CN1321200A - 用于抽血的容器 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种含有包括胍鎓盐,缓冲物质,还原剂和/或去污剂的溶液的用于血液采样的容器。该容器特别在用于检测核酸的血液取样。

Description

用于抽血的容器
本发明涉及用于抽血的容器，抽取的血液应该特别用于稳定和分析核酸。
当抽取血液时，通常收集在已经含有抗凝剂例如肝素，柠檬酸盐或EDTA的容器中。从而防止血液凝结。这样获得的血液样品可以在合适的温度下贮存很长时间。但是当要分析核酸例如(m)RNA或DNA时，这种获得血液的方法具有很大的缺陷。为了这样的目的，应该在抽取时就已经最适当地将样品中含有的核酸稳定化了，就是即应该防止存在的核酸的降解也要防止新的mRNA的合成。
实际上还没有实现自抽取时样品材料中含有的核酸的稳定贮存目的是由于下面的原因：
细胞含有核酸酶，酶，它们一旦接触它们的底物就破坏核酸(RNA,DNA)。只要细胞处于它们正常的环境中，则细胞和细胞外核酸酶一般处于生理调控下。抽取血液更强或更弱地影响细胞中含有的核酸的变化。然后细胞内释放核酸酶和/或通过细胞裂解至胞外。此外，更强或更弱地合成核酸。特别是血液的长期贮存导致细胞的老化和破坏。
根据标准抽血方法获得的血液样品长期贮存产生的另一个问题是样品材料的相当大的变化。这样的变化，例如细胞的强烈裂解，可能具有一定作用使得分离核酸的标准方法在足够地有效的方法中不再有效。
除了有关样品材料中含有的核酸的稳定贮存的问题外，抽血的常规方法中还有其它困难。在分离核酸期间，常规的抗凝剂通常不会足够有效地被分离并且干扰下面的核酸分析，例如在利用PCR(聚合酶链反应)的扩增的情况下。例如肝素是一种普遍公知的PCR的抑制剂。
最后，核酸定量分析产生的问题，即从取样至核酸的测定的全部方法怎样在标准化条件下可以控制。理想的是，定性和定量确定的标准核酸应该在抽取期间就已经被加入到样品材料中了并且应该使进行取样和测定的整个过程。这也可以使用常规抽取系统来完成。
常规抽血的另一个缺陷是有转移感染材料的危险，因为迄今为止分离核酸需要人工处理步骤。不能排除与潜在的感染病菌接触。
在文献中描述了一种方法，其中血液样品在从患者抽取后直接与胍鎓盐混合(EP0818542A1)。在该方法中，胍鎓盐以粉末形式存在从而发挥胍鎓盐的增强的稳定性。但是该方法具有严重的缺陷，因为该盐例如必须首先溶解于加入的血液中。该溶解方法特别取决于温度并且因为使用了不透明的样品材料而不能控制。因此用于诊断医学目的的相应的产物的使用是非常有问题的。
此外，核酸酶是极具活性的酶，其只有在极端变性条件下才可能被抑制。变性取决于溶液中胍鎓盐的浓度。溶液中胍鎓盐的抑制浓度在一开始引述的方法中并不存在。因此，在溶解过程中存在不可控制的核酸的降解。此外，在该方法中省去了加入还原剂，没有还原剂不会保证有效的抑制作用，特别是RNA酶的抑制作用(参见实施例5)。
此外，用这种方法制备的样品不能直接用于在玻璃表面上进一步的核酸分离。此外，胍鎓盐粉末的使用不允许加入核酸内标物。这样的标准物对于工艺控制和精确定量分析是必须的。
本发明以提供不具有现有技术缺陷的抽血用容器的技术问题为基础。特别地，可以使用该容器取出的样品直接进行用于分析核酸的标准方法而不需要进一步的样品制备步骤。
根据本发明，通过用于抽血的容器解决该问题，所述容器含有包括下面成分的水溶液：-胍鎓盐(guanidinium salt)；-缓冲物质；-还原剂；和/或-去污剂。
本发明的容器具有下面的优点：1．在抽取时血液已经溶解，抽血容器中已经含有在溶液中的稳定核酸的物质。2．该稳定核酸的物质的组成使得样品材料特别是其中含有的核酸在接触该溶液时直接被稳定化。3．与所有的以前的标准抽血系统例如含有EDTA或肝素的抽血系统相反，经稳定的样品不再需要当作传染性材料来处理。4．该稳定核酸的物质的组成使得样品材料可以直接在下面的分离方法中使用。5．在下面的分离中可以如此有效地分离该稳定核酸的物质使得没有发现PCR的抑制作用。6．可以将内标物加入该稳定核酸的物质。这允许从取样开始至检测核酸时止控制整个方法。
