CN1522114A - 禽类加工中的微生物控制 - Google Patents

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Abstract

在禽类加工中，将此类加工中使用的设备、仪器、装置和/或水，以及/或者由禽类加工得到的禽的畜体和/或部分用某些卤素基杀微生物剂，特别是某些溴基杀微生物剂的水溶液消毒。描述了使用的特定杀微生物剂以及在某些情况下以浓溶液形式和在其它情况下以稀溶液形式使用这类物质的主要优点。

Description

禽类加工中的微生物控制
背景技术
禽类加工是其中微生物控制至关重要的领域。基于有关的加工性质，存在着许多禽类与各种病原体接触的机会，所述病原体是可移动细菌，例如大肠杆菌(Escherichia coli)、肠炎沙门氏菌(Salmonellaenteritidis)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurim)、空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)、结肠弯曲杆菌(Campylobacter coli)、红嘴鸥弯曲杆菌(Campylobacter lari)以及生物膜形式的病原体，例如单核细胞增多性李斯特杆菌(Listeria monocytogenes)、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)、屎肠球菌(Enterococcus faecium)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)。据认为处理、加工和消除细菌感染的禽类是非常令人讨厌的。
因此，有人建议将某些氯基杀微生物剂尝试用于提供与禽类加工有关的适当卫生环境。不巧地是，虽然某些氯基杀微生物剂显示出一些效果，但它们具有多种严重缺点。其一是它们不如期望的那样有效。第二，它们易于产生臭味并且在许多情况下可对禽类畜体产生漂白作用，这种作用令消费者不喜爱。此外，由于与去除禽类内脏有关的粪便物质的传播，粪便细菌充斥。这种恶劣的条件结果导致洗涤水中、湿表面如切割表面、水槽表面和其它无论如何与这些洗涤水接触的下游设备上的高氮水平。不巧地是，某些氯类物质的氯基杀微生物剂易于与含氮物质反应形成氯胺，氯胺是催泪剂并对金属表面具有溶蚀性。事实上，含有含氮杂质的水洗涤槽中低至50ppm的氯就可产生工厂工人无法忍受量的空气重播性催泪剂。此外，形成氯胺过程中氯的消耗导致杀生效果的明显丧失，因为氯胺不是杀生活性物质。
显然，在禽类加工工业中存在对一种新的、更有效的、经济可行方式的微生物控制方法的需求。
发明内容
本发明通过在禽类加工中和禽类加工中使用的设备、仪器、装置和/或水的消毒过程中以及/或者由禽类加工获得的(屠宰后)畜体和/或部分提供并利用某些高效的卤素基杀微生物剂满足了前述需求。本发明使用的杀微生物剂可由相对低成本的原料以直接加工的方式经济地制备，并且由于它们的效力，它们可提供在经济上符合工业需求的微生物控制。
[0005]在其一个实施方案中，本发明提供改进的禽类加工方法，该方法包括用卤素基杀微生物剂消毒这类加工中使用的设备、仪器、装置和/或水，以及/或者由这类加工方法获得的禽类的畜体和/或部分，所述杀微生物剂是：
(I)一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是(a)溴、氯或氯化溴，或者其任意两种或全部三种，和(b)水溶性来源的氨基磺酸根阴离子在含水介质中的衍生产品；或者
(II)一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种1，3-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品，其中一个卤原子是氯原子并且另一个是氯或溴原子，并且其中各个烷基独立地包含1至约4个碳原子；或者
(III)一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品，其中的一个烷基是甲基，另一个烷基包含1至约4个碳原子；或者
(IV)(I)、(II)和(III)的任意两种或多种的组合。
上面(I)的衍生产品是一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液通过水中的溴、氯或氯化溴，或者其任意两种或全部三种，与水溶性来源的氨基磺酸根阴离子之间的反应形成和获得。包含100,000ppm以上活性卤素的该类浓溶液可以商品名ATABROM909杀生剂购自Albemarle Corporation。浓溶液，例如这种浓溶液可首先进一步用水稀释或者不经稀释地应用于禽类加工中使用的设备、仪器或者装置以及加入禽类加工用水中。另一方面，在应用于禽类畜体或其部分之前，这种浓溶液应用水或在水中进行稀释，例如通过将浓溶液加到冰水槽等中的水中。类似地，上面(II)和(III)的衍生产品是一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液通过将特定的1，3-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲溶于水中形成和获得。这类1，3-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲通常可以以固体和可由这类固体形成的浓缩水溶液形式购得，对于禽类加工中使用的设备、仪器或者装置，它们可以进一步稀释或无需稀释并加到禽类加工用水中。但对于禽类畜体或其部分的应用，使用前应将该浓溶液进一步用水稀释，或者应将选择的1，3-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲固体以无需形成中间较浓溶液而直接产生所需杀微生物剂剂量的比例加到水中。
纯粹出于方便，当由氯化溴、溴和氯或者溴、氯和氯化溴以及氨基磺酸盐制成时，下文中有时将上述(I)的杀微生物剂称为“氨基磺酸盐-稳定的氯化溴”，然而，从技术上说，含水介质中的实际化学物质大多不是氯化溴分子或氨基磺酸盐加成物或氯化溴的复合物。因此，命名“氨基磺酸盐-稳定的氯化溴”是指称这类组合物的简单的书记方式，并且该命名并非象征、表示或暗示该组合物的任何实际化学结构。
