CN102174076A

CN102174076A - 用于抑制蛋白酶体酶的化合物

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Publication number: CN102174076A
Application number: CN201110037869XA
Authority: CN
Inventors: M·S·史密斯; G·J·莱迪; R·T·波尔查德特; B·A·布宁; C·M·克鲁斯; J·H·穆塞尔; J·C·查巴拉
Original assignee: Proteolix Inc
Current assignee: Onyx Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2004-04-15
Filing date: 2005-04-14
Publication date: 2011-09-07
Also published as: EP1745064A2; US8207127B2; US20130324459A1; US20120094929A1; US20120101050A1; EP1745064B1; AU2005238445B2; WO2005105827A3; AU2005238445A1; CN103554222A; PL1745064T3; US8207124B2; DE602005025750D1; IL217210A0; BRPI0509879A; SG185306A1; US8207297B2; HK1097860A1; US20120094926A1; US20120277146A1

Abstract

基于肽的化合物，包括含杂原子的三元环，有效而选择性地抑制N端亲核(Ntn)水解酶的特定活性。所述化合物对那些具有多活性的Ntn的各个活性进行不同的抑制。例如，本发明化合物可选择性抑制20S蛋白酶体的胰凝乳蛋白酶样活性。基于肽的化合物包括至少三个肽单位、一个环氧化物或氮杂环丙烷，以及在N端具有官能作用。基于肽的化合物混入其它治疗用剂，预期具有抗炎特性和抑制细胞增殖作用。

Description

用于抑制蛋白酶体酶的化合物

本申请是2005年4月14日提交的题为“用于抑制蛋白酶体酶的化合物”的国家申请号为200580019845.4(PCT/US2005/012740)的发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及用于抑制酶的化合物和方法。具体地，本发明涉及基于酶抑制的治疗方法。

发明背景

在真核生物中，主要通过泛素(ubiquitin)途径介导蛋白质降解，其中降解的目标蛋白质与76氨基酸的多肽泛素连接。一旦成为目标，泛素化蛋白就成为26S蛋白酶体的底物，26S蛋白酶体是多催化功能蛋白酶(Multicatalytic protease)，通过其三种主要的蛋白酶解活性将蛋白质切割成短肽。蛋白酶体介导的降解虽然在胞内蛋白质转换中具有一般性功能，但在诸如I类主要组织相容性复合体(MHC)的呈递、凋亡、细胞分化以及NF-κB活化等多个过程中也发挥重要作用。

20S蛋白酶体是700kDa的圆筒状多催化功能蛋白酶复合体，含有构成4个环的28个亚基，在细胞生长调节、I类主要组织相容性复合体的呈递、调亡、抗原加工、NF-κB活化和促炎信号的转导中起重要作用。在酵母和其它真核细胞中，7个不同的α亚基构成外环，7个不同的β亚基构成内环。α亚基用作19S(PA700)和11S(28PA)调节复合体的结合位点，以及两个β亚基环构成的内蛋白酶解腔的物理屏障。因此认为，该蛋白酶体在体内以26S颗粒(“26S蛋白酶体”)形式存在。体内试验表明，对20S形式的蛋白酶体的抑制容易与对26S蛋白酶体的抑制相关。颗粒形成期间对氨基端β亚基原序列(prosequence)的切割，使得用作催化亲核体的氨基端苏氨酸残基暴露出来。于是，蛋白酶体中负责催化活性的亚基对氨基端亲核残基进行加工，这些亚基属于N端亲核(Ntn)水解酶家族(其中亲核的N端残基是诸如半胱氨酸、丝氨酸、苏氨酸等亲核成分)。该族包括，例如，青霉素G酰基转移酶(PGA)、青霉素V酰基转移酶(PVA)、谷氨酰胺PRPP酰氨基转化酶和细菌糖基天冬酰胺酶。除了遍在表达的β亚基，更高等的脊椎动物还拥有3个γ-干扰素诱导型β亚基(LMP7、LMP2和MECL1)，分别替代其正常的对应亚基X、Y和Z，这样改变了蛋白酶体的催化活性。通过使用不同的肽底物，将真核生物20S蛋白酶体的三种主要的蛋白酶解活性定义为：胰凝乳蛋白酶样活性(CT-L)，在大的疏水残基之后进行切割；胰蛋白酶样活性(T-L)，在碱性残基之后进行切割；以及肽基谷氨酰基肽水解活性(PGPH)，在酸性残基之后进行切割。蛋白酶体还有另外两个较次要的特征活性：BrAAP活性，在支链氨基酸之后进行切割；SNAAP活性，在小的中性氨基酸之后进行切割。蛋白酶体的主要蛋白酶解活性似乎由不同的催化位点引起，因为抑制剂、β亚基中的点突变以及γ-干扰素诱导型β亚基的交换使得这些活性发生各种程度的变化。

已有一些实例小分子用于抑制蛋白酶体的活性；但是，这些化合物一般缺乏在细胞和分子水平上探究和开发蛋白酶体功用所必需的专一性、稳定性或潜力。因此，需要合成位点专一性得到提高、稳定性和溶解性得到改善，潜力得到增强的小分子抑制剂，从而能够在细胞和分子水平上对蛋白酶体的功用进行探究。

发明概述

本发明涉及被称为肽α’，β’-环氧化物和肽α’，β’-氮杂环丙烷的分子种类的类似物和前药。母体分子被确信为有效地、不可逆地且选择性地与N端亲核(Ntn)水解酶结合，能专一性抑制具有多催化活性的酶的特定活性。

曾经认为蛋白酶体仅仅处理变性的及错折叠的蛋白质，现在认识到它构成了通过依赖信号的降解方式，调节多种胞内蛋白质的水平的蛋白酶解机制。因此，人们对于鉴别能专一性干扰蛋白酶体和其它Ntn水解酶活性的试剂，从而将其用作研究这些酶在生物加工中的作用的探针怀有极大的兴趣。这里对用于靶向Ntn水解酶的化合物的类似物和前药进行了描述、合成和研究。公开了能有效地、选择性地和不可逆地抑制特定的蛋白酶体活性的肽环氧化物和肽氮杂环丙烷，并对其要求保护。

不同于一些其它的基于肽的抑制剂，不能预期这所述的肽环氧化物和肽氮杂环丙烷在浓度高达50μM时充分抑制非蛋白酶体的蛋白酶，如胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、组织蛋白酶B、木瓜蛋白酶、需钙蛋白酶。在较高的浓度下，可以观察到抑制作用，但如果抑制剂仅仅与底物竞争，预期该抑制作用是竞争性的和可逆的。还预期该新颖的肽环氧化物和肽氮杂环丙烷能抑制NF-κB的活化，稳定细胞培养物中的p53水平。另外，预期这些化合物具有抗炎活性。因此，这些化合物可作为独特的多功能性分子探针，以探究Ntn酶在正常生物学过程和病理学过程中的功能。

一方面，本发明提供包括含杂原子的三元环的抑制剂类似物和前药。当所述抑制剂的存在浓度低于约50μM时，这些抑制剂可抑制N端亲核水解酶(例如20S蛋白酶体或26S蛋白酶体)的催化活性。对于20S蛋白酶体，特定的水解酶抑制剂在其存在浓度为低于约5μM时，抑制20S蛋白酶体的胰凝乳蛋白酶样活性，而当其存在浓度为低于约5μM时，不抑制20S蛋白酶体的胰蛋白酶样活性或PGPH活性。水解酶抑制剂可以为，例如，肽α’，β’-环氧酮或α’，β’-氮杂环丙烷酮，该肽可以是四肽。该四肽可包括分支或不分支的侧链，如氢、C_1-6烷基、C_1-6羟烷基、C_1-6烷氧基烷基、芳基、C_1-6芳烷基、C_1-6烷基酰胺、C_1-6烷基胺、C_1-6羧酸、C_1-6羧酸酯、C_1-6烷基硫醇或C_1-6烷基硫醚，例如异丁基、1-萘基、苯甲基和2-苯乙基。这里定义的α’，β’-环氧酮或α’，β’-氮杂环丙烷酮中的α’-碳可以是手性碳原子，例如(R)或β构型的碳。

另一方面，本发明提供药物组合物，包括一种药学上可接受的载体和一种改善神经变性疾病(如阿尔茨海默尔氏病)、肌肉萎缩病(muscle-wasting diseases)、癌症、慢性传染病、发热、肌肉废用(muscle disuse)、去神经、神经损伤、禁食和免疫相关的病症的药学有效量的水解酶抑制剂类似物或前药以及其它物质。

另一方面，本发明提供抗炎组合物。

另一方面，本发明提供用于以下方面的方法：抑制或减轻个体的HIV感染；影响个体中的病毒基因表达水平；改变生物体中蛋白酶体所产生的抗原肽的品种；确定生物体中的细胞的、发育的或生理的过程或产量是否受特定Ntn水解酶的蛋白酶解活性的调节；对个体的阿尔茨海默尔氏病进行治疗；降低细胞中肌肉蛋白的降解速度；降低细胞内胞内蛋白的降解速度；降低细胞内p53蛋白的降解速度；抑制个体中p53相关癌的生长；抑制细胞内的抗原呈递；对个体的免疫系统进行阻抑；抑制生物体中的IκB-α降解；减少细胞、肌肉、器官或个体体内的NF-κB含量；影响依赖于细胞周期蛋白的真核细胞周期；对个体的增生性疾病进行治疗；影响细胞内蛋白酶体依赖性的肿瘤蛋白调节；治疗个体的癌症生长；治疗个体中的p53相关性调亡；筛选细胞内N端亲核水解酶加工的蛋白质。这些方法中的每一种包括对个体、细胞、组织、器官或生物体施用有效量的包含这里所揭示的水解酶抑制剂的组合物，或使个体、细胞、组织、器官或生物体与有效量的组合物接触。

本发明的其它特征和优点将在以下的详细描述和权利要求中得到体现。

发明详述

本发明涉及用作酶抑制剂的化合物。这些化合物通用于对N端具有亲核基团的酶进行抑制。例如，这里所述的酶抑制剂可成功抑制含有侧链带亲核体的N端氨基酸(如苏氨酸、丝氨酸或半胱氨酸等)的酶或酶亚基的活性。这里所述的酶抑制剂也能成功抑制在其N端具有非氨基酸亲核基团(例如保护基或碳水化合物)的酶或酶亚基的活性。

虽然没有任何具体的作用原理加以限定，人们认为这种Ntm的N端亲核体与这里所述的酶抑制剂的环氧化物官能团形成共价加合物。例如认为在20S蛋白酶体的β5/Pre2亚基中，N端苏氨酸与肽环氧化物或肽氮杂环丙烷(例如下文所描述的化合物)反应，不可逆地形成吗啉代加合物或哌嗪子基加合物。这种加合物的形成涉及环氧化物或氮杂环丙烷的开环裂解。

包括与α’碳结合的此种基团的实施方式中，α’-碳(形成环氧化物或氮杂环丙烷环的一部分的碳)的立体化学可以是(R)或(S)。本发明部分基于这里所揭示的结构-功能信息，该信息提示了下列优选的立体化学关系。注意，优选的化合物可含有若干立构中心，立构中心具有上-下(或β-α，其中这里绘制的β在页面的上方)或(R)-(S)的显示关系(不需要化合物中的每一个立构中心都符合所述的优选方式)。在一些优选的实施方式中，α’碳的立体化学为(R)，即，X原子为β，或位于分子平面的上方。

对于立体化学，遵循用于确定绝对立体化学的Cahn-Ingold-Prelog规则。诸如有机化学(Fox和Whitesell；琼斯和巴特利特出版社，波士顿，MA(1994)；5-6节，177-178页，这里整体参考该节内容)等对这些规则进行了描述。肽可具有重复主链结构，从主链单位中伸展出侧链。一般地，每个主链单位具有一条与之缔合的侧链，尽管有时候，该侧链是一个氢原子。其它实施方式中，并非每个主链单位均具有一条缔合的侧链。用于肽环氧化物或肽氮杂环丙烷的肽具有两个或更多个主链单位。一些用于抑制蛋白酶体的胰凝乳蛋白酶样(CT-L)活性的实施方式中，存在4-8个主链单位，一些用于抑制CT-L的优选实施方式中，存在4-6个主链单位。

从主链单位伸展出来的侧链可包括天然的脂族或芳族氨基酸侧链，如氢(甘氨酸)、甲基(丙氨酸)、异丙基(缬氨酸)、仲丁基(异亮氨酸)、异丁基(亮氨酸)、苯甲基(苯丙氨酸)以及构成脯氨酸的侧链。侧链也可以是其它分支或不分支的脂族基或芳香基，例如乙基、正丙基、正丁基、叔丁基和芳基取代的衍生物，如1-苯乙基、2-苯乙基、(1-萘基)甲基、(2-萘基)甲基、(1-萘基)乙基、1-(2-萘基)乙基、2-(1-萘基)乙基、2-(2-萘基)乙基及类似的化合物。芳基可进一步被分支或不分支的C_1-6烷基或取代烷基、乙酰基等取代，或被其它的芳基或诸如苯甲酰基等取代芳基等取代。杂芳基也可用作侧链取代基。杂芳基包括含氮、氧和硫的芳基，如噻吩基、苯并噻吩基、萘并噻吩基、噻蒽基、呋喃基、吡喃基、异苯并呋喃基、苯并吡喃基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、吲哚基、嘌呤基、喹啉基等。

一些实施方式中，可在肽环氧化物或肽氮杂环丙烷中引入极性残基或带电残基。例如可以引入天然存在的氨基酸(如含羟基(Thr、Tyr、Ser)或含硫(Met、Cys)氨基酸)以及诸如牛磺酸、肉碱、瓜氨酸、胱氨酸、鸟氨酸、正亮氨酸及其它氨基酸等非必需氨基酸。还可以包括含有带电部分或极性部分的非天然存在的侧链取代基，例如，含有一个或更多个羟基、短链烷氧基、硫醚(sulfide)、硫代、羧基、酯、二氧磷基、酰氨基或氨基或被一个或更多个卤原子取代的这类取代基的C_1-6烷基链或C_6-12芳基。一些优选的实施方式中，肽部分的一条侧链中具有至少一个芳基。

一些实施方式中，主链单位为酰胺单位[-NH-CHR-C(＝O)-]，其中R为侧链。这种指定不排除天然存在的脯氨酸或本领域熟练人员认可的其它非天然存在的环状二级氨基酸。

另外的实施方式中，主链单位是N烷基化的酰胺单位(例如，N-甲基等)、烯烃类似物(其中一个或更多个酰胺键被烯键取代)、四唑类似物(其中四唑环在主链上呈顺式构型)或这些主链键的组合。在其它实施方式中，氨基酸α-碳经α-烷基取代修饰，例如，氨基异丁酸。又一些实施方式中，对侧链进行局部修饰，例如进行Δ^E或Δ^Z脱氢修饰，其中在侧链的α原子与β原子之间存在双键，或例如进行Δ^E或Δ^Z环丙基修饰，其中在侧链的α原子与β原子之间存在环丙基。另外的采用氨基酸基团的实施方式中，可使用D-氨基酸。进一步的实施方式可包括侧链向主链环化、二硫键形成、内酰胺形成、偶氮键以及在“肽以及构象限制模拟、设计”(Hruby和Boteju)、“分子生物学和生物技术：综合性的案头参考书”(Robert A.Meyers编，VCH出版社(1995)，658-664页，在这里综合参考)中讨论的其它修饰。

某些实施方式中，主题化合物是序列号为09/569748的美国申请所公开的化合物的类似物或前药，这里对该申请的整体内容进行综合参考。合适的酶抑制剂类似物或前药可具有式(I)的结构或其药学上可接受的盐，