第1项中提到的抽血容器是常规的抽血容器(小试管)，其中加入了一定体积的稳定核酸的物质。然后优选地将该小试管设定一定的真空度，这保证只有特定体积的血液可以在抽血期间流入其中。可以通过常规的取血方法控制小试管。在一个特别优选的实施方案中，该试管中含有的溶液含有下面的试剂：硫氰酸胍，Triton-X-100，二硫苏糖醇和合适的缓冲系统，例如柠檬酸盐，Tris或HEPES。在描述的组合物中，该溶液与真空试管可相容。该溶液可以贮存在该真空试管中没有任何问题并且没有任何期望的稳定功能的破坏。整个系统不存在问题，特别是对于供血者不存在问题，并且在取样期间是安全的。
含有胍鎓盐，缓冲物质，还原剂和/或去污剂的溶液在贮存时是稳定的并且将供应的刚抽取的血液转化为在贮存时也稳定的物质并且可以直接用于标准核酸分析试剂盒(例如Roche或Qiagen的那些试剂盒)。
硫氰酸胍和/或氯化胍优选作为胍鎓盐。
优选地，胍鎓盐以2.0至8.0M的浓度存在。Tris或柠檬酸盐优选作为缓冲物质，优选用HCl调节精确的pH。然而，其它可能的缓冲液是HEPES,MOPS，柠檬酸盐和磷酸盐缓冲液，例如PBS。
缓冲液浓度优选在10和300mM之间，特别优选在10和100mM之间。
Triton-X-100优选作为去污剂。其它可能的去污剂是NP-40,Tween 20,polydocanol或者其它去污剂。
去污剂浓度优选是5-30％(w/v)，特别优选是10-20％(w/v)。
DTT优选作为还原剂，但是也可以使用β-巯基乙醇，TCEP(三(2-羧乙基)膦)或者其它还原剂。
还原剂优选的浓度是0.1-10％(w/v)，特别优选是0.5-2％(w/v)。
溶液的pH优选是3.0-9.0，特别优选是4.0-7.5，特别优选是5-6。
特别选择溶液的pH使得在加入样品材料后pH范围是5.0-7.6。特别优选的是6.3-6.9之间的pH(参见实施例8)。
特别优选的溶液优选含有4M硫氰酸胍，45mM Tris/HCl,18％，优选15％(w/v)Triton-X-100,0.8％(w/v)DTT并且具有6.0的pH。
在另一个优选的实施方案中，接收血液样品的体积具有负压，其可以被调节使得将先前确定的血液体积在血液容器被穿孔后吸到容器中。相应地，真空的容器在市场上是可购得的。
然后可以使含有抽取的血液的容器立刻进行进一步的分析，或者，可以贮存很长时间(多达几天)而没有任何样品品质的不利因素。
在本发明的方法中，新采取的血液在抽血容器中直接与上述溶液接触使得立刻终止可能改变样品的核酸模式的所有过程。因此，在稍后时间测定的关于测定的核酸的数据非常精确地代表抽血时的实际状态，即关于核酸的量和类型两者。
优选地，采取的血液的量是加入到容器中的溶液的0.1-4倍。所述溶液优选是0.5-5.0ml。因此，加入血液后胍鎓盐的终浓度是1.0-5M，优选是1-3M，特别优选是2-3M(参见实施例7)。
根据本发明的容器优选用于当血液样品要用来分析核酸时的血液抽取。
上述溶液作为描述的抽血系统的成分的用途只是保证细胞的立刻溶解，同时通过立刻灭火核酸酶而稳定样品。令人惊奇的是，这样获得的血液样品甚至在室温下或者更高温度下也可以贮存几天。此外，该抽血系统保证在通过核酸分离至分析的样品处理中没有污染和非传染性处理。在常规的核酸分离方法中，目前还要求另外的处理步骤(例如将采取的血液样品转移到用于核酸分离的试剂中等等)，这必然伴有另外的感染的危险。
用该抽血系统获得的样品与所有的常规标准核酸分离方法相匹配。这里应该特别注意以核酸结合玻璃表面为基础的方法，以及特定序列与互补核酸结合和以溶剂为基础的提取方法。