在优选的实施方案中，用于上述加工的杀微生物剂是(A)溴基杀微生物剂，其包括一种或多种活性溴类物质的高碱性杀微生物水溶液，所述溴类物质由水中溴或氯化溴、氯化溴和溴的混合物或者溴和氯的组合(其中氯的摩尔量等于溴的摩尔量或小于溴的摩尔量)与水溶性来源的氨基磺酸根阴离子的反应获得，或者(B)至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲的杀微生物水溶液，其中的一个烷基是甲基且另一个烷基包含1至约4个碳原子；或者(C)(A)和(B)二者的组合。因此，在本发明的实施方案中，将禽类加工中使用的设备、仪器、装置和/或水进行消毒，以及/或者将由这类加工方法得到的禽类畜体或其它部分进行消毒，“溴基”是指该段落的(A)、(B)或(C)中提及的任何杀微生物剂。实际上，使要消毒的表面与(A)、(B)或(C)的杀微生物水溶液接触，它们包含杀微生物有效量的杀微生物剂和/或其杀微生物水解产物。
这类溴基杀微生物剂比氯基杀微生物剂能更有效地抗细菌和生物膜。此外，与氯基杀微生物剂相比，这些溴基杀微生物剂不易于产生臭味，因此基本避免了不期望的漂白活性。再者，虽然某些溴基杀微生物剂可能与含氮物质反应，例如存在于水中和与禽类加工有关的表面上，但得到的溴胺仍具杀微生物活性。因此，通过使用这些溴基杀微生物剂，这种副反应不会大大降低禽类加工器可利用的微生物学效力。再者，溴胺通常不表现出令加工厂工人讨厌的性质，但在相同的条件下，由使用某些氯基杀微生物剂产生的氯胺易于成为高效催泪剂。
如上所述，上面(I)的卤素基杀微生物剂是一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是溴、氯或氯化溴，或者其任意两种或全部三种，和水溶性来源的氨基磺酸根阴离子在含水介质，如水中的衍生产品。同样，上面(A)的溴基杀微生物剂是一种或多种活性溴类物质的杀微生物水溶液，所述溶液是溴或氯化溴、氯化溴和溴的混合物或者溴和氯的组合物(其中氯的摩尔量等于溴的摩尔量或小于溴的摩尔量)与水溶性来源的氨基磺酸根阴离子在含水介质，如水中的衍生产品。为形成这些衍生产品，将形成衍生产品的组分一起加到含水介质，例如水中，当形成该产品时，通过使用无机碱如氢氧化钠使所述介质或水总是具有至少7的pH并且有效总是具有高于7，例如10-14的pH。当使用市售的该类产品(Stabrom 909杀生剂；Albemarle Corporation)，公认的水产品的pH一般为13-14。
同样，上面(II)的卤素基杀微生物剂是一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种1，3-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质，如水中的衍生产品，其中一个卤原子是氯原子且另一个是氯或溴原子，并且其中的烷基如上所述。上面(II)的卤素基杀微生物剂中，优选的是一种或多种活性卤素类物质的杀微生物溶液，该溶液是至少一种1，3-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质，如水中的衍生产品，其中一个卤原子是溴原子且另一个是氯原子(并且烷基如上所述)。上面(III)和上面(B)的溴基杀微生物剂是一种或多种溴类物质的杀微生物溶液，该溶液是至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质，如水中的衍生产品，其中的烷基如上所述。当本段落中提及的1，3-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲溶于含水介质，如水中时，将发生转化，这样活性卤素(或溴)类物质将存在于所得溶液中。
在许多情况下，通过将杀微生物剂本身(即以未稀释的形式)或者以其预先形成的浓溶液加到一次或多次禽类加工中正使用的水(如流入冰水槽的水或者已经存在于冰水槽中的水)中，以形成本发明的稀释的杀微生物水溶液，即用于本发明上述实施方案的杀微生物水溶液，将该溶液与要消毒的表面接触。或者，将预先形成的浓缩的杀微生物剂的水溶液直接应用于要消毒的表面(如切割案板或刀子的表面)，或者更通常地是将这类浓溶液与水混合形成较稀的杀微生物剂溶液，将该溶液应用于被消毒物的和/或加入禽类加工操作中使用的水中。总之，本发明使用的这些实施方案的杀微生物水溶液可全部或部分用禽类加工操作中正使用的或者将要使用的水进行制备，或者可全部使用与禽类加工中使用的或将要使用的水分隔的水来制备。在各种情况下，无论如何，接触制得的杀微生物水溶液和/或将其应用于各种表面都将导致有效消毒。
目前，用于实践本发明任意实施方案的最优选的溴剂杀微生物剂是水溶性1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲，其中的一个烷基是甲基且另一个烷基是包含1至约4个碳原子的烷基，  其中，1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲是最优选的。
由后续的说明和附录的权利要求书，本发明的各个实施方案和特征将更加清晰。
附图说明
附图1是冰水槽的杀微生物处理对鸡皮上假单胞菌属细菌的生长的影响的图示说明。
附图2是冰水槽的杀微生物处理对鸡皮上的全部需氧菌的生长的影响的图示说明。
附图3是冰水槽的杀微生物处理对鸡皮上的假单胞菌属细菌的生长的影响的图示说明。
附图4是冰水槽的杀微生物处理对鸡皮上的全部需氧菌的生长的影响的图示说明。
附图5和6涉及使用由氨基磺酸盐-稳定的氯化溴衍生的溴类物质根除生物膜和浮游生物形式的HPC细菌试验(异养培养皿计数(heterotrophic plate count))获得的结果的图示说明，溴在水中的浓度分别为0.5ppm和2ppm。
附图7和8涉及使用由氨基磺酸盐-稳定的氯化溴衍生的溴类物质根除生物膜和浮游生物形式的HPC细菌试验(异养培养皿计数)获得的结果的图示说明，溴在水中的浓度分别为4ppm和10ppm。
附图9涉及使用由1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲衍生的溴类物质根除生物膜形式的HPC细菌试验(异养培养皿计数)获得的结果的图示说明，溴在水中的浓度为0.5ppm和5ppm。
附图10涉及使用由1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲衍生的溴类物质根除浮游生物膜形式的HPC细菌试验(异养培养皿计数)获得的结果的图示说明，溴在水中的浓度为0.5ppm和5ppm。
具体实施方式
本发明的一组用于禽类加工中使用的设备、仪器、装置和/或水，以及/或者由禽类加工方法得到的禽类畜体和/或部分的卤素基杀微生物剂是一组或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，所述物质由溴、氯或氯化溴，或者其任意两种或全部三种，与水溶液来源的氨基磺酸根阴离子在水中的反应获得。在形成该杀微生物剂中，如果使用氨基磺酸，这该溶液中还应加入碱，优选足以使该溶液保持碱性，即pH高于7，优选高于10，最优选为约13或高于13的碱。pH越低，溶液就越不稳定，因此，如果在立即使用处制备溶液，则不必使用碱。但是，优选使用制得的杀微生物浓溶液，并且在这种情况下，浓溶液呈pH为约13或高于13的高碱性溶液。通常，这类浓溶液将包含高于50,000ppm(wt/wt)的活性卤素，优选至少约100,000ppm(wt/wt)的活性卤素，并且有时高达约150,000ppm(wt/wt)或更高的活性卤素，活性卤素的含量可通过常规的淀粉-碘滴定法测定。