其中每个A独立选自C＝O、C＝S和SO₂，优选C＝O；或

当与存在的Z相邻时，A任选为共价键；

L不存在或选自C＝O、C＝S和SO₂，优选L不存在或为C＝O；

M不存在或为C_1-12烷基，优选为C_1-8烷基；

Q不存在或选自O、NH和N-C_1-6烷基，优选Q不存在或为O或NH，

最优选Q不存在或为O；

X选自O、NH和N-C_1-6烷基，优选为O；

Y不存在或选自O、NH和N-C_1-6烷基、S、SO、SO₂、CHOR¹⁰和CHCO₂R¹⁰；

每个Z独立选自O、S、NH和N-C_1-6烷基，优选为O；或

当与存在的A相邻时，Z任选为共价键；

R¹、R²、R³和R⁴各自独立选自C_1-6烷基、C_1-6羟烷基、C_1-6烷氧基烷基、芳基和C_1-6芳烷基，其中的任何基团任选地被一个或更多个酰胺、胺、羧酸(或其盐)、酯(包括C_1-5烷基酯和芳基酯)、硫醇或硫醚取代基取代；

R⁵为N(R⁶)LQR⁷；

R⁶、R¹²、R¹³和R¹⁴独立选自氢、OH、C_1-6烷基和式IV的基团；优选地，R⁶选自氢、OH和C_1-6烷基，且R¹²、R¹³和R¹⁴独立选自氢和C_1-6烷基(优选氢)；

R⁷选自氢、C_1-6烷基、C_1-6烯基、C_1-6炔基、芳基、C_1-6芳烷基、杂芳基、C_1-6杂芳烷基、R⁸ZAZ-C_1-8烷基-、R¹¹Z-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、R⁸ZAZ-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、杂环基MZAZ-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-、(R¹⁰)₂N-C_1-12烷基-、(R¹⁰)₃N⁺-C_1-12烷基-、杂环基M-、碳环基M-、R¹¹SO₂C_1-8烷基-和R¹¹SO₂NH；优选C_1-6烷基、C_1-6烯基、C_1-6炔基、芳基、C_1-6芳烷基、杂芳基、C_1-6杂芳烷基、R⁸ZA-C_1-8烷基-、R¹¹Z-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-、Z-C_1-8烷基-、R⁸ZA-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、杂环基MZAZ-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-、(R¹⁰)₂N-C_1-8烷基-、(R¹⁰)₃N⁺-C_1-8烷基-、杂环基M-、碳环基M-、R¹¹SO₂C_1-8烷基-和R¹¹SO₂NH，其中Z和A的每个存在是独立的，不为共价键；或

R⁶和R⁷共同为C_1-6烷基-Y-C_1-6烷基、C_1-6烷基-ZAZ-C_1-6烷基、ZAZ-C_1-6烷基-ZAZ-C_1-6烷基、ZAZ-C_1-6烷基-ZAZ或C_1-6烷基-A，由此形成环；优选C_1-2烷基-Y-C_1-2烷基、C_1-2烷基-ZA-C_1-2烷基、A-C_1-2烷基-ZA-C_1-2烷基、A-C_1-3烷基-A或C_1-4烷基-A，其中Z和A的每个存在是独立的，不为共价键；

R⁸和R⁹独立选自氢、金属阳离子、C_1-6烷基、C_1-6烯基、C_1-6炔基、芳基、杂芳基、C_1-6芳烷基和C_1-6杂芳烷基，优选选自氢、金属阳离子、C_1-6烷基，或R⁸和R⁹共同为C_1-6烷基，由此形成环；

每个R¹⁰独立选自氢和C_1-6烷基，优选为C_1-6烷基；以及

R¹¹独立选自氢、C_1-6烷基、C_1-6烯基、C_1-6炔基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基、C_1-6芳烷基和C_1-6杂芳烷基；

R¹⁵和R¹⁶独立选自氢、C_1-6烷基，或R¹⁵和R¹⁶共同形成3-6元的碳环或杂环；以及R¹⁷和R¹⁸独立选自氢、金属阳离子、C_1-6烷基和C_1-6芳烷基，或R¹⁷和R¹⁸共同表示C_1-6烷基，由此形成环；

条件是当R⁶、R¹²、R¹³和R¹⁴为H或CH₃，且Q不存在时，LR⁷不是氢、未取代的C_1-6烷基C＝O、氨基酸的另一条链、叔丁氧羰基(Boc)、苯甲酰基(Bz)、芴-9-基甲氧羰基(Fmoc)、三苯基甲基(三苯甲基)、苄氧羰基(Cbz)、三氯乙氧羰基(Troc)或取代的或未取代的芳基或杂芳基；以及

在任何存在序列ZAZ的情况下，该序列中至少有一个成员必须不是共价键。

某些实施方式中，当R⁶为H，L为C ＝O，Q不存在时，R⁷不是氢、C_1-6烷基或取代的或未取代的芳基或杂芳基。某些实施方式中，当R⁶为H，Q不存在时，R⁷不是在“有机合成中的保护基”(Greene，T.W.和Wuts，P.G.M，JohnWiley & Sons，1999)或“保护基”(Kocienski，P.J.，Georg ThiemeVerlag，1994)中所描述的保护基。

一些实施方式中，R¹、R²、R³和R⁴选自C_1-6烷基或C_1-6芳烷基。优选实施方式中，R²和R⁴为C_1-6烷基，R¹和R³为C_1-6烷基。最优选的实施方式中，R²和R⁴为异丁基，R¹为2-苯乙基，R³为苯甲基。

某些实施方式中，L和Q不存在，R⁷选自C_1-6烷基、C_1-6烯基、C_1-6炔基、C_1-6芳烷基和C_1-6杂芳烷基。某些此类实施方式中，R⁶为C_1-6烷基，R⁷选自丁基、烯丙基、炔丙基、苯甲基、2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基。

另外的实施方式中，L为SO₂，Q不存在，R⁷选自C_1-6烷基和芳基。某些此类实施方式中，R⁷选自甲基和苯基。

某些实施方式中，L为C＝O，R⁷选自C_1-6烷基、C_1-6烯基、C_1-6炔基、芳基、C_1-6芳烷基、杂芳基、C_1-6杂芳烷基、R⁸ZA-C_1-8烷基-、R¹¹Z-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-Z-C_1-8烷基-、R⁸ZA-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、杂环基MZAZ-C_1-8烷基-、(R¹⁰)₂N-C_1-8烷基-、(R¹⁰)₃N⁺-C_1-8烷基-、杂环基M-、碳环基M-、R¹¹SO₂C_1-8烷基-和R¹¹SO₂NH-，其中Z和A的每个存在是独立的，不为共价键。某些实施方式中，L为C＝O，Q不存在，R⁷为H。

某些实施方式中，R⁶为C_1-6烷基，R⁷为C_1-6烷基，Q不存在，L为C＝O。某些此类实施方式中，R⁷为乙基、异丙基、2，2，2-三氟乙基或2-(甲磺酰基)乙基。

另外的实施方式中，L为C＝O，Q不存在，R⁷为C_1-6烷基。某些此类实施方式中，R⁷选自2-苯乙基、苯甲基、(4-甲氧苯基)甲基、(4-氯苯基)甲基和(4-氟苯基)甲基。

另外的实施方式中，L为C＝O，Q不存在，R⁶为C_1-6烷基，R⁷为芳基。某些此类实施方式中，R⁷为取代的或未取代的苯基。

某些实施方式中，L为C＝O，Q不存在或为O，n为0或1，R⁷为-(CH₂)_n碳环基。某些此类实施方式中，R⁷为环丙基或环己基。

某些实施方式中，L和A为C＝O，Q不存在，Z为O，n为1-8的整数(优选为1)，R⁷选自R⁸ZA-C_1-8烷基-、R¹¹Z-C_1-8烷基-、R⁸ZA-C_1- ₈烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-Z-C_1-8烷基-和杂环基MZAZ-C_1-8烷基-，其中A的每个存在是独立的，不为共价键。某些此类实施方式中，R⁷为杂环基MZAZ-C_1-8烷基-，其中杂环基为取代的或未取代的氧代二氧杂环戊烯基或N(R¹²)(R¹³)，其中R¹²和R¹³共同为C_1-6烷基-Y-C_1-6烷基(优选为C_1-3烷基-Y-C_1-3烷基)，由此形成环。

某些优选的实施方式中，L为C＝O，Q不存在，n为1-8的整数，R⁷选自(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-、(R¹⁰)₂NC_1-8烷基、(R¹⁰)₃N⁺(CH₂)_n-和杂环基-M-。某些此类实施方式中，R⁷为-C_1-8烷基N(R¹⁰)₂或-C_1-8烷基N⁺(R¹⁰)₃，其中R¹⁰为C_1-6烷基。某些其它的此类实施方式中，R⁷为杂环基M-，其中杂环基选自吗啉代、哌啶子基、哌嗪子基、吡咯烷子基。

某些实施方式中，L为C ＝O，R⁶为C_1-6烷基，Q选自O和NH，R⁷选自C_1-6烷基、杂环基-M、C_1-6芳烷基和C_1-6杂芳烷基。其它的实施方式中，L为C＝O，R⁶为C_1-6烷基，Q选自O和NH，R⁷为C_1-6烷基，其中C_1-6烷基选自甲基、乙基和异丙基。另外的实施方式中，L为C＝O，R⁶为C_1-6烷基，Q选自O和NH，R⁷为C_1-6芳烷基，其中芳烷基为苯甲基。在其它实施方式中，L为C＝O，R⁶为C_1-6烷基，Q选自O和NH，R⁷为C_1-6杂芳烷基，其中杂芳烷基为(4-吡啶基)甲基。

某些实施方式中，L不存在或为C＝O，R⁶和R⁷共同为C_1-6烷基-Y-C_1-6烷基、C_1-6烷基-ZA-C_1-6烷基或C_1-6烷基-A，其中Z和A的每个存是独立的，不为共价键，由此形成环。某些优选实施方式中，L为C＝O，Q和Y不存在，R⁶和R⁷共同为C_1-3烷基-Y-C_1-3烷基。另一个优选实施方式中，L和Q不存在，R⁶和R⁷共同为C_1-3烷基-Y-C_1-3烷基。另一个优选实施方式中，L为C＝O，Q不存在，Y选自NH和C_1-6烷基，R⁶和R⁷共同为C_1-3烷基-Y-C_1-3烷基。另一个优选实施方式中，L为C＝O，Y不存在，R⁶和R⁷共同为C_1-3烷基-Y-C_1-3烷基。另一个优选实施方式中，L和A为C＝O，R⁶和R⁷共同为C_1-2烷基-ZA-C_1-2烷基。另一个优选实施方式中，L和A为C＝O，R⁶和R⁷共同为C_2-3烷基-A。

某些实施方式中，式I的化合物具有以下立体化学：

优选实施方式中，抑制剂具有式II的结构或其药学上可接受的盐，

其中每个A独立选自C＝O、C＝S和SO₂；优选C＝O或

当与存在的Z相邻时，A任选为共价键；

L不存在或选自C＝O、C＝S和SO₂，优选L不存在或为C＝O；

M不存在或为C_1-12烷基，优选为C_1-8烷基；

Q不存在或选自O、NH和N-C_1-6烷基，优选Q不存在或为O或NH，

最优选Q不存在或为O；

X选自O、NH和N-C_1-6烷基，优选为O；

每个Z独立选自O、S、NH和N-C_1-6烷基，优选为O；或

当与存在的A相邻时，Z任选为共价键；

R²和R⁴各自独立选自C_1-6烷基、C_1-6羟烷基、C_1-6烷氧基烷基、芳基和C_1-6芳烷基，其中的任何基团任选地被一个或更多个酰胺、胺、羧酸(或其盐)、酯(包括C_1-5烷基酯和芳基酯)、硫醇或硫醚取代基取代；

R⁵为N(R⁶)LQR⁷；

R⁶选自氢、OH和C_1-6烷基，优选为C_1-6烷基；

R⁷选自氢、C_1-6烷基、C_1-6烯基、C_1-6炔基、芳基、C_1-6芳烷基、杂芳基、C_1-6杂芳烷基、R⁸ZAZ-C_1-8烷基-、R¹¹Z-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、R⁸ZAZ-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、杂环基MZAZ-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-、(R¹⁰)₂N-C_1-12烷基-、(R¹⁰)₃N⁺-C_1-12烷基-、杂环基M-、碳环基M-、R¹¹SO₂C_1-8烷基-和R¹¹SO₂NH，优选选自C_1-6烷基、C_1-6烯基、C_1-6炔基、芳基、C_1-6芳烷基、杂芳基、C_1-6杂芳烷基、R⁸ZA-C_1-8烷基-、R¹¹Z-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-Z-C_1-8烷基-、R⁸ZA-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、杂环基MZAZ-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-、(R¹⁰)₂N-C_1-8烷基-、(R¹⁰)₃N⁺-C_1-8烷基-、杂环基M-、碳环基M-、R¹¹SO₂C_1-8烷基-和R¹¹SO₂NH，其中Z和A的每个存在是独立的，不为共价键；或

R⁶和R⁷共同为C_1-6烷基-Y-C_1-6烷基、C_1-6烷基-ZAZ-C_1-6烷基、ZAZ-C_1-6烷基-ZAZ-C_1-6烷基、ZAZ-C_1-6烷基-ZAZ或C_1-6烷基-A，由此形成环；优选为C_1-2烷基-Y-C_1-2烷基、C_1-2烷基-ZA-C_1-2烷基、A-C_1-2烷基-ZA-C_1-2烷基、A-C_1-3烷基-A或C_1-4烷基-A，其中Z和A的每个存在是独立的，不为共价键；

每个R¹⁰独立选自氢和C_1-6烷基，优选为C_1-6烷基；以及

R¹¹独立选自氢、C_1-6烷基、C_1-6烯基、C_1-6炔基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基、C_1-6芳烷基和C_1-6杂芳烷基，条件是当R⁶为H或CH₃，且Q不存在时，LR⁷不是氢、未取代的C_1-6烷基C＝O、氨基酸的另一条链、叔丁氧羰基(Boc)、苯甲酰基(Bz)、芴-9-基甲氧羰基(Fmoc)、三苯基甲基(三苯甲基)、苄氧羰基(Cbz)、三氯乙氧羰基(Troc)或取代的或未取代的芳基或杂芳基；以及

某些实施方式中，L为C＝O，Q不存在，X为O，R⁶为H，R²和R⁴选自C_1-6烷基和C_1-6芳烷基。优选的此类实施方式中，R²和R⁴为C_1-6烷基。最优选的此类实施方式中，R²和R⁴为异丁基。

某些实施方式中，L为C＝O，Q不存在，X为O，R⁶为H，R²和R⁴为异丁基，R⁷为杂环基M-，其中杂环基为含氮的杂基，如哌嗪子基(包括N-(低级烷基)哌嗪子基)、吗啉代和哌啶子基。优选的此类实施方式中，M为CH₂。

某些实施方式中，式II的化合物选自

某些实施方式中，主题化合物是序列号为09/569748的美国申请(这里对其整体内容进行综合参考)所公开的化合物的含磷酸盐的前药。用于抑制Ntn的胰凝乳蛋白酶样(CT-L)活性的酶抑制剂前药具有式(III)的结构或其药学上可接受的盐

其中X选自O、NH和N-烷基，优选为O；

R¹、R²、R³和R⁴独立选自氢和式IV的基团，限制条件是R¹、R²、R³和R⁴中至少一个是式IV的基团；

R⁵、R⁶、R⁷和R⁸独立选自C_1-6烷基、C_1-6羟烷基、C_1-6烷氧基烷基、芳基和C_1-6芳烷基，其中的任何基团任选地被选自酰胺、胺、羧酸或其药学上可接受的盐、羧酸酯、硫醇或硫醚的中一个基团取代；