因此，描述的本发明包括一种抽血系统，表达其满足下面的条件。1．控制取样并且同时稳定样品材料中含有的核酸(DNA,RNA)。2．取样，其中可以完全省略使用抗凝剂。3．利用上述抽血系统获得的样品可以用于所有的用于分离核酸的公知的系统中的通用的方式。4．该抽血系统在贮存中是稳定的。
另外，出人意料地发现利用描述的抽血系统获得的样品可以在容器中贮存很长时间而没有核酸的降解(参见实施例2,3,7,8)。
下面的实施例将解释本发明：
实施例1：
在优选的实施方案中，所述抽血系统可以包括如下(见图1)：装有一定体积的稳定核酸的物质的小试管，并且提供有一定的真空度，并且用隔膜密封。制备该隔膜使得其与标准的取样附件(插管等)相匹配。在本实施例中提供2.2ml试剂，调节真空度使得精确地2.2ml血液可以在取样期间流入。流动的血液中含有的核酸立刻转化为稳定形式。
关于下面的实施例的一般的初步说明。
在下面描述的所有的实施例中，除非另有说明，稳定核酸的物质(N-sS)具有下面的成分：
45mM Tris,5M硫氰酸胍(GTC),0.8％(w/v)二硫苏糖醇(DTT),18％(w/v)Triton-X-100,pH6.0。
在描述的所有的实施例中，除非另有说明，所述稳定核酸的物质与样品以1∶1的比例(1体积N-sS加1体积样品材料)混合。低浓度的N-sS，例如1体积N-sS加5体积样品，可以影响RNA的降解。
对于所有的实施例，通过在抽血时直接将血液加入混合有N-sS的小试管中来稳定血液。
实施例2：
混合样品材料和N-sS后核酸的稳定性。用二氧化硅衍生化表面从样品裂解物中分离RNA和DNA。
材料和方法：
抽血后直接使用，4℃下贮存6天后使用，和-20℃下贮存1个月后使用用于DNA和RNA分离的样品材料。
使用高纯度RNA分离试剂盒(BoehringerMannheim,cat.no.1828665)来分离RNA(图2)。如下改变包装散页中给出的说明书：以600微升一份分4等份向柱子加入2.4ml体积的样品裂解物，使得总共提供2.4ml裂解物的样品材料。所有其它步骤根据包装散页进行。最后用100微升洗脱缓冲液洗脱RNA。
对于分离DNA(图3)，使用了QiaAmp Blood Kit(Qiagencat.no.29104)。在几点上改变了包装散页中描述的标准程序：将400微升样品直接加给柱子；没有使用试剂盒中含有的结合试剂。加入25微升蛋白酶-K母液，并且该样品在室温下温育10分钟。接着，将该柱子放到收集容器中并且根据包装散页所述离心。所有其它步骤根据包装散页进行，除了使用乙醇。洗脱体积是200微升。
实施例3：
使用包被链霉抗生物素的磁性颗粒和生物素标记的寡脱氧胸苷酸(Oligocdt)从样品裂解物分离mRNA(图4)：
材料和方法：
向容器中加入20ml样品裂解物。根据下面的方法分离mRNA：首先向裂解物加入30ml杂交缓冲液(20mM Tris-HCl,300mM NaCl,6nM生物素标记的寡脱氧胸苷酸，pH7.4)。然后加入3mg链霉抗生物素磁性颗粒(Boehringer Mannheim)。混合该样品并且在室温下温育5分钟。借助于磁体分离磁性颗粒；弃除上清液。然后将颗粒再悬浮于洗涤缓冲液1(10mM Tris-HCl,200mM NaCl,1％Triton-X-100,pH7.5)并且用洗涤缓冲液2(10mM Tris-HCl,200mM NaCl,pH7.5)洗涤三次(洗涤步骤：再悬浮，磁性分离，去除上清液)。最后洗涤步骤之后完全去除上清液，并且颗粒再悬浮于20微升蒸馏水中。样品被加热到70℃维持5分钟。分离磁性颗粒，利用凝胶电泳分析含有mRNA的上清液。
实施例4：
利用修改的根据Chomczynski和Sacchi的规则(分析生物化学162,156-159(1987))分离DNA和RNA(以溶剂萃取为基础的方法的实施例)(图5)：
材料和方法：