一组优选的该类物质是在含水介质中，由溴或更优选地由氯化溴、氯化溴和溴的混合物或者溴和氯的组合物(其中氯的摩尔数等于溴的摩尔数或小于溴的摩尔数)与氨基磺酸和/或氨基磺酸的水溶性盐的反应形成的溴基杀微生物溶液。除在就地使用处制备外，这类溶液应是具有pH至少为约12，优选至少为约13的高碱性溶液，在制备溶液过程中，这种pH可以使用碱如氢氧化钠等达到。这类浓溶液可以从市场获得，例如Stabrom 909杀生剂(Albemarle Corporation)。制备这些浓缩水溶液的方法记载于共同拥有的2000年5月30日颁布的美国专利6,068,861和2001年10月9日颁布的6,299,909 B1，它们的所有公开内容均在此引作参考。
应该清楚，甚至在使用氯化溴、氯化溴和溴的混合物或者溴和氯的组合物(其中氯的摩尔数等于溴的摩尔数或者小于溴的摩尔数)制备的杀微生物剂时，杀微生物剂是溴基的也通常如同大多数氯一样，以氯化物盐如氯化钠形式终止，因为在加工中碱金属碱，如氢氧化钠一般用于使产物溶液的pH升高到至少为约13。因此，该产物溶液中的氯不是以重要的杀微生物剂形式存在。
本发明使用的这些实施方案的另一组卤素基杀微生物剂是一种或多种N，N’-卤代-5，5-二烷基乙内酰脲，其中一个卤原子是氯且另一个是溴或氯，并且其中的烷基各自独立地包含1至约4个碳原子。适合的该类化合物包括，例如下面的化合物：1，3-二氯-5，5-二甲基乙内酰脲、1，3-二氯-5，5-二乙基乙内酰脲、1，3-二氯-5，5-二正丁基乙内酰脲、1，3-二氯-5-乙基-5-甲基乙内酰脲、N，N’-溴氯-5，5-二甲基乙内酰脲、N，N’-溴氯-5-乙基-5-甲基-乙内酰脲，N，N’-溴氯-5-丙基-5-甲基乙内酰脲、N，N’-溴氯-5-异丙基-5-甲基乙内酰脲、N，N’-溴氯-5-丁基-5-甲基乙内酰脲、N，N’-溴氯-5-异丁基-5-甲基乙内酰脲、N，N’-溴氯-5-仲丁基-5-甲基乙内酰脲、N，N’-溴氯-5-叔丁基-5-甲基乙内酰脲、N，N’-溴氯-5，5-二乙基乙内酰脲、以及前述任意两种或多种的混合物。N，N’-溴氯-5，5-二甲基乙内酰脲可以以商品名Bromide杀生剂(Great Lakes ChemicalCorporation)购得。另一组适合的溴氯乙内酰脲混合物是由主要的N，N’-溴氯-5，5-二甲基乙内酰脲和少量(重量比)的1，3-二氯-5-乙基-5-甲基乙内酰脲组成的混合物。后一种混合物可在市场上以商品名Dantobrom杀生剂(Lonza Corporation)购得。
将本发明使用两种或多种前述的N，N’-溴氯-5，5-二烷基乙内酰脲的混合物时，该混合物中的单个杀生剂彼此可以以任意比例存在。
应该清楚，关于N，N’的命名，比如N，N’-溴氯-5，5-二甲基乙内酰脲是指该化合物可以是1-溴-3-氯-5，5-二甲基乙内酰脲，(2)1-氯-3-溴-5，5-二甲基乙内酰脲或(3)1-溴-3-氯-5，5-二甲基乙内酰脲和1-氯-3-溴-5，5-二甲基乙内酰脲的混合物。另外，应该可以想到，某些1，3-二氯-5，5-二甲基乙内酰脲和1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲可以以与(1)、(2)或(3)的混合物形式存在。
更优选用于实践本发明的这些实施方案的系列是1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲的溴基杀微生物溶液，其中的一个烷基是甲基且另一个烷基包含1-约4个碳原子。这些优选的杀生剂包括1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲、1，3-二溴-5-乙基-5-甲基乙内酰脲、1，3-二溴-5-正丙基-5-甲基乙内酰脲、1，3-二溴-5-异丙基-5-甲基乙内酰脲、1，3-二溴-5-正丁基-5-甲基乙内酰脲、1，3-二溴-5-异丁基-5-甲基乙内酰脲、1，3-二溴-5-仲丁基-5-甲基乙内酰脲、1，3-二溴-5-叔丁基-5-甲基乙内酰脲、以及它们的两种或多种的混合物。这些杀生剂中，基于成本效益的观点，1，3-二溴-5-异丁基-5-甲基乙内酰脲、1，3-二溴-5-正丙基-5-甲基乙内酰脲和1，3-二溴-5-乙基-5-甲基乙内酰脲分别是这组中优选的、更优选的和甚至更优选的。本发明使用的前述杀生剂的混合物中，优选使用1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲作为组分之一，其中1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲和1，3-二溴-5-乙基-5-甲基乙内酰脲是特别优选的。该组最优选的杀微生物剂是1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲。该化合物可以以商品名Albrom100T杀生剂和Albrom100PC杀生剂以片或颗粒形式购得(Albemarle Corporation)。
当两种或多种前述的1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲杀生剂的混合物时，该混合物中的单个杀生剂彼此可以以任意比例存在。
制备1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲的方法是已知的或者报道于文献中。
如果需要，可将1，3-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲溶于包含或不包水的适合的温和、无害的水溶性有机溶剂中，以形成可应用于设备、仪器或装置的表面的溶液。根据使用的溶剂，表面可进一步用清水洗涤以除去这类溶剂残留物。除了提高可加到溶液中的1，3-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲的量以有助于浓溶液的形成外，还可例如在禽类加工的上述各处，当例如将这种浓溶液加到上述各处使用的加工用水中稀释时，其具有1，3二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲产生的杀微生物活性。本发明使用的这种水溶液可包含适合的少量的温和、无害的水溶性有机溶剂，至少在有关的剂量水平下，它们是无毒的，例如乙腈。
