吡啶方法通常用于制备酯化合物，且在相应的酸酐能得到时通常得到高反应产率。然而，有机酸酐并非总是可以得到。例如，在制备喜树碱-20-壬酸酯时，使用壬酰氯而不是相应的酸酐作为酰化剂。在这种情况中，产物的反应产率仅为6％(常规方法)。

使用另一种常规方法，如前文所述的DCC/DMAP方法，制备表1中所列的CPT酯，该方法不起作用。尝试使用该方法的三种反应。所有三种反应均没有得到预计的CPT酯，并且原料喜树碱100％回收。

然而，根据本发明用相应的酸酐或酰基氯对喜树碱衍生物进行H₂SO₄-催化酰化获得如表1中所示的每一反应的高产率。当将壬酰氯用作酰化剂时，经H₂SO₄-催化的反应得到喜树碱-20-壬酸酯，产率92％，而以前文献中报导的方法仅得到6％。

表1.H₂SO₄-催化的喜树碱的酯化与以前报导的方法的反应产率的对比

因此，H₂SO₄-催化的方法提供了制备喜树碱的酯的有效方法。如上所示，本发明合成途径的最终产物的产率一般高于90％，这取决于准确的反应条件，原料纯度，酰化剂的性质，酸或碱的类型以及合成有机化学中常见的其它因素或参数。如上所述的制备本发明化合物的方法并不意味着排除或限制，而仅为举例说明，并且对本领域技术人员而言制备这些化合物或优化反应条件的其它方法也是可能的。

申请人特别将所有引用的参考文献的全部内容引入本说明书。此外，当将用量，浓度或其它值或参数给定为一定范围，优选范围或一组上限优选值和下限优选值时，应将其理解为具体披露了由任一对上限范围或优选值和任何下限范围或优选值构成的所有范围，与是否单独披露该范围无关。除非另外说明，如果本文描述了一定范围的数值，那么该范围用于包括其端值和在该范围内的所有整数和分数(fraction)。并不预期本发明的范围限制于限定范围时描述的具体值。

本发明的其它实施方案对本领域技术人员而言从研究本说明书和本文披露的本发明的实例中显而易见。预期仅将本说明书和实施例视为仅举例说明的，本发明的确切范围和精神由如下权利要求书及其等同方案表示。

Claims

1.制备喜树碱脂肪酸酯的方法，包括使原料喜树碱化合物与至少一种烷基化剂和至少一种酸反应。

2.权利要求1所述的方法，其中所述的至少一种酸以催化量存在。

3.权利要求1所述的方法，其中所述的至少一种酸为硫酸。

4.权利要求1所述的方法，其中所述的至少一种烷基化剂被所述的至少一种酸质子化。

5.权利要求1所述的方法，其中所述的原料喜树碱化合物为20(S)-喜树碱，9-硝基-喜树碱或9-氨基喜树碱。

6.权利要求1所述的方法，其中所述的原料喜树碱化合物具有下式：

其中R表示H、NO₂、NH₂、N₃、OH、卤素、羧基、C_1-16烷基、C_2-16链烯基、C_3-8环烷基、C_1-8烷氧基、芳氧基、CN、SO₃H、C_1-8卤代烷基、(CH₂)_nNR₂ ⁷、羟基、SH、SR⁸、羰基、SiR₃ ¹⁰、二取代的10，11-O-(CH₂)_y-O-基团，其中y可以为1-3的整数，R表示C_2-12链烯基、CF₃、CCl₃、CH₂F、CH₂Cl、CHF₂、CHCl₂、OH、OR¹²，其中R¹²为C_1-8烷基或C_2-8链烯基或芳族基团，R表示NR₂ ¹³，其中R¹³为H或C_1-4烷基，其中R位于环A的9或10或11或12位上，X表示H、C_1-8烷基、C_2-8链烯基、C_1-8烷氧基、芳氧基、SiR₃ ¹¹基团，其中R¹¹可以为C_1-4烷基，或X为CH₂NZY，其中Z和Y独立为H、C_1-4烷基或C_1-4卤代烷基，其中R⁷为H或C_1-8烷基，n为1至约8的整数，其中R⁸为C_1-8烷基、未取代的苯基或取代的苯基，并且其中R¹⁰为C_1-4烷基。

7.权利要求1所述的方法，其中所述的烷基化剂具有式R¹COX¹或(R¹CO)₂O，其中R¹表示形成存在于所述喜树碱酯中的所述酯的有机部分的有机基团，并且X¹表示卤素。

8.权利要求7所述的方法，其中所述的R¹为烷基，环烷基和链烯基或环氧基。

9.权利要求8所述的方法，其中所述的R¹为C₁-C₁₅烷基、C₃-C₈环烷基、C₂-C₁₅链烯基或C₂-C₁₅环氧基。

10.权利要求1所述的方法，其中所述的原料喜树碱化合物为20(S)-喜树碱且所述的烷基化剂具有式R¹COX¹或(R¹CO)₂O，其中R¹表示CH₃、C₂H₅、C₃H₇、C₄H₉、C₆H₁₃、C₈H₁₇或CH＝CHCH₃；且其中所述的酸为硫酸。

11.权利要求1所述的方法，其中所述的原料喜树碱化合物为9-硝基-喜树碱且所述的烷基化剂具有式R¹COX¹或(R¹CO)₂O，其中R¹表示C₂H₅、C₃H₇、C₄H₉、C₆H₁₃或i-C₃H₇，且其中所述的酸为硫酸。