R⁹是氨基酸的另一条链、氢、C_1-6酰基、保护基、芳基或杂芳基，其中取代基可包括卤素、羰基、硝基、羟基、芳基和C_1-5烷基；

R¹⁰和R¹¹独立选自氢和C_1-6烷基，或R¹⁰和R¹¹共同形成3-6元的碳环或杂环；

R¹²和R¹³独立选自氢、金属阳离子、C_1-6烷基和C_1-6芳烷基，或R¹²和R¹³共同表示C_1-6烷基，由此形成环；以及

L不存在或选自-CO₂或-C(＝S)O。

肽合成领域已知的合适的N端保护基包括叔丁氧羰基(Boc)、苯甲酰基(Bz)、芴-9-基甲氧羰基(Fmoc)、三苯基甲基(三苯甲基)和三氯乙氧羰基(Troc)等。肽合成领域熟知的苄氧羰基或叔丁氧羰基(Boc)等各种N保护基；二环己基碳二亚胺(DCC)、1，3-二异丙基碳二亚胺(DIC)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)、N-羟基氮杂苯并三唑(HATU)，羰基二咪唑或1-羟基苯并三唑一水物(HOBT)等各种耦合试剂的使用，以及各种切割条件：例如，三氟乙酸(TFA)、含HCl的二

烷，在有机溶剂(如甲醇或乙酸乙酯)中，Pd-C催化下进行氢化，三(三氟乙酸)硼和溴化氰，以及在溶液中反应，离析和纯化中间体，同样适用于主题化合物的制备。

一些实施方式中，R¹、R²、R³和R⁴中的任何两个为氢，R¹、R²、R³和R⁴中的任何两个具有式IV的结构。优选实施方式中，R¹、R²、R³和R⁴中的任何三个为氢，R¹、R²、R³和R⁴中的任何一个具有式IV的结构。最优选的实施方式中，R¹具有式IV的结构，R²、R³和R⁴为氢。

某些实施方式中，R⁵、R⁶、R⁷和R⁸为C_1-6烷基或C_1-6芳烷基。优选的实施方式中，R⁶和R⁸为C_1-6烷基，R⁵和R⁷为C_1-6芳烷基。最优选的实施方式中，R⁶和R⁸为异丁基，R⁵为2-苯乙基，R⁷为苯甲基。某些实施方式中，R⁹选自氢、C_1-6酰基或保护基。优选的实施方式中，R⁹为氢或乙酰基。最优选的实施方式中，R⁹为乙酰基。

某些实施方式中，R¹⁰和R¹¹选自氢和C_1-6烷基。一个优选的实施方式中，R¹⁰为氢，R¹¹为C_1-6烷基。另一优选的实施方式中，R¹⁰为氢，R¹¹为甲基。又一优选的实施方式中，R¹⁰和R¹¹为氢。某些实施方式中，R¹²和R¹³为C_1-6烷基、金属阳离子或C_1-6芳烷基。某些优选的实施方式中，R¹²和R¹³选自苄基、叔丁基和钠阳离子。更优选的实施方式中，R¹²和R¹³均为苄基或叔丁基。最优选的实施方式中，R¹²和R¹³中至少一个是钠阳离子。

某些实施方式，式III的化合物具有以下立体化学：

优选的实施方式中，抑制剂具有式V的结构或其药学上可接受的盐，

其中，X选自O、NH或N-烷基，优选为O；

R⁶和R⁸独立选自C_1-6烷基、C_1-6羟烷基、C_1-6烷氧基烷基、芳基和C_1-6芳烷基，其中的任何基团任选地被选自酰胺、胺、羧酸或其药学上可接受的盐、羧酸酯、硫醇和硫醚的一个基团取代；

R⁹是氨基酸的另一条链、氢、酰基、保护基、芳基或杂芳基，其中取代基可包括卤素、羰基、硝基、羟基、芳基和C_1-5烷基。肽合成领域已知的合适的N端保护基包括叔丁氧羰基(Boc)、苯甲酰基(Bz)、芴-9-基甲氧羰基(Fmoc)、三苯基甲基(三苯甲基)和三氯乙氧羰基(Troc)等；以及

一些实施方式中，R¹、R²、R³和R⁴中的任何两个为氢，R¹、R²、R³和R⁴中的任何两个具有式IV的结构。优选的实施方式中，R¹、R²、R³和R⁴中的任何三个为氢，R¹、R²、R³和R⁴中的任何一个具有式IV的结构。最优选的实施方式中，R¹具有式IV的结构，R²、R³和R⁴为氢。

某些实施方式中，R⁶和R⁸为C_1-6烷基或C_1-6芳烷基。优选的实施方式中，R⁶和R⁸为C_1-6烷基。最优选的实施方式中，R⁶和R⁸为异丁基。某些实施方式中，R⁹选自氢、C_1-6酰基或保护基。优选的实施方式中，R⁹为氢或乙酰基。最优选的实施方式中，R⁹为乙酰基。

某些实施方式中，R¹⁰和R¹¹选自氢和C_1-6烷基。一个优选的实施方式中，R¹⁰为氢，R¹¹为C_1-6烷基。另一优选的实施方式中，R¹⁰为氢，R¹¹为甲基。又一优选的实施方式中，R¹⁰和R¹¹为氢。某些实施方式中，R¹²和R¹³为C_1-6烷基、金属阳离子或C_1-6芳烷基。某些优选的实施方式中，R¹²和R¹³选自苄基、叔丁基和钠阳离子。更优选的实施方式中，R¹²和R¹³均为苄基和叔丁基。最优选的实施方式中，R¹²和R¹³中至少一个是钠阳离子。

某些实施方式中，R⁶和R⁸为C_1-6烷基。优选的实施方式中，R⁶和R⁸为异丁基。优选的实施方式中，R⁹为氢或乙酰基。最优选的实施方式中，R⁹为乙酰基。一个优选的实施方式中，R¹⁰为氢，R¹¹为甲基。又一优选的实施方式中，R¹⁰和R¹¹均为氢。某些实施方式中，R¹²和R¹³为C_1-6烷基、金属阳离子或C_1-6芳烷基。某些优选的实施方式中，R¹²和R¹³选自苄基、叔丁基和钠阳离子。更优选的实施方式中，R¹²和R¹³均为苄基和叔丁基。最优选的实施方式中，R¹²和R¹³中至少一个是钠阳离子。

某些实施方式中，特别排除US6,831,099中公开的化合物，这里综合参考该专利公开的整体内容。

本发明的一个方面涉及一种包含这里所公开的组合物的医疗器械，该组合物包括具有式I、II、III或V中任何一种的结构的抑制剂。一种实施方式中，在医疗器械内部结合有该组合物。某些实施方式中，该医疗器械为含有聚合物基质或陶瓷基质以及抑制剂的凝胶。所述聚合物可以是天然存在的或是合成的。另一种实施方式中，所述凝胶用作药物贮库、粘合剂、缝线、屏障或密封剂。

本发明的另一个方面涉及一种包含基质的医疗器械，在该基质的一个表面上置有式I、II、III或V中任何一种的结构的抑制剂。一种实施方式中，该抑制剂直接置于医疗器械上。另一种实施方式中，医疗器械上被覆涂层，该涂层中含有聚合物基质或陶瓷基质，其中分散或溶解了这里所公开的式I、II、III或V中任何一种的结构的抑制剂。

一种实施方式中，该医疗器械是冠状(管腔)支架、血管支架、外周(管腔)支架的或胆管支架。更具体地，本发明支架是一种可扩张支架。用包含具有式I、II、III或V中任一种结构的抑制剂的基质进行涂覆时，该基质是柔韧的，以顺应这种可扩张支架的压缩及扩张状态。本发明的另一个实施方式种，该支架至少有一部分可插入或植入病人的体内，其中该部分有一表面适合与体组织接触，其中该表面至少有一部分涂覆了具有式I、II、III或V中任一种结构的抑制剂，或含有基质的涂层，其中溶解或分散了具有式I、II、III或V中任一种结构的抑制剂。美国专利4,733,665公开了一种合适支架的例子，该专利在这里作为整体加以参考。

另一种实施方式中，本发明医疗器械是一种外科器械，如血管植入物、管腔内器械、外科封闭剂或血管支持器(vascular support)。更具体地，本发明医疗器械是导管、植入式血管输液港(implantable vasularaccess port)、中心静脉导管、动脉导管、人工血管、主动脉内气囊泵、缝线、心室辅助泵、药物洗脱屏障(drug-eluting barrier)、粘结剂、血管包覆物、血管外/血管周围支持器(extra/perivascular support)、血液过滤器或适于在血管内使用的过滤器，这些器械直接用具有式I、II、III或V中任一种结构的抑制剂涂覆，或用包含具有式I、II、III或V中任一种结构的抑制剂的基质涂覆。

某些实施方式中，管腔内医疗器械经具有式I、II、III或V中任一种结构的抑制剂涂覆或经含有生物耐受基质和分散于聚合物中的具有式I、II、III或V中任一种结构的抑制剂的涂层涂覆，所述器械具有一个内表面和一个外表面，在内表面或外表面或两者中，至少有一部分被涂覆。

某些实施方式中，医疗器械可用于防止血管成形术后再狭窄。该医药器械也可通过局部给予具有式I、II、III或V中任一个结构的抑制剂，用于治疗各种疾病和病症。这样的疾病和病症包括再狭窄、炎症、类风湿性关节炎、炎症引起的组织损伤、过度增生性痰病、重度银屑病或关节病性银屑病、肌肉萎缩病、慢性传染病、免疫反应异常、涉及易损斑块的病症、缺血性病症相关的损伤以及病毒感染和增殖。用包括本发明药物包被的医药器件治疗的痰病和病症的例子包括动脉粥样硬化、急性冠脉综合症、阿尔茨海默尔氏症、癌症、发热、肌肉废用(萎缩)、去神经、血管阻塞、中风、HIV感染、神经损伤、伴随酸中毒的肾衰竭以及肝衰竭(例如见Goldberg，美国专利5,340,736。)

术语“C_x-y烷基”指取代的或未取代的饱和烃基，包括链中含有x-y个碳的直链烷基和支链烷基；包括三氟甲基和2，2，2-三氟乙基等卤代烷基；若C₀烷基位于末端位置时表示氢，若该基团位于链内部时，表示一个键。术语“C_2-y烯基”和“C_2-y炔基”指取代的或未取代的不饱和脂族基，在长度及可能发生的取代方面，与上述烷基类似，但分别含有至少一个双键或三键。

术语“烷氧基”指具有一个与之结合的氧的烷基。代表性的烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、叔丁氧基等。“醚”是通过一个氧共价连接的两个烃基。因此，使烷基成醚的该烷基的取代基为烷氧基或类似于烷氧基。

术语“C_1-6烷氧基烷基”指被烷氧基取代的C_1-6烷基，由此形成醚。

这里使用的术语“C_1-6芳烷基”指被芳基取代的C_1-6烷基。

术语“胺”和“氨基”被本领域认可，指未取代的和取代的胺及其盐，例如能用以下通式表示的部分：

其中R⁹、R¹⁰和R¹⁰’各自独立表示氢、烷基、烯基、-(CH₂)_m-R⁸或R⁹和R¹⁰同与之

的氮原子一起形成环结构中具有4-8个原子的杂环；R⁸表示芳基、环烷基、环烯基、杂环基或多环基；m为0或1-8的整数。优选的实施方式中，R⁹或R¹⁰中只有一个为羰基，例如，R⁹、R¹⁰和氮不能共同形成酰亚胺。更优选的实施方式中，R⁹和R¹⁰(任选R¹⁰’)各自独立表示氢、烷基、烯基或-(CH₂)_m-R⁸。某些实施方式中，氨基为碱性，意味着它的pK_a≥7.00。这些官能团的质子化形式的pK_a为7.00以上。

术语“酰胺”和“酰氨基”被本领域认可为氨基取代的羰基，包括能用通式表示的部分：

其中R⁹和R¹⁰同前述定义。酰胺的优选方式将不包括可能不稳定的酰亚胺。

这里使用的术语“芳基”包括取代的或未取代的5元、6元和7元单环芳族基，其中环中的每个原子均为碳。术语“芳基”也包括具有两个或更多个环的多环体系，其中，两个邻接环(其中至少一个环为芳香环)共用两个或更多个碳，其它的环可以是例如环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基和/或杂环基。芳基包括苯、萘、菲、苯酚、苯胺。

这里使用的术语“碳环”和“碳环基”指取代或未取代的非芳香环，其中环中的每个原子均为碳。术语“碳环”和“碳环基”也包括具有两个或更多个环的多环体系，其中，两个邻接环(其中至少一个环为碳环)共用两个或更多个碳，其它的环可以是例如环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基和/或杂环基。

术语“羰基”被本领域认可，包括能用以下通式表示的部分：

其中X是一个键或表示氧或硫，R¹¹表示氢、烷基、烯基、-(CH₂)_m-R⁸或药学上可接受的盐，R¹¹’表示氢、烷基、烯基或-(CH₂)_m-R⁸，其中m和R⁸同前述定义。当X是氧，且R¹¹或R¹¹’不是氢时，该结构式表示“酯”。当X为氧且R¹¹为氢时，该结构式表示“羧酸”。

这里使用的“酶”可以是以催化方式完成化学反应的任何不完整蛋白质分子或完整蛋白质分子。这样的酶可以是天然酶、融合酶、酶原、脱辅酶、变性酶、法尼基化酶、泛素化酶、脂酰化酶、牻牛儿牻牛儿基化酶(gerangeranylated enzyme)、GPI连接酶、脂连接酶、异戊二烯基化酶、天然存在的或人工制备的突变酶、带有侧链或主链修饰的酶、具有前导序列的酶、与非蛋白物质复合的酶(如蛋白聚糖、蛋白脂质体)。可用任何方法制备酶，包括自然表达、促进表达、克隆、各种基于溶液和基于固体的肽合成，以及本领域人员已知的类似方法。

这里使用的术语“C_1-6杂芳烷基”指被杂芳基取代的C_1-6烷基。

术语“杂芳基”包括取代的或未取代的5-7元芳香环结构，更优选5-6元环，其环结构包括1-4个杂原子。术语“杂芳基”还包括具有两个或更多个环的多环体系，其中，两个邻接环(其中至少一个环为杂芳环)共用两个或更多个碳，其它的环可以是例如环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基和/或杂环基。杂芳基包括，例如，吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、

唑、噻唑、三唑、吡唑、吡啶、吡嗪、哒嗪和嘧啶等。

这里使用的术语“杂原子”指碳或氢以外的任何元素的原子。优选的杂原子为氮、氧、磷和硫。

术语“杂环基“指取代的或未取代的3-10元非芳香环结构，更优选3-7元环，其环结构包括1-4个杂原子。术语“杂环基”还包括具有两个或更多个环的多环体系，其中，两个邻接环(其中至少一个环为杂环)共用两个或更多个碳，其它的环可以是例如环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基和/或杂环基。杂环基包括，例如，哌啶、哌嗪、吡咯烷、吗啉、内酯、内酰胺等。

术语“C_1-6羟烷基“指被羟基取代的C_1-6烷基。

这里使用的术语“抑制剂“指阻滞或降低酶活性的化合物(例如，抑制对诸如suc-LLVY-AMC、Box-LLR-AMC和Z-LLE-AMC等标准的荧光肽底物的蛋白酶切，抑制20S蛋白酶体的各种催化活性)。抑制剂可进行竞争性抑制、反竞争性抑制或非竞争性抑制。抑制剂可进行可逆或不可逆结合，因此该术语包括作为酶的自杀底物的化合物。抑制剂可以对酶的活性部位上的或其附近的一个或更多个部位进行修饰，或者它在酶的别处引起构象变化。