在其中需要非常强的杀生活性的情况，例如定期清洗和消毒操作时，本发明的杀微生物剂的浓水溶液可直接应用于被病原性微生物感染的禽类加工设备、仪器和/或装置的表面。这类浓溶液可包含，例如高达150,000ppm或160,000ppm或更高含量的活性溴，和高达约66,667ppm或约71,111ppm的活性氯，它们的含量可通过淀粉-碘滴定进行测定。如果需要，可在直接应用于这种禽类加工设备、仪器和/或装置的表面之前，将部分这种浓溶液用任意适合量的水进行稀释，当然假定稀释过的溶液仍包含杀微生物有效量的活性溴类物质。此外，可加入本发明的浓溶液，这样用禽类加工操作中使用的加工水稀释的形式使用，所述加工水是例如流经水管的水、流入或存在于水槽中的水和喷洗设备用水。
本发明实践中使用的杀微生物剂的量(浓度)将根据各种因素而有所不同，例如使用的特定杀微生物剂、在先杀微生物处理的性质和频率、存在的微生物种类和性质、微生物可利用的营养物的量和种类、清洁作用的性质和程度，如果有的话，还应结合杀微生物处理、被处理的微生物的表面或场合等。在任何情况下，将本发明的杀微生物有效量的杀微生物剂的稀释水溶液应用于微生物或使微生物与之接触。典型地是，稀释的溶液应包含杀微生物有效量的2-1000ppm(wt/wt)，优选2-500ppm(wt/wt)，更优选25-250ppm(wt/wt)活性卤素，活性卤素可使用常规DPD测试方法进行测定。如果溶液中的实际活性卤素由活性氯组成，使用的稀释溶液的浓度优选比前述的范围的低限高至少2-3倍。在本发明使用1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲的情况下，普通情况(例如洗涤硬表面，如桌面、墙面、地面、传送机械或其部件，如传送带或钩环、刀子和切割刀片)下使用的特别优选的范围是50-150ppm(wt/wt)的活性溴。当使用本发明的由至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲形成的水溶液接触禽类畜体或其可食用部分时，特别优选在洗涤或其它接触禽类畜体或其可食用部分的水中使用杀微生物有效量的活性溴，活性溴不会明显或相当可观地漂白畜体的皮肤或者用禽类，如胸脯肉和腿肉烹制的食品在感官味觉(organleptic taste)上具有负面影响。该量通常为0.5-30ppm(wt/wt)，优选为5-25ppm(wt/wt)活性溴，其含量可通过DPD测试方法进行测定。如果在这些畜体洗涤操作中使用氨基磺酸盐-稳定的氯化溴，认为也适用同样的范围。应该清楚，当认为必需或需要时，也可偏离前述范围，这种偏离也在本发明的实质范围内。
因此，根据本发明的杀微生物剂被使用的方式，本发明杀微生物剂的杀微生物有效量可扩展到低至约2ppm，最高可达所使用的特定活性卤素杀微生物剂在使用这类活性卤素杀微生物剂的温度下的最高水中溶解度。
从上面可以看出，无论是活性氯、活性溴或二者兼备，都存在两种不同类型的用于测定活性卤素含量的方法。对于测定接近超过约，例如500ppm或类似(wt/wt)活性溴，或者超过约1100ppm活性氯的浓度，淀粉-碘滴定发是优选的方法。另一方面，在浓度低于这些邻近区时，常规的DPD测试方法更为适合，因为这种测试是设计用以测定非常低的活性卤素浓度的，例如从零至约11-12ppm(wt/wt)的活性氯浓度或者从零至约5ppm(wt/wt)的活性溴浓度。事实上，在活性氯的实际浓度介于例如约11-12ppm至约1100ppm(wt/wt)，或者在活性溴的实际浓度介于例如约5ppm至约1100ppm(wt/wt)的情况下，在进行DPD分析之前，测试样品一般用纯水稀释，以使实际浓度在活性氯的情况下降至4至11-12ppm，在活性溴的情况下降至2至5ppm。因此，可见虽然在使用何种方法之间没有严格的必需遵守的浓度区分界限，但上面给出的大致数值范围代表了实际的大致区分界限，因为当使用DPD测试方法时，水稀释的较浓溶液的量随起始活性卤素浓度的增加而增加，当分析较浓的溶液时，使用淀粉-碘滴定法可方便地避免这种大量稀释。总之，对于适合的稀溶液，推荐使用DPD测试方法，对于较浓的溶液，推荐使用淀粉-碘滴定法。
用于测定活性卤素的淀粉-碘滴定法由来已久。例如Willard-Furman的Elementary Quantitative Analysis的第XIV章(Third Edition，D.Van Nostrand Company，Inc.，New York，Copyright 1933，1935，1940)描述了淀粉-碘滴定法。虽然使用淀粉-碘滴定法测定这类产品溶液中的活性卤素的标准定量分析步骤的细节可能随溶液的不同而不同，但由一种标准步骤到另一种标准步骤得到的结果一般是足够一致，不会产生任何结果不可靠的问题。推荐的淀粉-碘滴定法步骤如下：将磁力搅拌器和50毫升冰醋酸放入碘烧瓶中。称重要测定活性卤素的样品(通常为约0.2-0.5g)并将其加到含乙酸的烧瓶中。然后往该烧瓶中加入水(50毫升)和碘化钾水溶液(15％wt/wt；25毫升)。该烧瓶用水封塞塞住。将该溶液搅拌15分钟后，打开塞子并将塞子和密封区域用水冲洗到烧瓶中。将0.1标准的(normal)硫代硫酸钠填充到自动滴定管(Metrohm Limited)中。碘烧瓶中的溶液用0.1标准的硫代硫酸钠进行滴定；当观察到淡黄色时，加入1毫升1wt％淀粉水溶液，烧瓶中溶液的颜色由淡黄色变为蓝色。继续用硫代硫酸钠滴定直至蓝色消失。用样品的重量和滴定的硫代硫酸钠溶液的体积计算活性卤素的量。由此，不管实际的化学形式是什么，都可定量地测定水产品溶液中活性卤素，如活性氯或活性溴的量。
用于测定低水平活性卤素的标准DPD测试以Palin在1974年发明的经典的测试方法为基础。参见A.T.Palin，“Analytical Control of WaterDisinfection With Special Reference to Differential DPD MethodsFor Chlorine，Chlorine Dioxide，Bromine，Iodine and Ozone”，J.Inst.Water Eng.，1974，28，139。虽然存在Palin方法的各种现代化改进方法，但推荐的改进方法全面地记载在Hach Water AnalysisHandbook，3rd edition，copyright 1997中。在该出版物的第379页呈现的Method 8167明确了测定“氯总量”(即活性氯)的方法。概括地说，“氯总量”的试验包括加入包含活性卤素的稀的水溶液样品、包含DPD指示剂粉末的粉末(即N，N’-二乙基二苯二胺)、KI和缓冲剂。存在的活性卤素类物质与KI反应，得到使DPD指示剂变为红/粉色的碘类物质。颜色的强度取决于样品中存在的“氯总量”类物质(即活性氯)的浓度。该强度使用将强度读数转化为mg/L Cl2形式的“氯总量”数值的标准化比色计进行测定。如果存在的活性卤素是活性溴，将mg/L Cl2形式的结果除以2.25，得到以mg/L Br2活性溴形式表示的结果。
详细的DPD测试方法如下：
1.为测定水中存在的响应“氯总量”试验的物质的量，应在采样的数分钟内对水样进行分析，并且优选在采样后立即进行分析。