从抽血容器转移2ml样品体积到小试管中。然后加入0.2ml 2M乙酸钠溶液，pH4,2ml苯酚(水饱和的)和0.4ml氯仿-异戊醇混合物(49∶1)，加入各溶液后充分混合该样品。将该完全溶液剧烈振荡10秒钟并且在冰上温育15分钟。该样品在4℃下以10000g离心20分钟。离心后RNA在水相中；DNA和蛋白质在界面和苯酚相中。将水相转移到新的容器中并且与1ml异丙醇混合。为了沉淀RNA，将该样品在-20℃贮存1小时。在4℃下以10000g再次离心之后沉积出RNA。将该沉积物再次悬浮于0.3ml缓冲液(4M硫氰酸胍，25mM柠檬酸钠，pH7.0,0.5％十二烷基肌氨酸钠，0.1M2-巯基异丙醇)，转移到新的1.5ml Eppendorf容器中并且与1体积的异丙醇混合。在-20℃下温育1小时后，在Eppendorf离心机中在4℃下将溶液离心10分钟。将RNA沉积物回收到75％乙醇中并且通过离心(Speed vac)浓缩并干燥。对于进一步处理，将样品溶解于100微升10mM Tris-HCl,pH6.5。
实施例5
还原剂(例如DTT)在用于RNA的长期稳定性的稳定溶液中的重要性
材料和方法：
使用的稳定溶液：4.0M GTC；13.5％Triton X100；45mM Tris/HCl；有或没有120mM DTT。700微升的血清与700微升的稳定溶液混合。温育2分钟后加入20微升MS2-RNA(0.8微克/微升的Roche)。该样品在40℃温度下温育180分钟，然后以400微升一等份用Roche高纯度总RNA试剂盒处理。一步将样品施加给柱子而不加入试剂盒的结合剂并且根据说明进行离心。根据说明进行下面的洗涤步骤和在50微升洗脱缓冲液中洗脱RNA。
利用琼脂糖凝胶进行分析(见图6)。
结果：不向稳定溶液中加入还原剂不能实现RNA的长期稳定。
实施例6：
血清中游离的MS2-RNA的稳定性。样品成分对RNA降解的动力学
材料和方法：
使用10微升MS2-RNA(0.8微克/微升，Roche)添加(spike)250微升血清并且在室温下温育。加入RNA后立即，2分钟至50分钟之后，通过加入250微升稳定溶液终止血清中的自然RNA降解。所有批次的样品分析两次。作为标准物，在向血清加入稳定溶液后一个样品只与MS2-RNA混合并且平行处理。
用Roche高纯度病毒RNA试剂盒平行处理所有的样品。一步将样品加给柱子而不加入试剂盒的结合剂并且根据说明书离心。根据说明书进行下面的洗涤步骤并且在50微升洗脱缓冲液中洗脱RNA。
利用1.2％天然琼脂糖凝胶分离20微升的洗出液并且分析(见图7)。
结果：MS2-RNA在血清中不稳定。向血清中加入RNA之后2分钟，RNA完全降解。通过以1∶1的比例向血清中加入稳定溶液可以立即终止该过程，并且在加入稳定溶液时(=抽血)可以实现RNA的稳定作用。
实施例7：
血清/稳定溶液中MS2-RNA的稳定性。取决于GTC浓度
材料和方法
使用的稳定溶液：3-5M GTC；13.5％Triton X100；50mM DTT；42mMTris/HCl；
溶液的pH：大约4.0
加入血清后溶液的pH：大约6.7。
2ml血清与2.5ml的各稳定溶液混合。温育2-5分钟后加入90微升MS2-RNA(0.8微克/微升，Roche)并且在40℃下温育。以有规律的间隔取400微升样品并且根据实施例5用Roche高纯度总RNA试剂盒平行处理。洗脱出50微升样品并且在-20℃下冷冻。对于RNA完整性分析，将20微升洗出液施加给1.5％琼脂糖凝胶(见图8)。
对于样品的PCR分析，利用AMV-RT(Roche)逆转录10微升洗出液并且接着利用Lightcycler上的PCR进行分析：
RT批：      4.0微升    AMV-RT缓冲液(42℃,1小时)    2.0微升    dNTP’s(终浓度10mM)
            0.5微升    RNA酶抑制剂(Roche,20单位)
            1.0微升    引物2827(终浓度1μM)
            1.9微升    DMPC水
            0.6微升    AMV-RT(Roche,15单位)
            10微升     模板RNA