这里使用的术语“肽“不仅包括具有标准α-取代基的标准酰胺连接，通常还使用下文所详述的肽模拟物、其它的修饰连接、非天然存在的侧链和侧链修饰。

术语“多环基“或”多环的“指两个或更多个环(例如，环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基和/或杂环基)，其中两个邻接环共用两个或更多个碳，例如，这些环是”稠环“。多环中的每个环可以是取代的或未取代的。

术语“预防”被本领域认可，在用于局部再发(如疼痛)等病症、癌症等疾病、心力衰竭等综合症或任何其它的医学病症时，为本领域所熟知，包括对个体施用组合物，使得相比于未接受组合物的个体，降低了其出现医学病症的症状频率或延迟病症发作。因此，癌症的预防包括，例如，受到预防治疗的病人群体中，例如在统计水平和/或临床显著水平上，相对于未进行治疗的对照群体，减少了可检测到癌生长的人数和/或相对于未进行治疗的对照群体，延迟出现可检测的癌生长。传染病的预防包括，例如，受到预防治疗的群体中，相对于未进行治疗的对照群体，减少了传染的诊断数，和/或相对于未进行治疗的对照群体，延迟了传染症状的发作。疼痛的预防包括，例如，受到预防治疗的群体中，相对于未进行治疗的对照群体，个体的痛觉减轻或延迟出现。

术语“前药”包括在生理条件下转化成治疗活性剂的化合物。制备前药的常用方法包括选择在生理条件下发生水解的组分，以显露所需要的分子。其它实施方式中，通过宿主动物的酶活性转化前药。

术语“预防性或治疗性治疗”被本领域认可，包括给予宿主一种或更多种测试组合物。如果在临床表现出有害病症(例如疾病或宿主动物的其它有害状况)之前给予，那么该治疗是预防性的(即，它防止宿主的有害状况得到发展)，而如果在临床表现出有害病症之后给予，那么该治疗是治疗性的(即，它旨在使所出现的有害状况或其副作用得到减轻、改善或稳定)。

这里使用的术语“蛋白酶体”包括免疫蛋白酶体和结构蛋白酶体。

术语“取代的”指具有取代主链中一个或更多个碳上的氢的取代基的部分。应理解，取代“或”被......取代“包括的隐含限制条件是这种取代应以被取代的原子以及取代基所允许的化合价为根据，且该取代生成稳定的化合物(如不会自发经历重排转换、环化转换、消除转换等)。这里使用的术语”取代的“期望包括所有允许的有机化合物取代基。广义上，允许的取代基包括无环的和环状的，分支的和不分支的，碳环的和杂环的、芳香的和非芳香的有机化合物取代基。允许的取代基可以是一个或多个，与所需要的有机化合物相同或不同。对于本发明，氮等杂原子可具有氢取代基和/或这里所述的符合杂原子化合价的任何允许的有机化合物取代基。取代基可包括，例如，卤素、羟基、羰基(例如羧基、烷氧羰基、甲酰基或酰基)、硫代羰基(例如硫酯、硫代乙酸根合或硫代甲酸根)、烷氧基、磷酰基、磷酸根、膦酸根、亚膦酸根、氨基、酰胺基、脒、亚胺、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸根、磺酸根、氨磺酰、磺胺基、磺酰基、杂环基、芳烷基或芳香的或芳香杂基部分。本领域熟练人员应理解，如果需要，烃链上的取代基本身可被取代。

对于被试治疗方法，化合物的“治疗有效量”指制剂中的化合物用量，其在作为要求的给药方案的一部分，对哺乳类(优选人)进行施用时，根据用于进行治疗的失调或病症或化妆品用途的临床上可接受标准，以例如可适用于任何医学治疗的合理的利益/风险比，实现减轻症状、改善病症或延缓疾病发作。

术语“硫醚“指具有与之相连的硫部分的如上所定义的烷基。优选的实施方式中，硫醚”用-S-烷基表示。代表性的硫醚基团包括甲硫基、乙硫基等。

这里使用的术语“治疗“包括以改善或稳定个体病症的方式，逆转、减轻或阻止病症的症状、临床表现以及基本病理(underlying pathology)。

对20S蛋白酶体的选择性

这里所公开的酶抑制剂类似物和前药之所以有用，部分因为它们抑制20S蛋白酶体的作用。另外，与其它的20S蛋白酶体抑制剂不同，相对于其它的蛋白酶，这里所公开的化合物对20S蛋白酶体具有高度的选择性。也就是说，相对于组织蛋白酶、需钙蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、三肽基pepsidase II等其它蛋白酶，本化合物对20S蛋白酶体显示选择性。酶抑制剂对20S蛋白酶体的选择性为：浓度低于约50μM的酶抑制剂对20S蛋白酶体的催化活性表现抑制用作，而对组织蛋白酶、需钙蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶、三肽基pepsidase II等其它蛋白酶的催化活性不显示抑制作用。优选的实施方式中，浓度低于约10μM的酶抑制剂对20S蛋白酶体的催化活性显示抑制作用，但该浓度下，对其它蛋白酶的催化活性不显示抑制。更优选的实施方式中，浓度低于约1μM的酶抑制剂对20S蛋白酶体的催化活性显示抑制，但该浓度下，对其它蛋白酶的催化活性不显示抑制。序列号为09/569748的美国申请(实施例2)以及Stein等人(Biochem.(1996)，35，3899-3908)公开了酶的动力学分析。

对胰凝乳蛋白酶样活性的选择性

这里所描述的酶抑制剂类似物和前药化合物的具体实施方式之所以有用，还因为它们能有效而选择性地抑制20S蛋白酶体的胰凝乳蛋白酶样活性(与胰蛋白酶样活性和PGPH活性相比)。20S蛋白酶体的胰凝乳蛋白酶样活性表征为在紧邻大的疏水性残基的部位，对肽进行切割。具体地，Ntn水解酶的胰凝乳蛋白酶样活性可通过对标准底物的切割来确定。这种底物的例子为本领域所知。例如，可使用亮氨酰亮氨酰缬氨酰酪氨酸衍生物。序列号为09/569748的美国申请(实施例2)以及Stein等人(Biochem.(1996)，35，3899-3908)公开了酶的动力学分析。

酶抑制剂的用途

蛋白酶体抑制生物学结果有多种。在细胞水平上，用各种蛋白酶体抑制剂处理细胞，已报道出现多泛素化蛋白的积聚、细胞的形态学变化及调亡。蛋白酶体抑制还被建议作为可能的抗肿瘤治疗策略。Epoxomicin最初在筛选抗肿瘤化合物时被鉴定的事实证实了蛋白酶体可用作抗肿瘤化疗的靶标。因此，这些化合物可用于治疗癌症。蛋白酶体的抑制也伴随着抑制NF-κB的活化以及稳定p53的水平。因此，本发明化合物也可用于抑制NF-κB的活化，稳定细胞培养物中的p53水平。由于NF-κB是炎症的主要调节剂，它是用于抗炎治疗干预的有吸引力的靶标。因此，本发明化合物可用于治疗伴随慢性发炎的病症，包括但不限于COPD、银屑病、支气管炎、肺气肿和囊肿性纤维化。

本公开化合物可用于治疗由蛋白酶体的蛋白酶解功能直接介导的病症，如肌肉萎缩，或由NF-κB等蛋白酶体加工的蛋白质间接介导的病症。蛋白酶体参与涉及细胞调节(如细胞周期、基因转录和代谢途径)、细胞间通讯和免疫反应(如抗原呈递)的蛋白质(如酶)的快速消去和翻译后加工。以下讨论的具体例子包括β-淀粉样蛋白和细胞周期蛋白及转录因子NF-κB等调节蛋白。

本发明的另一个实施方式是这里所公开的化合物在治疗神经变性疾病及病症中的用途，该类疾病和病症包括但不限于中风、神经系统的缺血性损伤、神经外伤(如冲击性脑损伤(percussive brain damage)、脊髓损伤以及神经系统外伤)、多发性硬化症和其它免疫介导的神经病(如格林-巴利综合症及其变型、急性运动轴索神经病、急性发炎性脱髓鞘性多发性神经病和费希尔综合症)、HIV/AIDs痴呆综合症、axonomy、糖尿病性神经病、帕金森氏症、亨廷顿氏症、多发性硬化症、细菌性脑膜炎、寄生虫性脑膜炎、真菌性脑膜炎和病毒性脑膜炎、脑炎、血管性痴呆、多梗死性痴呆、路易体痴呆(Lewy body dementia)、皮克氏症等额叶型痴呆、皮质下型痴呆(如亨廷顿病或进行性核上性麻痹)、局灶性皮质萎缩综合症(如原发性失语症)、代谢性/中毒性痴呆(如慢性甲状腺功能低下或B12缺乏)，以及感染引起的痴呆(如梅毒或慢性脑膜炎)。

阿尔茨海默尔氏症表征为在老年斑和脑血管中沉积β-淀粉样蛋白(β-AP)。β-AP是衍生自淀粉样蛋白前体(APP)的39-42位氨基酸的肽片段。至少三种APP异型(695、751和770氨基酸)是已知的。mRNA的另路剪接产生异型；正常加工对一部分β-AP序列产生影响，从而防止β-AP的生成。人们认为，蛋白酶体对蛋白质进行的异常加工导致阿尔茨海默尔氏脑中含有丰富的β-AP。大鼠中的APP加工酶含有约十种不同的亚基(22kDa-32kDa)。25kDa亚基具有N端序列X-Gln-Asn-Pro-Met-X-Thr-Gly-Thr-Ser，它与人巨蛋白体(macropain)的β-亚基相同(Kojima，S.等，Fed.Eur.Biochem.Soc.，(1992)304：57-60)。APP加工酶对Gln¹⁵-Lys¹⁶键进行切割；在钙离子的存在下，该酶还对Met¹-Asp¹键和Asp¹-Ala²键进行切割以释放β-AP的胞外域。

因此，一种实施方式是一种治疗阿尔茨海默尔氏症的方法，包括给予个体有效量的这里所公开的化合物(如，药物组合物)。这种治疗包括降低β-AP的加工速度，降低β-AP斑块的生成速度，降低β-AP的生成速度，以及减轻阿尔茨海默尔氏症的临床征兆。

本发明的其它实施方式涉及恶病质和肌肉萎缩病。蛋白酶体对成熟期网织红细胞和生长期成纤维细胞中的大量蛋白质进行降解。在丧失的胰岛素和血清细胞中，蛋白酶解的速度几乎加倍。对蛋白酶体的抑制降低了蛋白酶解，从而减少了肌肉蛋白的损失和肾或肝中的含氮负荷。本发明抑制剂用于治疗诸如癌症、慢性传染病、发热、肌肉废用(萎缩)和去神经、神经损伤、禁食、伴随酸中毒的肾衰竭、糖尿病和肝衰竭等病症。例如参见，Goldberg，美国专利5,340,736。因此本发明的实施方式包括下述用途的方法：降低细胞中肌蛋白的降解速度；降低胞内蛋白质的降解速度；降低细胞内p53蛋白的降解速度；抑制p53相关的癌生长。这些方法中的每一种都包括使细胞(体内或体外，如个体的肌肉)与有效量的这里所公开的化合物(如药物组合物)接触。

蛋白酶体加工的另一种蛋白质为NF-κB(Rel蛋白家族的一员)。转录激活蛋白Rel家族可分成两类，第一类需要进行蛋白酶解加工，包括p50(NF-κB1，105kDa)和p52(NF-κB2，100kDa)。第二类不需要进行蛋白酶解加工，包括p65(RelA，Rel(c-Rel)和RelB)。Rel家族成员可形成同源二聚体和异源二聚体；例如NF-κB是p50-p65异源二聚体。在IκB和p105发生磷酸化和泛素化后，这两个蛋白质分别得到降解和加工，产生活性NF-κB，从细胞质移位至细胞核。还可以用纯化的蛋白酶体对泛素化的p105进行加工(Palombella等，Cell(1994)78：773-785)。活性NF-κB与其它转录激活因子(如HMGI(Y))构成立体特异性增强子复合体(stereospecific enhancer complex)，诱导特定基因的选择性表达。

NF-κB调节基因涉及免疫和炎症反应，以及有丝分裂活动。例如，免疫球蛋白轻链κ基因、IL-2受体α链基因、I类主要组织相容性复合体基因的表达以及大量的细胞因子(例如IL-2、IL-6、粒细胞集落刺激因子和IFN-β)的基因编码需要NF-κB(Palombella等，Cell(1994)78：773-785)。本发明的一些实施方式包括影响IL-2、MCH-I、IL-6、TNFα、TNF-β或任何其它前述蛋白质的表达水平的方法，每一种方法包括给予个体有效量的这里所公开的化合物。包括p50的复合体是急性炎症和免疫反应的快速中介体(Thanos，D.和Maniatis，T.，Cell(1995)80：529-532)。

NF-κB还参与编码E-选择蛋白、P-选择蛋白、ICAM和VCAM-1的细胞粘着基因的表达(Collins，T.，Lab Invest.(1993)68：499-508)。本发明的一种实施方式是抑制细胞粘着(例如，由E-选择蛋白、P-选择蛋白、ICAM或VCAM-1介导的细胞粘着)的方法，包括使细胞接触(或对个体施用)有效量的这里所公开的化合物(或药物组合物)。

NF-κB还与HIV-增强子/启动子专一性结合。相比于mac239的Nef，在控制蛋白激酶结合的区域中，pbj14的HIV调节蛋白Nef的氨基酸有两处不同。人们认为，蛋白激酶对IκB的磷酸化进行信号指示，通过泛素-蛋白酶体途径触发IκB降解。IκB在降解后被释放至细胞核中，从而增强HIV的转录(Cohen，J.，Science，(1995)267：960)。本发明的两种实施方式是一种抑制或降低个体感染HIV的方法，以及一种降低病毒基因表达水平的方法，每一种方法包括给予个体有效量的这里所公开的化合物。

TNFα等脂多糖(LPS)诱导的细胞因子的过度生成被认为是脓毒性休克相关过程的重要因素。此外，人们一般认为LPS激活细胞的第一步是LPS与特定的膜受体结合。20S蛋白酶体复合体的α和β亚基已被鉴定为LPS结合蛋白，说明LPS诱导的信号转导可能是一种治疗或预防脓毒病的重要治疗靶标(Qureshi，N.等，J.Immun.(2003)171：1515-1525)。因此，某些实施方式中，本发明化合物可用于抑制TNFα，以预防和/或治疗脓毒性休克。

细胞内蛋白酶解产生了用于呈递至T-淋巴细胞的小肽以诱导I类MHC介导的免疫反应。免疫系统对感染病毒或已发生致癌性转化的自体细胞进行筛选。一种实施方式为一种抑制细胞内抗原呈递的方法，包括使细胞与这里所述的化合物接触。本发明化合物可用于治疗免疫相关的病症，如过敏、哮喘、器官/组织排斥(移植物抗宿主病)和自身免疫病，包括但不限于狼疮、类风湿关节炎、银屑病、多发性硬化症和炎症性肠病(如溃疡性结肠炎和克罗恩氏病)。这样，另一个实施方式是一种用于抑制个体的免疫系统(如抑制移植排斥、过敏和哮喘)的方法，包括对个体施用有效量的这里所公开的化合物。

另一种实施方式是一种改变由蛋白酶体或其它具有多催化活性的Ntn产生的抗原肽的所有组成部分的方法。例如，如果20S蛋白酶体的PGPH活性被选择性抑制，该蛋白酶体将生成一套不同的抗原肽，并在细胞表面的MHC分子中呈递，而不像在没有任何酶抑制或诸如选择性抑制蛋白酶体的胰凝乳蛋白酶样活性时的抗原肽生成和呈递。