2.测定水样中存在的响应“氯总量”试验的物质的量的Hach Method 8167包括使用Hach Model DR 2010比色计。通过键控键盘上的“80”检索氯测定的贮存程序号，然后通过旋转仪器一侧的刻度盘设定吸收波长为530nm。在观察下，两个相同的样品池用水填充到10mL刻度。选择任意一个池为空白。向第二个池中加入DPD氯总量粉末系列(DPD Total ChlorinePowder Pillow)的内容。将这些振摇10-20秒进行混合，粉红色的呈现指示水中存在着对DPD“氯总量”测试试剂反应阳性的物质。按压键区的SHIFT TIMER键，开始三分钟的反应时间。三分钟后，发出嘟嘟的信号指示反应完全。使用10mL池上升管，使空白样品池进入Hach Model DR2010的样品室，关闭保护栅以防止游走的光的作用。然后按压ZERO键。数秒后，显示器记录0.00mg/L Cl2。然后，从Hach Model DR 2010的池室中取出用于将仪器调零的空白样品并以测试样品替代，往测试样品中加入DPD“氯总量”测试试剂。然后与空白的操作一样，关闭光栅并按压READ键。数秒内，显示器上显示出以mg/L Cl2表示的结果。这种就是检测水样的“氯总量”水平。
在本发明的实践中，可以以不同的方式使用杀微生物体系。例如，将本发明的杀微生物有效量的杀微生物剂，优选溴基杀微生物体系应用于要根除或控制微生物的场合，以使杀微生物体系与这些微生物接触。杀生有效量的杀微生物剂的水溶液的应用可通过倾倒、喷雾、湿擦、充溢和/或湿法擦拭被感染的或可能被感染的加工设备的表面或区域以及邻近区域，例如地面、墙面、桌面、传送设备、支柱、水管、水槽和下水道来进行。在适用和可能的情况下，将加工设备的部分浸入杀微生物剂的水溶液中，如果需要，可临时拆卸。应常规地进行这种应用，以足以确保被加工的禽类与危害性微生物，例如细菌和生物膜的接触被阻止达到可能的最大程度。为达到最佳结果，这些操作应与彻底清洁操作，例如洗涤、冲刷、刮擦以及其它除去可见或不可见的生物污染或生物膜的感染的操作结合。在微生物与杀微生物剂接触一段适当的时间，以确保渗入这些不同种类的微生物的多糖粘液和其它防御机制之后，整个消毒区域应进行清洗，例如以清水用水管浇，并且在使用前，清洗液本身优选使用本发明的附加的杀微生物剂，优选溴基杀微生物剂进行消毒。当然，接触时间根据清洁和消毒操作的频率和彻底性以及使用的特定杀微生物溶液的特性和浓度有所不同。一般来说，接触时间可以为大约数分钟至数小时，但应使用有效根除或控制禽类加工区域的微生物数量的任何时间，这也在本发明的范围内。
另一种应用本发明的这些实施方案的杀微生物有效量的固态杀微生物剂的方式是使要萃取到水流中的杀微生物剂流经水管并进入在禽类加工中使用的水槽或其它清洗装置。例如，将适合的固体形式的杀微生物剂，优选溴基杀微生物剂，如片、团块、丸或小块放入适合的有水流通过的进料装置中。水流通过杀微生物剂的床致使水流持续不断地溶解少量杀微生物剂，由此在水中提供杀微生物有效量的杀微生物剂。1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲特别优选以这种应用方式来使用，因为其在室温下在水中具有较低的溶解度和较慢的溶解速率。这解释为需再次填充装置使其保持所述固体之前的较长的使用时间。例如，1，3-二溴-5，5二甲基乙内酰脲在75°F(约24℃)的水中的溶解度是405ppm(以Cl2表示)，而N，N’-溴氯-5，5-二甲基乙内酰胺及N，N’-溴氯-5，5-二甲基乙内酰脲和1，3-二氯-5-乙基-5-甲基乙内酰脲的市售混合物在相同温度下的溶解度分别为890ppm和1905ppm(二者均以Cl2表示)。
具特别理想的成本-有效性和操作效率的并且高度优选的形成一种或多种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲(其中一个烷基是甲基且另一个烷基包含1至约4个碳原子)，最优选1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲(“二溴二烷基乙内酰脲”)的杀微生物水溶液的方式包括使水通过放置在罐、槽或其它类似容器(“池”)中的一种或多种颗粒、小块、丸、片或其它非粉末状颗粒(“床”)形式的二溴二烷基乙内酰脲。槽的上部优选具有用于定期重新填充床内容物的可压力密封的槽口(port)，并使水向上流经床的部分。更优选地，槽在向上方向延伸以使床的底部到顶部的长度长于从一侧到另一侧的长度，这种向上的水流仅通过床的下部送入床向上流动，因此基本水平地通过设置在床和槽的下部和上部之间的槽口。由此，床的上部用作床内容物的储备供应，当床的下部被缓慢而搅拌均匀地溶入水流中时，所述储备供应的内容物在重力下自动填入床的下部。因此在该操作中，水流优选至少是基本上连续流动，并且最优选是连续流动。生产颗粒、片或其它非粉末状的颗粒形式的1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲的方法详细记载于共同拥有的未审结的申请PCT/US 01/01541、01/01545和01/01585，这些申请均于2001年1月17日提交，每个申请都要求了基于分别早期提交的相应的美国申请的优先权。用于制备这种颗粒、片或其它非粉末状颗粒形式的1，3二溴-5，5-二甲基乙内酰脲的优良方法技术详细记载于共同拥有的未审结的申请PCT/US 01/01544中，该申请于2001年1月17日提交，要求了基于早期提交的相应美国申请的优先权。这些PCT和美国申请的公开内容再次均引作参考。在形成其杀微生物的水溶液时，特别优选与这类颗粒、片或其它非粉末状颗粒形式的这些二溴二烷基乙内酰脲结合使用的装置可购自Neptune ChemicalPump Company(R.A.Industrie，Inc.的分支机构，Lansdale，PA 19446，“Bromine Feeders”Models BT-15、BT-40、BT-42、BT-80、BT-160、BT-270和BT-350)或者相当的设备。使用结合的Model BT-40与1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲Albrom100杀生剂(可购自AlbemarleCorporation)获得了良好的结果。在这类装置中单独加入片或颗粒形式的这类杀微生物剂可提供长达五(5)个月的容器终端用水保持持续高效的杀微生物活性，而不需要重新填充。
在本发明使用较易水溶的杀微生物剂的情况下，另一种适合的使杀微生物剂与微生物接触的方法是将包含杀微生物有效量的杀微生物剂的水溶液泵入水管并且泵入禽类加工中使用的水槽或其它洗涤装置中，例如烫退槽和冰水槽中。这些方法的改进方法包括通过重力滴下作用使杀微生物剂的水溶液直接分批配送到加工禽类的水槽或其它容器中。