          ∑20微升
使用SYBR-Green作为检测系统在61℃退火温度下在Lightcycler上进行PCR。PCR的批：
1.6微升    氯化镁(分批溶液25mM)
5.9微升    DMPC水
0.25微升   引物2827(分批溶液20mM)
0.25微升   引物2335(分批溶液20mM)
1.0微升    SYBR-Green-Mastermix(Roche)
1.0微升    RT批次(1∶50稀释)Σ10微升
PCR扩增产物完全施加于2％琼脂糖凝胶(见图9)。
结果：
40℃3天后的RNA完整性。
图8中的琼脂糖凝胶表示40℃温育3天后20微升洗脱的MS2-RNA。该时期后，根据GTC含量可以得出RNA完整性的显著差异。因此，血清/稳定溶液中小于2M的盐含量有利于RNA的完整性。
40℃8天后RNA的扩增性。
尽管已经检测到40℃3天后RNA开始降解，40℃温育8天后所有的RNA样品可能扩增并且被清楚地检测。
PCR的扩增产物完全施加给2％的琼脂糖凝胶(见图9)。
实施例8
血清/稳定溶液中MS2-RNA的稳定性。取决于与稳定溶液混合的样品的pH
材料和方法
使用的溶液：4M(5M)    GTC
            14.4％    Triton X100
            50mM      DTT
            45mM      Tris/HCl
加入血清后的pH在6.7和8.0之间
2.5ml稳定溶液与2.0ml血清混合。加入90微升MS2-RNA(0.8微克/微升，Roche)之后在室温下培养样品。根据实施例6使用Roche病毒RNA试剂盒以有规律间隔处理来自500微升样品中的RNA并且在50微升洗脱缓冲液中分离。利用琼脂糖凝胶分析20微升洗出液(见图10)。
结果：
血清/稳定溶液的pH以及稳定溶液的pH和缓冲液范围对于RNA的长期稳定性是决定性的。在pH8.0下2天后已经不再能检测到完整RNA，而室温下温育13天后在6.6和7.0之间的pH范围内仍然可检测到完整的RNA。
然而，除了pH外，优化调节的GTC浓度对于RNA的长期稳定性也是重要的(也见实施例7)。例举的实施例证明2.2M GTC的稳定样品中的GTC终浓度对于RNA的长期稳定性比2.78更好。
附图说明图1：含有N-Ss，确定的真空，用隔膜密封的取样容器。图2：在取样容器中贮存不同时间的RNA的凝胶分析(1％琼脂糖)。1柱：取样后直接分离(没有贮存)，2柱：在-20℃下贮存一个月，3柱：在4℃下贮存6天。施加的RNA量相当于120微升血液体积。图3：在取样容器中贮存不同时间的DNA的凝胶分析(1％琼脂糖)。1柱：取样后直接分离(没有贮存)，2柱：在-20℃下贮存一个月，3柱：在4℃下贮存6天。施加的RNA量相当于10微升血液体积。图4：从10ml血液中分离的mRNA的凝胶分析(1％琼脂糖)(2柱)。分子量标记(1柱)。除了mRNA外，可见rRNA泳带。泳带边界清晰的形状证明核酸的完整性。图5：从120微升血液中分离的RNA的凝胶分析(1％琼脂糖)。图6：有/没有DTT下在40℃下在血清/稳定溶液中温育180分钟后分离的MS2-RNA的凝胶分析。1柱：正对照：MS2-RNA,2柱：DNA标记，3,4,5柱：与含有DTT的稳定溶液温育之后的MS2-RNA,6,7,8柱：与没有DTT的稳定溶液温育之后的MS2-RNA。图7：在血清中温育0-50分钟后分离的MS2-RNA的凝胶分析。10,17柱：MS2-RNA标准物，9,16柱：DNA标记，7,8柱：温育0分钟，5,6柱：温育2分钟，3,4柱：温育5分钟，1,2柱：温育10分钟，11,12柱：温育15分钟，13,14柱：温育30分钟，15柱：温育50分钟。图8：在40℃下在血清/稳定溶液中温育3天后分离的MS2-RNA的凝胶分析。相应的柱中指示其中温育相关的RNA样品的加入血清后的稳定溶液的GTC含量。