某些蛋白酶体抑制剂阻滞了泛素化NF-κB在体外和体内的降解和加工。蛋白酶体抑制剂还阻滞了IκB-α的降解和NF-κB的激活(Palombella，et al.Cell(1994)78：773-785；and Traenckner，et al.，EMBO J.(1994)13：5433-5441)。本发明的一种实施方式是一种抑制IκB-α降解的方法，包括使细胞与这里所述的化合物接触。另一种实施方式是一种减少细胞、肌肉、器官和个体中的NF-κB胞内含量，包括使细胞、肌肉、器官和个体与这里所述的化合物接触。

需要蛋白酶解加工的其它真核转录因子包括通用转录因子TFIIA，单纯疱疹病毒VP16辅助蛋白(宿主细胞因子)、病毒诱导型IFN调节因子-2蛋白和膜结合型固醇调节元件结合蛋白-1。

本发明的其它实施方式是影响依赖于细胞周期蛋白的真核细胞周期的方法，包括使细胞与这里所公开的化合物接触(体外或体内)。细胞周期蛋白是涉及细胞周期控制的蛋白质。蛋白酶体参与细胞周期蛋白的降解。细胞周期蛋白的例子包括有丝分裂细胞周期蛋白、G1细胞周期蛋白和细胞周期蛋白B。细胞周期蛋白的降解使细胞能够脱离一个细胞周期阶段(如有丝分裂)进入另一个阶段(如分化)。认为所有的细胞周期蛋白与p34.sup.cdc2蛋白激酶或相关激酶缔合。蛋白酶解靶信号定位于氨基酸42-RAALGNISEN-50(降解框)。有证据表明，在有丝分裂期间，细胞周期蛋白转化为易受泛素连接酶损害的形式或激活细胞周期蛋白专一性连接酶(Ciechanover，A.，Cell，(1994)79：13-21)。对蛋白酶体的抑制抑制了细胞周期蛋白的降解，从而抑制细胞(例如，在细胞周期蛋白相关的癌症中)的增殖(Kumatori等，Proc，Natl，.Acad.Sci.USA(1990)87：7071-7075)。本发明的一种实施方式是一种对个体进行增生性疾病(如癌症、银屑病或再狭窄)治疗的方法，包括对个体施用有效量的这里所公开的化合物。本发明还包括一种对个体进行细胞周期蛋白相关的炎症治疗的方法，包括对个体施用治疗有效量的这里所述的化合物。

另外的实施方式是影响依赖于蛋白酶体的癌蛋白调节的方法抑制治疗或抑制癌生长的方法，每种方法包括使细胞接触(体内，如在个体体内，或体外)这里所公开的化合物。HPV-16和HPV-18衍生的E6蛋白质刺激了依赖ATP的和依赖泛素的p53在粗品网织红细胞裂解液中的共轭和降解。突变型不耐热E1已显示在非准许温度下，隐性癌基因p53在细胞系中积累。提高p53的水平可引起调亡。泛素体系降解的原癌蛋白的例子包括c-Mos、c-Fos和c-Jun。一种实施方式是一种治疗p53相关调亡的方法，包括给个体施用有效量的这里所公开的化合物。

另一种实施方式中，本公开化合物用于治疗寄生虫感染，如原生寄生虫引起的感染。这些寄生虫的蛋白酶体被认为主要涉及细胞分化和复制活性(Paugam等，Trends Parasitol.2003，19(2)：55-59)。此外，内阿米巴属与蛋白酶体抑制剂接触时，显示丧失包囊形成能力。某些这样的实施方式中，本公开化合物用于治疗原生寄生虫引起的人体寄生虫感染，该原生寄生虫选自疟原虫属(Plasmodium sps.)(包括引起疟痰的恶性疟原虫(P.falciparum)、间日疟原虫(P.vivax)、三日疟原虫(P.malariae)和卵形疟原虫(P.ovale))、锥虫属(Trypanosoma sps.)(包括引起恰加斯病的克氏锥虫(T.cruzi)和引起非洲嗜睡症的布氏锥虫(T.brucei))、利什曼原虫属(Leishmania sps.)(包括亚马逊利什曼原虫(L.amazonensis)、杜氏利什曼原虫(L.donovani)、婴儿利什曼原虫(L.infantum)、墨西哥利什曼原虫(L.mexicana)等)、卡氏肺囊虫Pneumocystis carinii)(一种已知引起艾滋病人和其它免疫抑制病人发生肺炎的原虫)、刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)、溶组织内阿米巴虫(Entamoeba histolytica)、侵入内阿米巴虫(Entamoeba invadens)和兰氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia)。某些实施方式中，本公开化合物用于治疗由选自蝉尔曼氏疟原虫(Plasmodium hermani)、隐孢子虫(Cryptosporidium sps.)、细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus)、柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)、神经肉孢子虫(Sarcocysfis neurona)和粗糙链孢霉(Neurospora crassa)的原虫寄生虫引起的动物和家畜寄生虫感染。WO98/10779描述了其它用作治疗寄生虫病的蛋白酶体抑制剂的化合物，这里对其整体内容进行综合参考。

某些实施方式中，本公开化合物对寄生虫中的蛋白酶体活性进行不可逆抑制。已显示，这种不可逆抑制诱使红细胞和白细胞中的酶活性不可恢复地终止。某些此类实施方式中，就抗再暴露于寄生虫的治疗而言，血细胞的漫长半衰期可提供延长保护。某些实施方式中，有关对未来感染进行化学预防方面，血细胞的漫长半衰期可提供延长保护。

也有报道称，在骨器官培养物中，与20S蛋白酶体结合的抑制剂刺激了骨的形成。另外，给小鼠全身施用这样的抑制剂时，某些蛋白酶体抑制剂提高骨体积和骨形成速度70％以上(Garrett J.R.等，J.Clin.Invest.(2003)111：1771-1782)，从而表明，泛素-蛋白酶体机(ubiquitin-proteasome machinery)对成骨细胞的分化和骨形成进行调节。因此，本公开化合物可用于治疗和/或预防骨质疏松症等骨流失相关疾病。

骨组织是具有刺激骨细胞能力的因子的良好来源。因此，牛骨组织提取物不仅含有负责维持骨的结构完整性的结构蛋白，还含有能刺激骨细胞增殖的生物活性骨生长因子。在这些因子中包括最近报道的被称为骨形态发生蛋白(BMPs)的蛋白质家族。所有这些生长因子对其它类型的细胞(包括骨细胞)产生影响，包括Hardy，M.H.等描述的有关在发育期间，骨形态发生蛋白(BMPs)在毛囊中差别表达的证据(Trans Genet(1992)8：55-61)。Harris，S.E.等描述了TGFβ对BMP-2和其它骨细胞内物质的表达的影响(BoneMiner Res(1994)9：855-863)。在细胞成熟期间及增殖期以后，在成熟滤泡中也出现了BMP-2的表达(Hardy等，(1992)，见上)。因此，本发明化合物也可用于刺激毛囊生长。

最后，本公开化合物还用作诊断剂(例如，诊断试剂盒或临床实验室用的诊断剂)，对蛋白酶体等Ntn水解酶所加工的蛋白质(例如酶、转录因子)进行筛选。本公开化合物还用作专一性结合X/MB1亚基或α链以及抑制与之相关的蛋白酶解活性的研究试剂。例如，能确定蛋白酶体的其它亚基的活性(及专一性抑制剂)。

在成熟或活化过程中，大多数细胞蛋白遭受蛋白酶解加工。这里所公开的酶抑制剂可用于确定细胞的、发育的或生理的过程或产量是否受到特定的Ntn水解酶的蛋白水解活性的调节。一种这样的方法包括：获取生物体、完整的细胞制备物或细胞提取物；使该生物体、细胞制备物或细胞提取物与这里所公开的化合物接触；使接触化合物的生物体、细胞制备物或细胞提取物与信号仪接触，监控过程或产量。这里所公开的化合物的高选择性能够迅速而准确地在给定的细胞的、发育的或生理的过程中消除或暗示Ntn(例如，20S蛋白酶体)。

给药

这里所描述制备的化合物可以各种形式施用，其形式取决于的进行治疗的病症以及病人的年龄、状况和体重(如本领域所熟知)。例如，进行口服化合物时，可将其配制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、粉剂或糖浆剂；或者进行胃肠道外给药时，可将其配制成注射剂(静脉内的、肌肉内的或皮下的)，滴注制剂或栓剂。通过眼粘膜路径给药时，可将其配制成滴眼剂或眼膏剂。可通过常规方法制备这些剂型，如果需要，可将活性成分与任何常规的添加剂或赋形剂混合，如粘合剂、崩解剂、润滑剂、矫味剂、稳定剂、助悬剂、乳化剂、包衣材料、环糊精和/或缓冲剂。虽然剂量随着症状、病人的年龄和体重、需要治疗或预防的病症的性质及严重性、给药路径和药物剂型而变化，一般地，成年病人的每日推荐剂量为0.01-2000mg化合物，该剂量可以一次剂量使用或分次剂量使用。能与载体物质混合制成一次剂量药剂的活性成分的用量一般为产生疗效的化合物的量。

在对给定病人的治疗效果方面，产生最有效结果的精确的给药时间和/或组合物用量取决于特定化合物的活性、药代动力学和生物利用率；病人的生理状况(包括年龄、性别、疾病类型和阶段、一般身体状况、对给定剂量的反应性以及药疗类型)、给药路径等。但是，以上方针可用作对治疗方法进行精调的基础，例如确定最佳的时间和/或给药量，只需要进行日常试验，包括对个体进行监控以及调整剂量和/或时间安排。

这里使用的短语“药学上可接受的”指那些在合理的医学判断范围内，适于用来接触人及动物组织，而不过度产生毒性、刺激、过敏反应或其它问题或并发症，具有合理的利益/风险比的配体、材料、成份和/或剂型。

这里使用的术语“药学上可接受的载体”指药学上可接受的材料、成分或载体，例如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或胶囊材料。每个载体必须是“可接受的”，即与剂型中的其它成分相容，对病人无损害。可用作药学上可接受的载体的材料的一些例子包括：(1)糖，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；(2)淀粉，如玉米淀粉、马铃薯淀粉以及取代的或未取代的β-环糊精；(3)纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素；(4)黄蓍胶粉；(5)麦芽；(6)明胶；(7)滑石；(8)赋形剂，如可可脂和栓剂蜡(suppository waxes)；(9)油，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；(10)二元醇，如丙二醇；(11)多元醇，如甘油、山梨糖醇、甘露醇和聚乙二醇；(12)酯，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；(13)琼脂；(14)缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；(15)海藻酸；(16)元热原水；(17)等渗盐水；(18)林格氏溶液；(19)乙醇；(20)磷酸盐缓冲溶液；和(21)其它用于药物剂型的无毒的相容物质。某些实施方式中，本发明药物组合物是无热原的，即，给病人施用时不会引起明显的体温升高。

术语“药学上可接受的盐”指相对元毒的抑制剂的无机酸加成盐及有机酸加成盐。这些盐可以在对抑制剂进行最后分离和纯化期间原地制备，或通过分别将游离碱形式的纯化抑制剂与合适的有机酸或无机酸反应，分离所形成的盐制备。代表性的盐包括氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、硝酸盐、乙酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月桂酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、磷酸盐、甲苯磺酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、延胡索酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、萘酸盐(naphthylate)、甲磺酸盐、葡萄糖酸盐、乳糖酸盐、十二烷基磺酸盐和氨基酸盐等。(例如参见Berge等(1977)“药学上的盐”，J.Pharm.Sci.66：1-19)。

其它情况下，用于本发明方法的抑制剂可含有一个或更多个酸性官能团，这样能与药学上可接受的碱形成药学上可接受的盐。在这些情况下，术语“药学上可接受的盐”指相对无毒的抑制剂的无机碱及有机碱加成盐。这些盐同样可以在对抑制剂进行最后分离和纯化期间原地制备，或通过分别将游离酸形式的纯化抑制剂与合适的碱(如药学上可接受的金属阳离子的氢氧化物、碳酸盐或碳酸氢盐)、氨水或药学上可接受的有机伯胺、仲胺或叔胺反应制备。典型的碱金属盐或碱土金属盐包括锂盐、钠盐、钾盐、钙盐、镁盐和铝盐等。用于形成碱加成盐的典型的有机胺包括乙胺、二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等(例如参见，上述Berge等的文献)。

在组合物中还可以存在润湿剂、乳化剂和润滑剂(如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁)以及着色剂、释放剂、包衣材料、甜味剂、调味剂和香料、防腐剂和抗氧化剂。

药学上可接受的抗氧化剂包括：(1)水溶性抗氧化剂，如抗坏血酸、盐酸半胱氨酸、硫酸氢钠、焦亚硫酸氢钠、亚硫酸钠等；(2)油溶性抗氧化剂，如棕榈酸抗坏血酯、丁羟茴醚(BHA)、丁羟甲苯(BHT)、卵磷脂、棓酸丙酯、α-生育酚等；和(3)金属螯合剂，如柠檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨糖醇、酒石酸、磷酸等。

适合于口服的剂型可为胶囊剂、扁囊剂、丸剂、片剂、糖锭(以调味剂为基础，通常为蔗糖、阿拉伯胶或黄蓍胶)、粉剂、颗粒剂；或含水的或无水的溶液剂或混悬剂；或水包油或油包水乳液剂；或酏剂或糖浆剂；或软锭剂(使用惰性基质，如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶)和/或漱口剂等，每一种均含有预先确定量的抑制剂作为活性成分。组合物还可以以大丸剂、干药糖剂或糊剂使用。

在用于口服的固体剂型(胶囊剂、片剂、丸剂、糖衣丸剂、粉剂、颗粒剂等)中，活性成分与一种或更多种药学上可接受的载体混合，如柠檬酸钠或磷酸氢钙；和/或下列任一种：(1)填充剂或增量剂，如淀粉、环糊精、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和/或硅酸；(2)粘合剂，如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯胶；(3)保湿剂，如甘油；(4)崩解剂，如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；(5)溶液阻滞剂，如石蜡；(6)吸收加速剂，如季铵化合物；(7)湿润剂，如乙酰乙醇和甘油单硬脂酸酯；(8)吸收剂，如高岭土和膨润土；(9)润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠和它们的混合物；以及(10)着色剂。就胶囊剂、片剂和丸剂而言，药物组合物还可以含有缓冲剂。相似类型的固体组份也可以作为填充剂用于使用乳糖或乳糖(milk sugars)以及高分子量的聚乙二醇等赋形剂的软、硬填充明胶胶囊。

可通过压制或模压制备片剂，任选使用一种或更多种助剂。可使用粘合剂(如明胶或羟丙基甲基纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(如羟乙酸淀粉钠或交联羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或分散剂制备压制片剂。可通过在合适的机器中对惰性稀释液湿润的粉状抑制剂混合物进行模压制备模制片。

片剂及糖衣丸剂、胶囊剂、丸剂和颗粒剂等其它固体剂型可任选地用包衣和外壳(如肠溶衣和制药领域熟知的其它包衣)划痕(scored)或制备。还可以对它们进行配制以便对其中使用的活性成分进行缓释或控释，例如，使用不同比例的羟丙基甲基纤维素、其它聚合物基质、脂质体和/或微球体，以提供目标释放形式。可以通过诸如用持留细菌过滤器过滤或结合使用杀菌剂对它们进行灭菌，形成灭菌组合物形式，可在使用前不久溶于无菌水或一些其它的无菌注射介质。这些组合物还可以任选地含有遮光剂，组合物可以仅仅(或优选)在胃肠道的特定部位释放活性成分(任选缓释方式)。可使用的埋入组合物的例子包括聚合物和蜡。如果需要，活性成分也可以与上述一种或更多种赋形剂形成微胶囊形式。