本发明使用的另一种应用模式包括用杀微生物剂的水溶液接触禽类本身，典型的是屠宰之前和之后立即应用。在根除禽类表面上的细菌的适合时间后，将禽类进行清洗以除去家禽本身暴露表面上的过量的杀微生物剂和杀灭的(dispatched)微生物群。屠宰后家禽的内部器官也可以采样相同的方式进行处理和清洗。以这种方式的杀微生物溶液的应用可以采取任意适合的形式，例如使用包含杀微生物有效量的杀微生物剂的水喷雾剂，或者将家禽或其内部器官浸入一个或多个盛有杀微生物有效量的杀微生物剂的水槽中。
优选使用两种或多种前述的本发明杀微生物剂的应用方法。因此，在本发明的这些实施方案的优选杀微生物剂的实施方案中，溴基杀微生物水溶液优选通过下列步骤应用：(i)将禽类加工装置的至少部分(如果不是全部的话)与本发明的这些实施方案的杀微生物有效量的至少一种杀微生物剂，优选溴基杀微生物剂的水溶液接触，以进行消毒或卫生处理，和(ii)在家禽分解之前和/或之后，优选之后，使禽类的暴露表面与本发明的这些实施方案的杀微生物有效量的至少一种杀微生物剂的水溶液，优选溴基杀微生物剂的水溶液接触。在另一个实施方案中，本发明的这些实施方案的杀微生物剂，优选溴基杀微生物的水溶液通过如下步骤应用：(i)将禽类加工装置的至少部分(如果不是全部的话)与本发明的这些实施方案的杀微生物有效量的至少一种杀微生物剂，优选溴基杀微生物剂的水溶液接触，以进行消毒或卫生处理，和(ii)将分解的家禽的可食用部分和/或内部器官与与本发明的这些实施方案的杀微生物有效量的至少一种杀微生物剂的水溶液，优选溴基杀微生物剂的溶液接触。
本发明的特别优选的加工方法是其中家禽是通过包括下列系列步骤进行加工的那些方法：(a)将家禽悬挂到移动夹或钩环中，(b)使家禽昏迷，但不杀戮家禽，例如使用适当的气体，或者至少将家禽的头部与应用水的电休克接触以使家禽昏迷，例如将头浸入接有适合电流的水浴中使其昏迷，(c)在昏迷家禽的颈部，用刀或用机械切割装置自动切割颈静脉和/或颈动脉，(d)从畜体放血，(e)用热水烫退禽鸟，如在烫退水槽中，以助羽毛的除去，(f)退去羽毛，(g)除去家禽的头和脚，(h)用刀子手工取出，或者用机械取内脏装置自动取出家禽的内脏，(i)从畜体分离内脏，(j)洗涤畜体，和(k)冷却畜体，例如在水中，如使畜体经过至少一个或经常是两个冰水槽，或者通过空气冷却。烫退步骤填充在50-60℃的水中进行，为保持正常的黄色皮肤，较低的温度是优选的。对于火鸡和用尽的下蛋母鸡更经常地使用较高的温度。使用的冷却温度一般使畜体温度降至低于约4℃，出货的最终畜体的最终温度低达约-2℃。可包括其它步骤并且在某些情况下，可改变一个或多个(a)至(j)的步骤或者步骤的顺序也可发生一定程度的变化，以适应特定的情况。可包括的额外步骤的实例包括检查步骤，例如由政府控制的职工进行检查，和在水禽的情况下，浸入蜡中，以促进退羽毛的程度。检查通常在取出内脏步骤后进行，例如在从畜体分离内脏后。当加工水禽时，通常采用浸入蜡的步骤，水禽的羽毛通常较，例如鸡类难以除去。蜡的浸入一般在使用脱毛机后直接进行，脱毛机利用橡胶“手指”打退羽毛。蜡的浸入步骤通常包括将部分脱毛的畜体浸入槽中的熔融蜡中，使蜡在畜体上硬化，然后通过剥落蜡衣一并除去包埋在蜡中的羽毛。根据需要，在进行加工的下一步骤，如除去头和脚之前，可以重复该操作。一种步骤顺序适当改变的示例是在步骤(d)之前进行步骤(g)，代替步骤(f)后的步骤。阅读了该说明书之后，其它适合的顺序的变化对于本领域普通专业技术人员而言是显而易见的，因此在此无需进一步说明。
在上述加工过程中，本发明的这些实施方案的杀微生物剂，优选本发明中使用的一种或多种适用的溴基杀微生物剂的杀微生物作用可用于操作中的各个适合的操作。例如，本发明的适用的杀微生物溶液可应用于使用的任何或所有加工设备，包括刀子、传送装置、空去皮槽的表面、脱毛装置(例如橡胶“手指”)、用于切割家禽或取出家禽内脏的洗涤和机械装置、所有与家禽的血和内脏接触的表面，包括桌面、传送带以及所有与分离其内脏后的畜体接触的表面。本发明适用的卫生处理溶液可通过浸渍、喷雾、充溢或任何其它确保杀微生物有效溶液与包含有害微生物，如细菌和/或生物膜(生物污染)的有害微生物或者与有害微生物接触的表面接触的方式应用。
在上述加工过程中，可采用的本发明适用的杀微生物剂，优选本发明使用的一种或多种适用的溴基杀微生物剂的杀微生物作用的另一种方式包括将杀微生物有效量的杀微生物剂加到一个或多个加工步骤中使用的水中。因此，烫退槽和/或冷却槽中的水可进行如此处理。另一种方式包括将杀微生物有效量的杀微生物剂加到洗涤畜体和各个部位的内脏的水中，这些部位的部分被处理、分离和/或加工。根据需要，加工过程中这些不同部位的剂量水平可以相同或不同。
下列非限制性实施例进一步说明本发明的实践和优点。
实施例1
进行对比试验，以测定在包含不同杀微生物剂组合物的标准1.5小时冰水槽的水中浸渍期间对禽类畜体细菌(大肠杆菌属菌株)的作用。还研究了这些处理对残留的冰水槽水的影响。首先将畜体浸入包含104个大肠杆菌/升液体的温水浴中。然后将畜体浸入含标准有机液体(血液、脂肪、皮肤和肉类颗粒)并包含一种试验的杀微生物组合物的冰水槽中。用整个鸟禽(内部和外部)的细菌总数测定各自杀微生物组合物的效力。测试的杀微生物组合物是Aquatize杀生剂(Bioxy Incorporated，3733National Drive，Suite 115，Raleigh，NC 27612-4845)、次氯酸钠(Clorox漂白剂)、溴化钠(呈40％水溶液形式)、组合的次氯酸钠与溴化钠、以及由氯化溴和氨基磺酸根阴离子制得的浓缩的碱性水溶液(SSBC)(Stabrom909杀生剂；Albemarle Corporation)。
使用的试验进程和试验设计如下：
a)对于所有处理以常规方式处理总共190只鸡。每次处理涉及使用10只鸡。
b)制备包含每毫升5×104个DelMarVa(Delaware Maryland farmarea)野生大肠杆菌(Escherichia coli)菌株细菌的暖水浴(100°F)。为每只鸡至少提供总共200mL水浴液体。
c)将所有鸡(对照组和处理组)随机地浸入暖水浴中。将(屠宰后)畜体的内、外区域都浸入以确保完全覆盖。
d)每一独立的冰水槽(chill tank)水溶液(将普通自来水调节PH至8.5，加入冰来产生＜45°F的温度)包含每毫升2×103个细菌。
e)为每一消毒处理制备冰水槽水溶液(每个至少750ml)，将每只鸡浸入1.5小时。
f)在1.5小时冷却期间，每10分钟将鸡完全提出溶液并重新浸入溶液中。在1.5小时冷却期后，将鸡从冰水中取出并使水流干30秒，然后迅速地(在5分钟内)置于包含400ml稀释的(Butterfield’s磷酸盐稀释液)细菌收集品的无菌全鸡细菌分离器(stomacher)袋中。