1柱：2.70M GTC,2柱：2.5M GTC,3柱：2.36M GTC,4柱：2.20M GTC,5柱：2.08M GTC,6柱：1.94M GTC,7柱：1.80M GTC,8柱：1.66M GTC。图9：在40℃下在血清/稳定溶液中分别温育1天和8天之后分离的MS2-RNA的PCR扩增产物的凝胶分析。1柱：1天后分离的RNA的扩增产物，2柱：8天后分离的RNA的扩增产物，3柱：DNA标记，4柱：MS2-RNA正对照：10微升RT中0.8微克，1∶50稀释的1微升的扩增。图10：室温下在血清/稳定溶液中分别温育6天(2-12柱)和13天(14-19柱)之后分离的MS2-RNA的凝胶分析。相应的柱后面写明了血清和稳定溶液混合后获得的pH。1,13,20柱：DNA标记，2柱：pH8.0,3柱：pH7.7,4柱：pH7.5,5柱：pH7.35,6柱：pH7.18,7,14柱：pH7.07,8,15柱：pH6.94,9,16柱：pH6.8,10,17柱：pH6.72,11,18柱：pH6.68和12,19柱：pH6.7。12,19柱中RNA的稳定溶液具有和11柱中RNA的相同的pH，但是含有5m GTC而不是4M。

Claims (23)

1．一种用于抽血的容器，含有具有下面成分的水溶液：
-胍鎓盐；
-缓冲物质；
-还原剂；和/或
-去污剂。
2．根据权利要求1的容器，特征在于胍鎓盐选自硫氰酸胍鎓和氯化胍鎓。
3．根据权利要求1或2任一项的容器，特征在于胍鎓盐以1-8.0M的浓度存在，优选2.5-8.0M。
4．根据权利要求1-3任一项的容器，特征在于缓冲物质选自Tris,HEPES,MOPS，柠檬酸盐和磷酸盐缓冲液。
5．根据权利要求1-4任一项的容器，特征在于缓冲物质以10-300mM的浓度存在。
6．根据权利要求1-5任一项的容器，特征在于去污剂选自Triton-X-100,NP-40,polydocanol和Tween20。
7．根据权利要求1-6任一项的容器，特征在于去污剂以5-30％重量的浓度存在。
8．根据权利要求1-7任一项的容器，特征在于还原剂选自二硫苏糖醇，β-巯基乙醇和TCEP。
9．根据权利要求1-8任一项的容器，特征在于还原剂以0.1-10％重量的浓度存在。
10．根据权利要求1-9任一项的容器，特征在于所述溶液的pH在4.0和7.5之间，优选在4.0和6.5之间。
11．根据权利要求1-10任一项的容器，特征在于所述溶液含有下面的成分：
-4m硫氰酸胍鎓；
-45mM Tris/HCl；
-15％(w/v)Triton-X-100；
-0.8％(w/v)DTT，
其中pH是6.0。
12．根据权利要求1-11任一项的容器，特征在于其用来接收血液的腔中具有真空度。
13．根据权利要求1-12任一项的容器，特征在于其含有抽出的血液。
14．一种抽血方法，包括直接将血液导入根据权利要求1-13任一项的容器的步骤。
15．根据权利要求14的方法，特征在于抽取的血液量是容器中溶液体积的0.1至4倍。
16．根据权利要求15的方法，特征在于供血后胍鎓盐的终浓度在1.0M和5M之间，优选1.5和5M之间。
17．一种稳定和/或从血液中分离核酸的方法，包括将血液导入根据权利要求1-13任一项的容器中的步骤，并且任选地，使用常规方法分离核酸。
18．根据权利要求14的方法，特征在于调节溶液的pH使得加入样品材料之后获得4.0和7.5之间的pH。
19．根据权利要求1-13任一项的容器用于抽血，优选从人抽血的用途。
20．容器中含有胍鎓盐，缓冲物质，去污剂和/或还原剂的溶液用于抽血的用途。
21．通过将全血引入根据权利要求1-13任一项的容器中获得的稳定化的血液样品。
22．根据权利要求21的血液样品，特征在于其具有4.0-7.5，优选6.6-7.0的pH。
23．根据权利要求21或22的血液样品，特征在于其从人血液产生。
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