口服用液体剂型包括药学上可接受的乳剂、微乳剂、溶液剂、混悬剂、糖浆剂和酏剂。除活性成分外，液体剂型中可含有本领域常用的惰性稀释剂，例如水或其它溶剂；稳定剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、油(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃甲醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇的脂肪酸酯，以及它们的混合物。

除惰性稀释剂外，此类口服组合物还可包括位剂，如润湿剂、乳化剂和混悬剂、甜味剂、调味剂、着色剂、香精和防腐剂。

除活性成分外，混悬剂可含有混悬剂，例如乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶，以及它们的混合物。

直肠和阴道给药用的剂型可以是栓剂，可通过将一种或更多种抑制剂与一种或更多种合适的无刺激性赋形剂或载体(例如包括可可脂、聚乙二醇、栓剂蜡或水杨酸酯)混合制备，它在室温下为固体，但在体温下为液体，因此将在直肠或阴道中熔化并释放活性剂。

适于阴道给药的剂型还包括阴道栓剂、卫生棉条(tampons)、乳膏剂、凝胶剂、糊剂、泡沫剂或喷雾剂型，含有本领域已知的合适的载体。

用于局部或透皮给予抑制剂的剂型包括粉剂、喷雾剂、油膏剂、糊剂、乳膏剂、洗剂、凝胶剂、溶液剂、贴剂和吸入剂。活性组分可在无菌条件下与药学上可接受的载体以及任何可能需要的防腐剂、缓冲剂或推进剂混合。

除抑制剂外，油膏剂、糊剂、乳膏剂和凝胶剂可含有赋形剂，如动植物脂肪、油、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、硅酸、滑石和氧化锌，或它们的混合物。

除抑制剂外，粉剂和喷雾剂可含有赋形剂，如乳糖、滑石、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉，或这些物质的混合物。喷雾剂可另外含有通常的推进剂，如含氯氟烃和挥发性未取代烃(如丁烷及丙烷等)。

或者可以通过气溶胶给予抑制剂。这通过制备含有该组合物的水性气溶胶、脂质体制剂或固体颗粒来实现。可使用无水混悬剂(如氟碳推进剂)。优选声波喷雾器(sonic nebulizer)，固为它们暴露在剪切下的制剂达到最小，剪切可引起化合物的降解。

通常地，通过将试剂的水溶液或混悬液与常规的药学上可接受的载体和稳定剂一起配制制备水性气溶胶。载体和稳定剂根据特定组合物的需要而变化，但典型包括非离子表面活性剂(吐温类、普朗尼克类、脱水山梨糖醇酯类、卵磷脂、氢化蓖麻油类)、药学上可接受的潜溶剂(如聚乙二醇、血清白蛋白等无害蛋白质、油酸、甘氨酸等氨基酸、缓冲剂、盐类、糖类或糖醇)。气溶胶一般由等渗溶液制备。

透皮贴剂的额外益处是向身体控制释放抑制剂。这种剂型可通过使试剂溶解或分散于合适的介质中制备。还可使用吸收促进剂以增加透过皮肤的抑制剂的通量。可通过提供速度控制膜或使抑制剂分散于聚合物基质或凝胶中控制该通量速度。

适用于胃肠道外给药的本发明药物组合物含有与一种或更多种药学上可接受的无菌水溶液或非水溶液、分散剂、混悬剂或乳剂或无菌粉剂组合的一种或更多种抑制剂，它可在使用前不久重新形成无菌的可注射溶液或分散液，可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂、使制剂与拟受药的血液等渗的溶质或混悬剂或增稠剂。

本发明药物组合物中可使用的合适的水性载体及非水载体的例子包括：水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)及其合适的混合物、橄榄油等植物油、油酸乙酯等可注射有机酯。通过使用卵磷脂等包衣材料、维持分散液中的颗粒大小以及使用表面活性剂等方式可保持适当的流动性。

这些组合物还可以含有佐剂，如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。通过使用各种抗细菌剂和抗真菌剂(例如对羟基苯甲酸酯、三氯叔丁醇、苯酚山梨酸(phenol sorbic acid)等)可确保防止微生物起作用。还优选在组合物中包括张力调节剂，如糖类、氯化钠等。此外，可通过使用单硬脂酸铝和明胶等延迟吸收的试剂延长注射药剂的吸收。

有时，为了延长药效，优选减缓对皮下注射或肌肉注射药物的吸收。例如将药物溶解或混悬于赋形剂油中以延迟对胃肠道外给予的药物的吸收。

通过使抑制剂在聚丙交酯-聚乙交酯等生物可降解聚合物中形成微胶囊基质制备可注射的长效制剂。根据药物与聚合物的比例、所使用的具体聚合物的性质，可对药物的释放速度进行控制。其它生物可降解聚合物的例子包括聚原酸酯和聚酸酐。还可以将药物埋于与体组织相容的脂质体或微乳中以制备长效注射制剂。

给予制剂的方式可以为口服、胃肠道外给予、局部给予或经直肠给予。当然，对于每一条给药途径，均以合适的剂型给药。例如，以注射剂、吸入剂、洗眼剂、油膏剂、栓剂、输液剂形式给予片状或胶囊药物；以洗剂或油膏剂形式局部给药以及以栓剂形式直肠给药。优选口服。

这里使用的短语“胃肠道外给药”指不同于肠内给药和局部给药的给药模式，通常为注射给药，包括但不限于静脉内的、肌肉内的、动脉内的、鞘内的、囊内的、眶内的、心内的、皮内的、腹膜内的、穿鞘的、皮下的、表皮下的、关节内的、包囊下的、蛛网膜下的、脊柱内的和胸骨内的注射和输液。

这里使用的短语“全身给药”和“外周给药”指不直接将配体、药物或其它物质给入中枢神经系统，以致于进入病人的全身从而进行代谢及其它类似的过程，例如，皮下给药。

可通过任何合适的给药途径对人和其它动物施用这些抑制剂，进行治疗，包括通过口附、经鼻给药(例如以喷雾形式)，直肠给药、阴道给药、胃肠道外给药、脑池内给药和局部给药(以粉剂、油膏剂或滴剂形式)，包括经颊给药、舌下给药。

无论选择何种给药途径，可利用本领域熟练人员已知的常规方法将本发明抑制剂(可以合适的水合物形式使用)和/或药物组合物配制成药学上可接受的剂型。

本发明药物组合物中活性成分的实际剂量水平可以变化，从而对于特定的病人，活性成分的用量、组合和给药方式能有效实现所希望的治疗反应，且对病人无毒。

本公开化合物在药学上可接受的混合物中的浓度随着一些因素而变化。这些因素包括化合物的施用剂量、所使用的化合物的药物动力学特征以及给药途径。一般地，本发明组合物可以是胃肠道外给予的水溶液，含有约0.1-10％w/v本公开化合物，以及其它物质。典型的剂量范围为每日约0.01-约50mg/kg体重，以1-4个分次剂量给予。每个分次剂量所含有的本发明化合物可以相同或不同。有效剂量取决于包括病人的全面健康状况以及所选择的化合物的剂型和给药途径等一些因素。

本发明的另一个方面，提供了一种结合疗法，其中将一种或更多种其它治疗剂与蛋白酶抑制剂共同使用。这种结合治疗可通过同时、连续或分别定量给予单个治疗组分的方式实现。

某些实施方式中，本发明化合物与化学治疗剂结合使用。合适的化学治疗剂可包括天然产物，如长春花属生物碱(即，长春碱、长春新碱、长春瑞宾)、紫杉醇、表鬼臼毒素(即，表鬼臼毒吡喃葡糖苷、表鬼臼毒噻吩糖苷)、抗生素(放线菌素(放线菌素D)、柔红霉素(daunorubicin)、阿霉素和去甲氧柔红霉素(idarubicin))、蒽环霉素(anthracyclines)、米托蒽醌(mitoxantrone)、博莱霉素(bleomycins)、普卡霉素(plicamycin)(光辉霉素(mithramycin))和丝裂霉素(mitomycin)、酶(L-天冬酰胺酶，对L-天冬酰胺进行系统代谢，剥夺没有能力合成自身天冬酰胺的细胞)；抗血小板剂；抗增殖/抗有丝分裂烷基化剂，如氮芥子气(氮芥、环磷酰胺及类似物、苯丙氨酸氮芥、苯丁酸氮芥)、氮杂环丙烷和甲密胺(methylmelamines)(六甲密胺和噻替哌(thiotepa))、磺酸烷基酯(白消安(busulfan))、亚硝基脲(亚硝脲氮芥(carmustine，BCNU)及类似物，链脲霉素)、trazenes-达卡巴嗪(dacarbazinine)(DTIC)；抗增殖/抗有丝分裂抗代谢物，如叶酸类似物(氨甲基叶酸(methotrexate))、嘧啶类似物(氟尿嘧啶(fluorouracil)、氟尿苷(floxuridine)和阿糖胞苷(cytarabine))、嘌呤类似物和相关的抑制剂(巯嘌呤(mercaptopurine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)、喷司他丁(pentostatin)和2-氯去氧腺苷)；芳香酶抑制剂(阿那曲唑(anastrozole)、依西美坦(exemestane)和来曲唑(letrozole))；以及铂配位络合物(顺铂(cisplatin)、卡波铂(carboplatin))、甲基苄肼(procarbazine)、羟基脲、曼托坦(mitotane)、氨鲁米特(aminoglutethimide)；激素(即，雌激素)和促激素，如促黄体生成素释放素(LHRH)激动剂(性瑞林(goserelin)、醋酸亮丙瑞林(leuprolide)和曲普瑞林(triptorelin))。其它的化学治疗剂可包括氮芥(mechlorethamine)、喜树碱、异环磷酰胺(ifosfamide)、他莫昔芬(tamoxifen)、雷洛昔芬(raloxifene)、吉西他滨(gemcitabine)、长春瑞宾(navelbine)，或前述化合物的任何类似物或衍生物。

某些实施方式中，本发明化合物与类固醇结合使用。合适的类固醇可包括，但不限于21-乙酰氧基孕烯醇酮、阿氯米松(alclometasone)、阿尔孕酮、安西缩松(amcinonide)、丙酸倍氯米松(beclomethasone)、倍他米松(betamethasone)、布地缩松(budesonide)、氯强的松(chloroprednisone)、氯倍他索(clobetasol)、氯可托龙(clocortolone)、氯泼尼醇(cloprednol)、皮质酮、可的松(cortisone)、可的伐唑(cortivazol)、去氟可特(deflazacort)、羟泼尼缩松(desonide)、去羟米松(desoximetasone)、地塞米松(dexamethasone)、双氟拉松(diflorasone)、二氟米松(diflucortolone)、醋丁二氟龙(difuprednate)、甘草次酸(enoxolone)、氟

米松(fluazacort)、氟氯缩松(flucloronide)、氟米松(flumethasone)、氟尼缩松(flunisolide)、醋酸氟轻松(fluocinoloneacetonide)、氟轻松(fluocinonide)、氟可丁酯(fluocortin butyl)、氟可龙(fluocortolone)、氟氢缩松(fluorometholone)、醋酸氟培龙(fluperolone acetate)、醋酸氟甲叉龙(fluprednidene acetate)、氟泼尼龙(fluprednisolone)、氟氢缩松(flurandrenolide)、丙酸氟地松(fluticasone propionate)、氟甲酰龙(formocortal)、哈西缩松(halcinonide)、卤倍他索丙酸酯(halobetasol propionate)、卤米松(halometasone)、氢化可的松(hydrocortisone)、氯替泼诺(loteprednol etabonate)、马泼尼酮(mazipredone)、甲羟孕酮(medrysone)、甲基泼尼松(meprednisone)、甲基强的松龙(methylprednisolone)、糠酸莫米他松(mometasone furoate)、对氟米松(paramethasone)、泼尼卡松(prednicarbate)、强的松龙(prednisolone)、强的松龙25-二乙氨基乙酸酯(prednisolone 25-diethylaminoacetate)、强的松龙磷酸钠(prednisolone sodiumphosphate)、强的松(prednisone)、强的松龙戊酸酯(prednival)、甲烯强的松龙(prednylidene)、双甲丙酰龙(rimexolone)、硫氢可的松(tixocortol)、去炎松(triamcinolone)、醋酸去炎松(triamcinolone acetonide)、丙炎松氨丁酯(triamcinolonebenetonide)、己酸丙炎松(triamcinolone hexacetonide)，以及它们的盐和/或衍生物。

某些实施方式中，本发明化合物与免疫治疗剂结合使用。合适的免疫治疗剂可包括，但不限于环孢菌素(cyclosporine)、沙立度胺(thalidomide)和单克隆抗体。单克隆抗体可以是裸的或缀合的，如利妥昔单抗(rituximab)、托西莫单抗(tositumomab)、阿伦单抗(alemtuzumab)、依帕珠单抗(epratuzumab)、替伊莫单抗(ibritumomab tiuxetan)、吉妥珠单抗奥唑米星(gemtuzumabozogamicin)、贝伐单抗(bevacizumab)、西妥昔单抗(cetuximab)、埃罗替尼(erlotinib)和曲妥珠单抗(trastuzumab)。

实施例

方案1：实施例1的合成

(B)的合成

在NBoc亮氨酸(50.0mmol，11.56g)和苯丙氨酸甲酯(50.0mmol，10.78g)的DMF(500mL)溶液中加入HOBT(10.81g，80.0mmol)和DIEA(200.0mmol，25.85g，35mL)。在冰浴中将混合物冷却至0℃，5分钟内分次加入BOP(80.0mmol，35.38g)。反应液置于一个氩气压下，搅拌过夜。反应液用盐水(1000mL)稀释，并用乙酸乙酯(5×200mL)萃取。合并有机层，用水(10×100mL)和盐水(2×150mL)洗涤，经硫酸镁干燥。过滤去除硫酸镁，减压脱除挥发物，得到(A)(18.17g)。在50mL 0℃冷却的80％TFA/DCM溶液中加入BocNHLeuPheOMe(45.86mmol，18.0g)。搅拌溶液，2小时内使之升至室温。减压脱除挥发物，得到油。在该油中加入BocNHhPhe(45.86mmol，12.81g)、DMF(500mL)、HOBT(73.37mmol，9.91g)和DIEA(183.44mmol，23.70g，32.0mL)。在冰水浴中将混合物冷却至0℃，5分钟内分次加入BOP(73.37mmol，32.45g)。将反应液置于氩气下过夜，使之升至室温。反应液用水(1500mL)稀释，并用DCM(5×300mL)萃取。合并有机层，用水(6×300mL)和盐水(1×300mL)洗涤，经硫酸镁干燥。过滤去除硫酸镁，减压脱除挥发物，得到黄色固体。在该固体中加入200mL 95％乙醇，加热混合物至65℃以使固体全部溶解。然后在溶液中加入1000mL冷冻水，收集所得沉淀物，得到(B)(21.59g)。

(C)的合成

将化合物(B)(1.47mmol，0.81g)与TFA/DCM(80％)混合，室温下搅拌1小时，此时浓缩混合物，并在高真空下放置2小时，生成三肽胺(Q)的TFA盐。在TFA盐(1.47mmol)的DMF(10mL)0℃溶液中加入DIEA(4.4mmol，0.77mL)，然后加入苄氧基乙酰氯(2.21mmol，0.343mL)。在一个氮气压下，搅拌反应液2小时，使之回升至室温。混合物用盐水(15mL)稀释，用乙酸乙酯萃取(3×15mL)。合并有机层，用水(2×15mL)和盐水(1×15mL)洗涤，经硫酸钠干燥。过滤去除硫酸钠，减压脱除挥发物。粗物质经快速色谱纯化得到(C)(0.83g)。