g)向每一个包含在无菌细菌分离器袋中的畜体上添加稀释剂(400ml)，确保将稀释剂倒入腹腔内部。用摇动动作漂洗畜体内部和外部一分钟(ca.35 RPM)。最好用一只手抓住雏鸡畜体，用另一只手抓住袋子的密封上部，然后摇动在18-24英寸的弧内做往复运动，确保漂洗所有畜体表面(内部和外部)。
h)然后将漂洗液从每一个细菌分离器袋中转入独立的样品瓶内，注意确保收集日期、收集时间和处理组这些信息与样品相符。将每个瓶子用石蜡膜密封并存储在冰箱中。
i)稀释液体使麦氏平板(MacConkey plate)上为25-250计数。在液体被稀释后，将0.1ml液体置于麦氏琼脂板上并测定细菌数目。如果在平板上25-250计数的目标没有达到，则再一次进行稀释且进行平板计数。
j)在用于每一处理的所有畜体都已浸过后，测定水样的细菌。
k)计算每只鸡的总细菌数。
使用的冰水由每升950ml自来水、50ml血、10g基础腹部脂肪和10g肉粒组成。为了形成用作试验细菌来源的细菌培养物，将在BHI肉汤中的过夜培养物转移到新鲜的BHI肉汤中，并且在37℃保温1.5小时来使种群密度达到每毫升约8×106DFU(光密度在600nm，～0.1)。在冷却前，向细菌溶液中加入水使其等于5×104来提供水溶液来预浸泡所有的鸡。另外，在浸泡鸡的1.5小时冷却期前，以每毫升冰水总共2×103个的细菌量向冰水中加入另外的细菌。通过利用适合的无菌剥离溶液完全清洗整个畜体表面(内部和外部)，然后收集剥离溶液并将它们放置在平板上来进行细菌计数从而完成禽类畜体微生物污染测量。
表1是受试组的试验设计
                           表1
  受试组  受试材料&消毒剂浓度
    1  无消毒剂1
    2  Aquatize杀生物剂(稀释1∶700)，包含50ppm亚氯酸钠
    3  Aquatize杀生物剂(稀释1∶350)，包含100ppm亚氯酸钠
    4  Aquatize杀生物剂(稀释1∶250)，包含150ppm亚氯酸钠
    5  Clorox漂白剂12.5％Cl(稀释1∶2,500)，包含50ppm Cl2等同物2
    6  Clorox漂白剂12.5％Cl(稀释1∶1,250)，包含100ppm Cl2等同物
    7  Clorox漂白剂12.5％Cl(稀释1∶800)，包含150ppm Cl2等同物
    8  SSBC(稀释1∶12,500)，包含50ppm Cl2等同物(1.57倍Cl2)
    9  SSBC(稀释1∶6,250)，包含100ppm Cl2等同物(1.57倍Cl2)
    10  SSBC(稀释1∶4,000)，包含150ppm Cl2等同物(1.57倍Cl2)
    11  漂白剂和溴化钠(1∶1摩尔比混合物)，漂白剂稀释1∶3,500&40％NaBr溶液稀释1∶28,000，包含50ppm Cl2等同物(1∶1 Cl2等同物)
    12 漂白剂和溴化钠(1∶1摩尔比混合物)，漂白剂稀释1∶1,750&40％NaBr溶液稀释1∶14,000，包含100ppm Cl2等同物(1∶1 Cl2等同物)
    13 漂白剂和溴化钠(1∶1摩尔比混合物)，漂白剂稀释1∶1,200&40％NaBr溶液稀释1∶9,300，包含150ppm Cl2等同物(1∶1 Cl2等同物)
    14 漂白剂和溴化钠(2∶1摩尔比混合物)，漂白剂稀释1∶3,000&40％NaBr溶液稀释1∶50,000，包含50ppm Cl2等同物(1∶1 Cl2等同物)
    15 漂白剂和溴化钠(2∶1摩尔比混合物)，漂白剂稀释1∶1,500&40％NaBr溶液稀释1∶25,000，包含100ppm Cl2等同物(1∶1 Cl2等同物)
    16 漂白剂和溴化钠(2∶1摩尔比混合物)，漂白剂稀释1∶1,000&40％NaBr溶液稀释1∶16,600，包含150ppm Cl2等同物(1∶1 Cl2等同物)
    17 溴化钠(40％溶液)，稀释1∶8,000，包含50ppm Cl2等同物(1∶1 Cl2等同物)
    18 溴化钠(40％溶液)，稀释1∶4,000，包含100ppm Cl2等同物(1∶1 Cl2等同物)
    19 溴化钠(40％溶液)，稀释1∶2,670，包含150ppm Cl2等同物(1∶1 Cl2等同物)
1阴性对照包含被污染的水(每毫升细菌2.67×105个)。
2阳性对照是加入50ppm Cl2等同物的普通禽类工业实践。
表2-4分别显示在由Clorox漂白剂溶液和40％溴化钠水溶液形成冰水槽溶液的情况下，为了得到50ppm，100ppm和150ppm Cl2等同物而决定稀释浓度的方法。
                        表2-50ppm Cl2等同物的稀释
    摩尔比 每一成分的百分比  含量每升50ppm(ppm)       含量每升50ppm(μl/升)
漂白剂 NaBr 40   漂白剂 NaBr 40   漂白剂    NaBr40
    1∶1   72   28     36   14     288     35
    2∶1   84   16     42   8     336     20
                        表3-100ppm Cl2等同物的稀释
    摩尔比   每一成分的百分比     含量每升100ppm(ppm)    含量每升100ppm(μl/升)
漂白剂 NaBr 40   漂白剂   NaBr 40   漂白剂    NaBr40
    1∶1   72   28     72     28     576     70
    2∶1   84   16     84     16     672     40
                           表4-150ppm Cl2等同物的稀释
    摩尔比  每一成分的百分比   含量每升150ppm(ppm)     含量每升150ppm(μl/升)
漂白剂 NaBr 40   漂白剂 NaBr 40   漂白剂    NaBr40
    1∶1   72   28     108   42     864     105
    2∶1   84   16     126   24     1008     60
NaBr＝SANIBROM 40杀生物剂(包含40％溴化钠，水溶液)。
Clorox漂白剂(Bleach)包含12.5％氯。
对于利用此受试组的其它杀生物剂的稀释的计算基于如下：Aquatize杀生物剂是包含3.67％亚氯酸钠和Stabrom909的杀生物剂溶液的溶液，它被计算为1.57倍Cl2等同物水平。此受试组的结果在表5-7中汇总。
                          表5-畜体细菌减少
受试组  受试材料消毒剂浓度 平均细菌减少1
1  阴性对照 无减少
2  Aquatize杀生物剂(稀释1∶700) 4.25×102