(D)的合成

在冷却至0℃的(C)(1.38mmol，0.830g)的甲醇/水(3∶1，28mL)悬浮液中加入氢氧化锂(13.8mmol，0.331g)。18小时后，在5℃下，用20mL饱和氯化铵使反应猝灭，进一步用150mL水稀释。用1N盐酸调节反应混合物的pH至2，过滤收集固体，得到(D)(0.900g)。

(E)的合成

将化合物(D)(0.17mmol，0.10g)溶解于甲醇(10mL)中，加入Pd-C(5％，0.08g)，在一个氢气压下，室温下搅拌反应混合物2小时。然后用氩气吹扫混合物，经硅藻土过滤，浓缩得到(E)。

化合物1的合成

搅拌下，向(F)(见：Bioorg.Med.Chem.Letter 1999，9，2283-88)(0.164mmol)的DMF(2mL)溶液中加入(E)(0.17mmol)、DIEA(0.652mmol，0.114mL)和HOBT(0.266mmol，0.036g)。在冰浴中将混合物冷却至0℃，分次加入BOP(0.262mmol，0.116g)。在一个氩气压下，5℃下搅拌混合物过夜。反应液用盐水(15mL)稀释，用乙酸乙酯萃取。有机层用水、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥。过滤除去硫酸镁，减压脱除挥发物。用制备HPLC纯化粗物质，得到化合物1(IC₅₀20S CT-L＜50nM，IC₅₀基于细胞的CT-L＜100nM)。

方案2：实施例2的合成

(G)的合成

将化合物(C)(1.0mmol，0.601g)溶解于甲醇(25mL)中，加入Pd-C(10％，600mg)，在一个氢气压下，室温下搅拌反应混合物48小时。然后用氩气吹扫混合物，经硅藻土过滤，浓缩得到(G)(600mg)。

(H)的合成

在0℃的(G)(1.0mmol，0.511g)的DCM(40mL)溶液中加入DIEA(2.0mmol，0.348mL)和二苄基磷酰氯(2.0mmol，0.593g)。在一个氮气压下，室温下，搅拌反应液过夜。然后真空浓缩反应液，粗物质经快速色谱纯化得到(H)(0.181g)。

(I)的合成

在冷却至0℃的(H)(0.11mmol，0.090g)的甲醇/水(3∶1，4mL)悬浮液中加入氢氧化锂(1.6mmol，0.4mL，4M水溶液)。45分钟后，在5℃下，用10mL饱和氯化铵使反应猝灭。用1N盐酸调节反应混合物的pH至2，用乙酸乙酯萃取。有机层经水和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥。过滤除去硫酸镁，减压脱除挥发物，得到(I)。

(J)的合成

搅拌下，向(F)(见：Bioorg.Med.Chem.Letter 1999，9，2283-88)(0.082mmol)的DMF(2mL)溶液中加入(I)(0.082mmol，0.062g)、DIEA(0.328mmol，0.057mL)和HOBT(0.133mmol，0.018g)。在冰浴中将混合物冷却至0℃，分次加入BOP(0.131mmol，0.058g)。在一个氩气压下，5℃下搅拌混合物过夜。反应液用水(15mL)稀释，过滤收集得到(J)(0.081g)。

化合物2的合成

在(J)(0.005mmol，0.005g)的THF(1mL)溶液中加入4滴水和10％Pd/C(5mg)。在氢气下，室温下搅拌混合物1小时，用硅藻土过滤，用碳酸钠(0.263g溶于3mL水)处理滤液。过滤收集固体，放置在高度真空中，得到化合物2(0.004g)。

方案3：实施例3的合成

(L)的合成

在(K)(0.19mmol，0.10g)的THF(20mL)溶液中加入碘化钾(0.038mmol，0.0063g)、二甲胺(0.456mmol，0.228mL，2M TFH溶液)，在一个氮气压下，搅拌混合物过夜，减压脱除挥发物，粗物质用乙酸乙酯(15mL)吸收，用水(2×10mL)和盐水(2×10mL)洗涤，经硫酸镁干燥。过滤除去硫酸镁，减压脱除挥发物，得到(L)(0.100g)。

(M)的合成

在冷却至0℃的(L)(0.186mmol，0.100g)的甲醇/水(3∶1，4mL)悬浮液中加入氢氧化锂(1.86mmol，0.045g)。12小时后，在5℃下，用20mL饱和氯化铵使反应猝灭，进一步用10mL水稀释。用1N盐酸调节反应混合物的pH至3，用氯仿(3×15mL)萃取，经硫酸镁干燥。过滤除去硫酸镁，减压脱除挥发物，得到(M)。

化合物3的合成

搅拌下，向(F)(见：Bioorg.Med.Chem.Letter 1999，9，2283-88)(0.082mmol)的DMF(1mL)溶液中加入(M)(0.021mmol)、DIEA(0.28mmol，0.05mL)和HOBT(0.133mmol，0.018g)。在冰浴中将混合物冷却至0℃，分次加入BOP(0.131mmol，0.058g)。在一个氩气压下，5℃下搅拌混合物过夜。然后用盐水(15mL)稀释反应液，用乙酸乙酯萃取。有机层用水、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥。过滤除去硫酸镁，减压脱除挥发物。得到化合物3(IC₅₀ 20S CT-L＜100nM，基于细胞的CT-L＜100nM)。

方案4：实施例4的合成

(N)的合成

将化合物(B)(1.80mmol，1.0g)与TFA/DCM(80％)混合，室温下搅拌1小时，此时浓缩混合物，并在高真空下放置2小时，生成三肽胺的TFA盐。在0℃的TFA盐(1.80mmol)的DMF(10mL)溶液中加入DIEA(3.6mmol，0.7mL)，然后加入氯乙酰氯(2.7mmol，0.215mL)。在一个氮气压下，搅拌反应液过夜，使之回升至室温。混合物用盐水(15mL)稀释，用乙酸乙酯萃取(3×15mL)。合并有机层，用水(2×15mL)和盐水(2×15mL)洗涤，经硫酸钠干燥。过滤去除硫酸钠，减压脱除挥发物。粗物质悬浮于乙酸乙酯中，过滤得到(N)(0.640g)。

(O)的合成

在(N)(0.094mmol，0.050g)的THF(10mL)溶液中加入碘化钾(0.019mmol，0.0032g)和哌啶(0.113mmol，0.0096g)，在一个氮气压下，搅拌混合物过夜，减压脱除挥发物，粗物质用乙酸乙酯(15mL)吸收，用水(2×10mL)和盐水(2×10mL)洗涤，经硫酸镁干燥。过滤除去硫酸镁，减压脱除挥发物，得到(O)。

(P)的合成

在冷却至0℃的(O)(0.094mmol)的甲醇/水(3∶1，4mL)悬浮液中加入氢氧化锂(0.94mmol，0.023g)。12小时后，在5℃下，用20mL饱和氯化铵使反应猝灭，进一步用10mL水稀释。用1N盐酸调节反应混合物的pH至3，用DCM(3×15mL)萃取，经硫酸镁干燥。过滤除去硫酸镁，减压脱除挥发物，得到(P)。

化合物4的合成

搅拌下，向(F)(见：Bioorg.Med.Chem.Letter 1999，9，2283-88)(0.082mmol)的DMF(2mL)溶液中加入(P)(0.082mmol，0.046g)、DIEA(0.328mmol，0.057mL)和HOBT(0.133mmol，0.018g)。在冰浴中将混合物冷却至0℃，分次加入BOP(0.131mmol，0.058g)。在一个氩气压下，5℃下搅拌混合物过夜。反应液用水(15mL)稀释，用乙酸乙酯萃取。有机层用水、饱和碳酸氢钠和盐水洗涤，经元水硫酸镁干燥。过滤除去硫酸镁，减压脱除挥发物。得到化合物4(0.034g)(IC₅₀20SCT-L＜100nM，IC₅₀基于细胞的CT-L＜100nM)。

方案5：实施例5的合成

(T)的合成

除了用(Q)代替(F)，用环丙基乙酸代替(E)，基本按照将(E)转化成1的步骤得到化合物(T)。

(U)的合成

除了用(T)代替(C)，基本按照将(C)转化成(D)的步骤得到化合物(U)。

化合物5的合成

除了用(U)代替(E)，基本按照将(E)转化成1的步骤得到化合物5。

方案6：实施例6的合成

(W)的合成

将化合物(V)(0.25g，0.39mmol)与12mL TFA/DCM(80％)混合，室温下搅拌1小时，此时浓缩混合物，并在高真空下放置2小时，生成三肽胺的TFA盐。使粗胺盐溶于6mL DMF中，加入2-吗啉代乙酸(0.074g，0.507mmol)，然后加入DIEA(0.504g，0.68mL，3.90mmol)。在冰浴中将混合物冷却至0℃，加入PyBOP(0.32g，0.62mmol)，在一个氩气压下，搅拌反应液过夜，使之回升至室温。混合物用盐水(50mL)稀释，用乙酸乙酯萃取(5×20mL)。合并有机层，用饱和碳酸氢钠(5×15mL)和盐水(1×25mL)洗涤，经硫酸镁干燥。过滤去除硫酸镁，减压脱除挥发物得到酯中间体(0.195g)。在酯中间体(0.150g，0.23mmol)中先后加入Pd/C(0.05g)和5mL甲醇及乙酸乙酯(1∶1)的混合物，将混合物放置于一个氢气压下。2小时后，用一塞子硅藻土过滤内容物，真空浓缩得到(W)(0.12g)。

化合物6的合成

搅拌下，向(F)(见：Bioorg.Med.Chem.Letter 1999，9，2283-88)(1.3当量，0.27mmol，0.083mg)的甲腈(5mL)溶液中加入(W)(1当量，0.17mmol，0.10g)、DIEA(10当量，1.73mmol，0.30mL)和HOBT(1.6当量，0.27mmol，0.037mg)。在冰浴中将混合物冷却至0℃，分次加入PyBOP(1.6当量，0.27mmol，0.14g)。在一个氩气压下，5℃下搅拌混合物过夜。然后用饱和氯化钠稀释反应液，用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，浓缩成一团。将粗物质溶于最小量的甲醇中，缓慢加至迅速搅拌的0℃冷冻水(100mL)中，然后通过过滤分离得到化合物6(0.080g)。

方案7：实施例7的合成

(X)的合成

在NBoc亮氨酸(19.81g，85.67mmol，1.0当量)和苯丙氨酸苄酯(25.0g，85.67mmol，1.0当量)的甲腈(900mL)溶液中加入和DIEA(44.29g，60mL，342.68mmol，4.0当量)。在冰浴中将混合物冷却至0℃。向该混合物中加入HOBT(18.52g，137.08mmol，1.6当量)，然后在5分钟内分次加入PyBOP(71.33g，137.08mmol，1.6当量)。将反应液置于一个氩气压下，搅拌过夜。减压脱除挥发物，余下的物质被500mL乙酸乙酯吸收，用饱和碳酸氢钠、水和盐水洗涤，经硫酸镁干燥。过滤去除硫酸镁，减压除去挥发物，得到(X)。

(Y)的合成

在0℃冷却的70％TFA/DCM(150mL)溶液中加入(X)(25.0g，53.35mmol，1.0当量)。在2小时内，搅拌该溶液，并使之回升至室温，此时浓缩混合物，并在高度真空下放置2小时，生成二肽胺的TFA盐。在所得到的油中加入BocNHhPhe(14.68g，53.35mmol，1.0当量)、550mL甲腈和DIEA(27.58g，37.2mL，213.4mmol，4.0当量)，在冰浴中将混合物冷却至0℃。在冷却的混合物中加入HOBT(11.53g，85.36mmol，1.6当量)，然后在5分钟内分次加入PyBOP(44.42g，85.36mmol，1.6当量)。氩气下，将反应液放置过夜，使之回升至室温，此时形成白色沉淀物。冷却反应混合物，过滤收集固体，然后用冷的甲腈洗涤，得到(Y)(24.86g)。

(Z)的合成

将化合物(Y)(0.023mol，14.5g)与TFA/DCM(80％)混合，室温下搅拌1小时，此时浓缩混合物，并在高度真空下放置2小时，生成三肽胺的TFA盐。在TFA盐(0.023mol，1当量)的甲腈(120mL)溶液中，加入4-氯丁酰氯(1.2当量，0.028mol，0.32mL)和DIEA(4当量，0.092mol，16mL)。室温下搅拌混合物2小时，然后通过快速色谱浓缩和纯化，得到(Z)(8g)。

(AA)的合成

在(Z)(1当量，0.095mmol，60mg)的无水丙酮(8mL)溶液中加入碘化钠(5当量，0.47mmol，70.5mg)。在一个氮气压下，回流条件下搅拌混合物过夜。然后浓缩反应混合物至干，残渣用DCM吸收。有机层用水和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，浓缩得到黄色固体(AA)(50mg)。

(BB)的合成

在(AA)(30mg，0.041mmol)的THF(2mL)溶液中加入二甲胺(1.2当量，0.05mmol，2M THF溶液，25μL)和DIEA(1当量，0.041mmol，7.2μL)。室温下搅拌混合物过夜，浓缩至干。残渣用乙酸乙酯吸收，用水和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，浓缩得到油状产物。将粗酯溶于甲醇/乙酸乙酯(1∶1，10mL)中，加入Pd-C(5％，20mg)，在一个氢气压下，室温下搅拌反应混合物2小时。然后用氩气吹扫混合物，经硅藻土过滤，浓缩得到(BB)(21mg)。

化合物7的合成

搅拌下，向(F)(见：Bioorg.Med.Chem.Letter 1999，9，2283-88)(1.2当量，0.054mmol)的DMF(3mL)溶液中加入(BB)(1当量，0.045mmol，21mg)、DIEA(4当量，0.18mmol，31μL)和HOBT(1.6当量，0.072mmol，10mg)。在冰浴中将混合物冷却至0℃，分次加入PyBOP(1.6当量，0.072mmol，37mg)。然后在一个氮气压下，5℃下搅拌混合物过夜。反应液用饱和氯化钠稀释，用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，浓缩至油，该油经快速色谱纯化得到化合物7(16.7mg)(IC₅₀ 20S CT-L＜50nM，基于细胞的CT-L＜150nM)。

方案8：实施例8的合成

(CC)的合成

将化合物(Y)(1.55g，0.0023mol)溶于甲醇/乙酸乙酯(1∶1，40mL)中，加入Pd-C(5％，500mg)。在氢气下，室温下搅拌混合物2小时，然后经硅藻土过滤，浓缩得到羧酸中间体。搅拌下，向(F)(见：Bioorg.Med.Chem.Letter 1999，9，2283-88)(1.2当量，2.55mmol，436mg)的DMF(50mL)溶液中加入羧酸中间体(1当量，2.12mmol，1.24g)、DIEA(4当量，8.48mmol，1.5mL)和HOBT(1.6当量，3.39mmol，458mg)。在冰浴中将混合物冷却至0℃，分次加入PyBOP(1.6当量，3.39mmol，1.76g)。在一个氮气压下，5℃下搅拌混合物过夜。反应液用饱和氯化钠稀释，用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，浓缩至油，该油经快速色谱纯化得到(CC)(356mg)。

化合物8的合成

将化合物(CC)(23.6mg，0.034mmol)与TFA/DCM(80％)混合，室温下搅拌1小时，此时浓缩混合物，并在高度真空下放置2小时，生成四肽胺的TFA盐。在TFA盐的DCM溶液中加入1，3，5-三甲基-1-H-吡唑-4-磺酰氯(1.2当量，0.041mmol，8.5mg)和TEA(4当量，0.136mmol，26μL)，在室温下搅拌混合物过夜。浓缩粗品混合物至干，残渣用乙酸乙酯吸收。有机层用水和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，浓缩至油，该油经快速色谱纯化得到化合物8(2mg)(IC₅₀ 20S CT-L＜100nM，基于细胞的CT-L＜100nM)。

方案9：实施例9的合成

化合物9的合成

将化合物(CC)(63.7mg，0.092mmol)与TFA/DCM(80％)混合，室温下搅拌1小时，此时浓缩混合物，并在高度真空下放置2小时，生成四肽胺的TFA盐。在TFA盐的DCM溶液中加入异氰酸苯酯(1.5当量，0.14mmol，15μL)和DIEA(3当量，0.276mmol，50μL)，在室温下搅拌混合物过夜。浓缩粗品混合物至干，残渣用乙酸乙酯吸收。有机层用水和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，浓缩至油，该油经快速色谱纯化得到化合物9(2.8mg)。

方案10：实施例10的合成

化合物10的合成

将化合物(CC)(48.5mg，0.07mmol)与TFA/DCM(80％)混合，室温下搅拌1小时，此时浓缩混合物，并在高度真空下放置2小时，生成四肽胺的TFA盐。在TFA盐的DCM溶液中加入异硫氰酸苯酯(1.5当量，0.105mmol，20μL)和DIEA(3当量，0.21mmol，40μL)，在室温下搅拌混合物过夜。浓缩粗品混合物至干，残渣用乙酸乙酯吸收。有机层用水和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，浓缩至油，该油经快速色谱纯化得到化合物10(1mg)。

等同

本领域的熟练人员将认识到，或者仅仅使用常规试验就能够确定多种与这里所述化合物及其应用方法等同的化合物及方法。这种等同被认为落入本发明的范围内，并被后面的权利要求所覆盖。

上面引用的所有参考文献和出版物在这里整体引入作为参考。

Claims

1.一种具有式(I)结构的化合物或其药学上可接受的盐，

其中每个A独立选自C＝O、C＝S和SO₂；或

当与存在的Z相邻时，A任选为共价键；

L不存在或选自C＝O、C＝S和SO₂，优选L不存在或为C＝O；

M不存在或为C_1-12烷基；

Q不存在或选自O、NH和N-C_1-6烷基；

X选自O、NH和N-C_1-6烷基；

每个Z独立选自O、S、NH和N-C_1-6烷基；或

当与存在的A相邻时，Z任选为共价键；

R¹、R²、R³和R⁴各自独立选自C_1-6烷基、C_1-6羟烷基、C_1-6烷氧基烷基、芳基和C_1-6芳烷基，其中的任何基团任选地被一个或更多个酰胺、胺、羧酸(或其盐)、酯、硫醇或硫醚取代基取代；

R⁵为N(R⁶)LQR⁷；

R⁶选自氢、OH和C_1-6烷基；

R⁷选自氢、C_1-6烷基、C_1-6烯基、C_1-6炔基、芳基、C_1-6芳烷基、杂芳基、C_1-6杂芳烷基、R⁸ZAZ-C_1-8烷基-、R¹¹Z-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、R⁸ZAZ-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-(优选R⁸ZA-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-)、杂环基MZAZ-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-、(R¹⁰)₂N-C_1-12烷基-、(R¹⁰)₃N⁺-C_1-12烷基-、杂环基M-、碳环基M-、R¹¹SO₂C_1-8烷基-和R¹¹SO₂NH；或

R⁶和R⁷共同为C_1-6烷基-Y-C_1-6烷基、C_1-6烷基-ZAZ-C_1-6烷基、ZAZ-C_1-6烷基-ZAZ-C_1-6烷基、ZAZ-C_1-6烷基-ZAZ或C_1-6烷基-A，由此形成环；

R⁸和R⁹独立选自氢、金属阳离子、C_1-6烷基、C_1-6烯基、C_1-6炔基、芳基、杂芳基、C_1-6芳烷基和C_1-6杂芳烷基，优选选自氢、金属阳离子和C_1-6烷基，或R⁸和R⁹共同为C_1-6烷基，由此形成环；

每个R¹⁰独立选自氢和C_1-6烷基，优选为C_1-6烷基；以及

R¹¹独立选自氢、C_1-6烷基、C_1-6烯基、C_1-6炔基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基、C_1-6芳烷基和C_1-6杂芳烷基，条件是当R⁶为H或CH₃，且Q不存在时，LR⁷不是氢、未取代的C_1-6烷基C＝O、氨基酸的另一个链、叔丁氧羰基(Boc)、苯甲酰基(Bz)、芴-9-基甲氧羰基(Fmoc)、三苯基甲基(三苯甲基)、苄氧羰基(Cbz)、三氯乙氧羰基(Troc)或取代的或未取代的芳基或杂芳基；以及

2.权利要求1所述的化合物，其中R¹、R²、R³和R⁴独立选自C_1-6烷基和C_1-6芳烷基。

3.权利要求2所述的化合物，其中R¹和R³均为C_1-6芳烷基，且R²和R⁴均为C_1-6烷基。

4.权利要求3所述的化合物，其中X为O，R¹为2-苯乙基，R²为异丁基，R³为苯甲基，R⁴为异丁基。

5.权利要求4所述的化合物，其中L和Q不存在，且R⁶为C_1-6烷基。

6.权利要求5所述的化合物，其中R⁷选自C_1-6烷基、C_1-6烯基、C_1-6炔基、C_1-6芳烷基和C_1-6杂芳烷基。

7.权利要求6所述的化合物，其中R⁷是C_1-6烷基。

8.权利要求7所述的化合物，其中R⁷是丁基。

9.权利要求6所述的化合物，其中R⁷是C_1-6烯基。

10.权利要求9所述的化合物，其中R⁷是烯丙基。

11.权利要求6所述的化合物，其中R⁷是C_1-6炔基。

12.权利要求11所述的化合物，其中R⁷是炔丙基。

13.权利要求6所述的化合物，其中R⁷是C_1-6芳烷基。

14.权利要求13所述的化合物，其中R⁷是苯甲基。

15.权利要求6所述的化合物，其中R⁷是C_1-6杂芳烷基。

16.权利要求15所述的化合物，其中R⁷选自2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基。

17.权利要求4所述的化合物，其中Q不存在，L为SO₂。

18.权利要求17所述的化合物，其中R⁷选自C_1-6烷基和C_1-6芳烷基。

19.权利要求18所述的化合物，其中R⁷为C_1-6烷基。

20.权利要求19所述的化合物，其中R⁷为甲基。

21.权利要求18所述的化合物，其中R⁷为C_1-6芳烷基。

22.权利要求21所述的化合物，其中R⁷为苯基。

23.权利要求4所述的化合物，其中L为C＝O。

24.权利要求23所述的化合物，其中R⁷选自氢、C_1-6烷基、C_1-6烯基、C_1-6炔基、芳基、C_1-6芳烷基、杂芳基、C_1-6杂芳烷基、R⁸ZA-C_1-8烷基-、R¹¹Z-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-Z-C_1-8烷基-、R⁸ZA-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、杂环基MZAZ-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-、(R¹⁰)₂N-C_1-8烷基-、(R¹⁰)₃N⁺-C_1-8烷基-、杂环基M-、碳环基M-、R¹¹SO₂C_1-8烷基-和R¹¹SO₂NH；或

R⁶和R⁷共同为C_1-6烷基-Y-C_1-6烷基、C_1-6烷基-ZA-C_1-6烷基、A-C_1-6烷基-ZA-C_1-6烷基、A-C_1-6烷基-A或C_1-6烷基-A，由此形成环；

且Z和A的每个存在是独立的，不为共价键。

25.权利要求24所述的化合物，其中Q不存在。

26.权利要求25所述的化合物，其中R⁶和R⁷为C_1-6烷基。

27.权利要求26所述的化合物，其中R⁷选自乙基、异丙基、2，2，2-三氟乙基和2-(甲磺酰基)乙基。

28.权利要求25所述的化合物，其中R⁷为C_1-6芳烷基。

29.权利要求28所述的化合物，其中R⁷选自2-苯乙基、苯甲基、(4-甲氧苯基)甲基、(4-氯苯基)甲基和(4-氟苯基)甲基。

30.权利要求25所述的化合物，其中R⁶为C_1-6烷基，R⁷为芳基。

31.权利要求30所述的化合物，其中R⁷为取代的或未取代的苯基。

32.权利要求24所述的化合物，其中Q不存在或O，R⁷为碳环M-。

33.权利要求32所述的化合物，其中碳环为环丙基或环己基。

34.权利要求25所述的化合物，其中R⁷选自R⁸ZA-C_1-8烷基-、R¹¹Z-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-Z-C_1-8烷基-、R⁸ZA-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、杂环基MZAZ-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-、A为C ＝O，Z为O或NH。

35.权利要求34所述的化合物，其中Z为O。

36.权利要求35所述的化合物，其中R⁷为杂环基MZAZ-C_1-8烷基-，且杂环基为氧代二氧杂环戊烯基或N(R¹²)(R¹³)，其中R¹²和R¹³共同为C_1-6烷基-Y-C_1-6烷基，由此形成环。

37.权利要求36所述的化合物，其中R⁷选自(R¹⁰)₂N-C_1-8烷基-和(R¹⁰)₃N⁺(CH₂)_n-，R₁₀为C_1-6烷基。

38.权利要求25所述的化合物，其中R⁷选自杂环基M-，杂环基选自吗啉代、哌啶子基、哌嗪子基、吡咯烷子基。

39.权利要求24所述的化合物，其中Q为O或NH。

40.权利要求39所述的化合物，其中R⁶为C_1-6烷基，R⁷选自C_1-6烷基、C_1-6芳烷基和C_1-6杂芳烷基。

41.权利要求40所述的化合物，其中R⁷选自甲基、乙基、异丙基、苯甲基和(4-吡啶基)甲基。

42.权利要求24所述的化合物，其中R⁶和R⁷共同为C_1-6烷基-Y-C_1- ₆烷基、C_1-6烷基-ZA-C_1-6烷基或C_1-6烷基-A，由此形成环。

43.权利要求42所述的化合物，其中L为C＝O，Q和Y不存在，R⁶和R⁷共同为C_1-3烷基-Y-C_1-3烷基。

44.权利要求42所述的化合物，其中L和Q不存在，R⁶和R⁷共同为C_1-3烷基-Y-C_1-3烷基。

45.权利要求42所述的化合物，其中L为C＝O，Q不存在，Y选自NH和N-C_1-6烷基，R⁶和R⁷共同为C_1-3烷基-Y-C_1-3烷基。

46.权利要求42所述的化合物，其中L为C＝O，Y不存在，R⁶和R⁷共同为C_1-3烷基-Y-C_1-3烷基。

47.权利要求42所述的化合物，其中L和A为C＝O，R⁶和R⁷共同为C_1-2烷基-ZA-C_1-2烷基。

48.权利要求42所述的化合物，其中L和A为C＝O，R⁶和R⁷共同为C_2-3烷基-A。

49.具有式II结构的化合物或其药学上可接受的盐，

其中每个A独立选自C＝O、C＝S和SO₂；或

当与存在的Z相邻时，A任选为共价键；

L不存在或选自C＝O、C＝S和SO₂；

M不存在或为C_1-12烷基；

Q不存在或选自O、NH和N-C_1-6烷基；

X选自O、NH和N-C_1-6烷基；

每个Z独立选自O、S、NH和N-C_1-6烷基；或

当与存在的A相邻时，Z任选为共价键；

R²和R⁴各自独立选自C_1-6烷基、C_1-6羟烷基、C_1-6烷氧基烷基、芳基和C_1-6芳烷基，其中的任何基团任选地被一个或更多个酰胺、胺、羧酸(或其盐)、酯、硫醇或硫醚取代基取代；

R⁵为N(R⁶)LQR⁷；

R⁶选自氢、OH和C_1-6烷基；

R⁷选自氢、C_1-6烷基、C_1-6烯基、C_1-6炔基、芳基、C_1-6芳烷基、杂芳基、C_1-6杂芳烷基、R⁸ZAZ-C_1-8烷基-、R¹¹Z-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、R⁸ZAZ-C_1-8烷基-ZAZ-C_1-8烷基-、杂环基MZAZ-C_1-8烷基-、(R⁸O)(R⁹O)P(＝O)O-C_1-8烷基-、(R¹⁰)₂N-C_1-12烷基-、(R¹⁰)₃N⁺-C_1-12烷基-、杂环基M-、碳环基M-、R¹¹SO₂C_1-8烷基-和R¹¹SO₂NH；或

R⁶和R⁷共同为C_1-6烷基-Y-C_1-6烷基、C_1-6烷基-ZAZ-C_1-6烷基、ZAZ-C_1-6烷基-ZAZ-C_1-6烷基、ZAZ-C_1-6烷基-ZAZ或C_1-6烷基-A；

每个R¹⁰独立选自氢和C_1-6烷基，优选为C_1-6烷基；以及

R¹¹独立选自氢、C_1-6烷基、C_1-6烯基、C_1-6炔基、碳环基、杂环基、芳基、杂芳基、C_1-6芳烷基和C_1-6杂芳烷基，条件是当R⁶为H或CH₃，且Q不存在时，LR⁷不为氢、未取代的C_1-6烷基C＝O、氨基酸的另一个链、叔丁氧羰基(Boc)、苯甲酰基(Bz)、芴-9-基甲氧羰基(Fmoc)、三苯基甲基(三苯甲基)、苄氧羰基(Cbz)、三氯乙氧羰基(Troc)；或取代的或未取代的芳基或杂芳基；以及

50.具有式(III)结构的化合物或其药学上可接受的盐，

其中X为O、NH或N-烷基，优选为O；

R¹、R²、R³和R⁴独立选自氢和式IV的基团，限制条件为R¹、R²、R³和R⁴中至少一个为式IV的基团；

R⁵、R⁶、R⁷和R⁸独立选自C_1-6烷基、C_1-6羟烷基、C_1-6烷氧基烷基、芳基和C_1-6芳烷基，其中每个基团任选地被选自酰胺、胺、羧酸或其药学上可接受的盐、羧酸酯、硫醇或硫醚的基团取代；

R⁹为氨基酸的另一个链、氢、C_1-6酰基、保护基、取代的或未取代的芳基、或取代的或未取代的杂芳基，其中取代基包括卤素、羰基、硝基、羟基、芳基和C_1-5烷基；

R¹⁰和R¹¹独立选自氢和C_1-6烷基，或R¹⁰和R¹¹一起形成3-6元的碳环或杂环；

L不存在或选自-CO₂或-C(＝S)O。

51.一种药物组合物，包括权利要求1或50所述的化合物和药学上可接受的载体。

52.一种抑制N-端亲核水解酶的方法，包括给予治疗有效量的权利要求1所述的化合物。

53.一种治疗炎症的方法，包括给予治疗有效量的权利要求1所述的化合物。

54.一种抑制或减轻HIV感染的方法，包括给予治疗有效量的权利要求1所述的化合物。

55.一种治疗神经变性疾病的方法，包括给予治疗有效量的权利要求1所述的化合物。

56.一种治疗肌肉萎缩病的方法，包括给予治疗有效量的权利要求1所述的化合物。

57.一种治疗癌症的方法，包括给予治疗有效量的权利要求1所述的化合物。

58.一种治疗慢性传染病的方法，包括给予治疗有效量的权利要求1所述的化合物。

59.一种治疗发热的方法，包括给予治疗有效量的权利要求1所述的化合物。

60.一种治疗免疫相关性病症的方法，包括给予治疗有效量的权利要求1所述的化合物。

61.一种治疗去神经或神经损伤的方法，包括给予治疗有效量的权利要求1所述的化合物。

62.一种影响个体中病毒基因表达水平的方法，包括给予治疗有效量的权利要求1所述的化合物。

63.一种改变生物体中蛋白酶体产生的抗原肽品种的方法，包括给予治疗有效量的权利要求1所述的化合物。