3  Aquatize杀生物剂(稀释1∶350) 3.06×103
4  Aquatize杀生物剂(稀释1∶250) 6.67×103
5  Clorox漂白剂12.5％Cl(稀释1∶2,500) 1.03×102
6  Clorox漂白剂12.5％Cl(稀释1∶1,250) 5.11×102
7  Clorox漂白剂12.5％Cl(稀释1∶800) 9.89×102
8  SSBC(稀释1∶12,500)  2.41×102
9  SSBC(稀释1∶6,250)  5.87×103
10  SSBC(稀释1∶4,000)  4.69×104
11 漂白剂和溴化钠(1∶1摩尔比混合物)，漂白剂1∶3,500&NaBr稀释1∶28,000  3.52×104
12 漂白剂和溴化钠(1∶1摩尔比混合物)，漂白剂1∶1,750&NaBr稀释1∶14,000  8.87×104
13 漂白剂和溴化钠(1∶1摩尔比混合物)，漂白剂1∶1,200&NaBr稀释1∶9,300  2.27×105
14 漂白剂和溴化钠(2∶1摩尔比混合物)，漂白剂1∶3,000&NaBr稀释1∶50,000  1.09×103
15 漂白剂和溴化钠(2∶1摩尔比混合物)，漂白剂1∶1,500&NaBr稀释1∶25,000  1.55×104
16 漂白剂和溴化钠(2∶1摩尔比混合物)，漂白剂1∶1,000&NaBr稀释1∶16,600  5.21×104
17 溴化钠，40％溶液，稀释1∶8,000  92
18 溴化钠，40％溶液，稀释1∶4,000  6.54×102
19 溴化钠，40％溶液，稀释1∶2,670  1.73×103
1此值代表每处理10只鸡的平均值。
2第1受试组畜体包含2.67×105个总细菌计数。
                     表6-畜体细菌减少结果(减少百分率)
    受试组   平均细菌减少1   平均细菌减少计数1   与对照组比较细菌减少百分率1
    1     无减少2     267,000     对照
    2     4.25×102     425     0.159％
    3     3.06×103     3,060     1.146％
    4     6.67×103     6,670     2.498％
    5     1.03×102     103     0.039％
    6     5.11×102     511     0.191％
    7     9.89×102     989     0.370％
    8     2.41×102     241     0.090％
    9     5.87×103     5,870     2.199％
    10     4.69×104     46,900     17.566％
    11     3.52×104     35,200     13.184％
    12     8.87×104     88,700     33.221％
    13     2.27×105     227,000     85.019％
    14     1.09×103     1,090     0.408％
    15     1.55×104     15.500     5.805％
    16     5.21×104     52,100     19.513％
    17     92     92     0.034％
    18     6.54×102     654     0.245％
    19     1.73×103     1,730     0.648％
1此值代表每处理10只鸡的平均值。
2第1受试组畜体包含2.67×105总细菌计数。
                    表7-冰水细菌计数
受试组  受试材料消毒剂浓度 平均细菌减少1
1  阴性对照 5.11×103
2  Aquatize杀生物剂(稀释1∶700) 2.43×103
3  Aquatize杀生物剂(稀释1∶350) 8.54×102
4  Aquatize杀生物剂(稀释1∶250) 2.21×102
5  C1orox漂白剂l2.5％Cl2(稀释1∶2,500) 5.43×103
6  Clorox漂白剂12.5％Cl2(稀释1∶1,250) 4.24×103
7  Clorox漂白剂12.5％Cl2(稀释1∶800) 1.05×103
8  SSBC(稀释1∶12,500) 4.83×103
9  SSBC(稀释1∶6,250) 1.64×103
10  SSBC(稀释1∶4,000) 3.02×102
11 漂白剂和溴化钠(1∶1摩尔比混合物)，漂白剂1∶3,500&NaBr稀释1∶28,000 2.55×102
12 漂白剂和溴化钠(1∶1摩尔比混合物)，漂白剂1∶1,750&NaBr稀释1∶14,000 1.36×102
13 漂白剂和溴化钠(1∶1摩尔比混合物)，漂白剂1∶1,200&NaBr稀释1∶9,300 43
14 漂白剂和溴化钠(2∶1摩尔比混合物)，漂白剂1∶3,000&NaBr稀释1∶50,000 1.98×103
15 漂白剂和溴化钠(2∶1摩尔比混合物)，漂白剂1∶1,500&NaBr稀释1∶25,000 6.46×102
16 漂白剂和溴化钠(2∶1摩尔比混合物)， 3.47×102
漂白剂1∶1,000&NaBr稀释1∶16,600
17 溴化钠，40％溶液，稀释1∶8,000  4.67×103
18 溴化钠，40％溶液，稀释1∶4,000  3.49×103
19 溴化钠，40％溶液，稀释1∶2,670  2.23×103
1此值代表处理水每豪升细菌计数。
实施例2
重复实施例1的步骤，除了具有杀微生物活性的受试材料是(a)次氯酸钠(Clorox漂白剂)，(b)溴化钠和次氯酸钠的组合物，和(c)1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲(DBDMH)，在此受试组中使用100只鸡，冰水由每升950ml水、50ml血、10g基础(ground)腹部脂肪、10g肉粒和10g带脂肪的皮组成。
此受试组使用的试验设计在表8中汇总。
                             表8
受试组 活性成分或等同物 受试材料消毒剂浓度
1 无 无消毒剂1
2 氯(50ppm) Clorox漂白剂12.5％Cl2(稀释1∶2,500)，包含50ppm氯2
3 氯(100ppm) Clorox漂白剂12.5％Cl2(稀释1∶1,250)，包含100ppm氯
4 氯(150ppm) Clorox漂白剂12.5％Cl2(稀释1∶800)，包含150ppm氯
5 氯 漂白剂和液体溴化钠(1∶1摩尔比混合物)
(共50ppm) 漂白剂稀释1∶3,500&NaBr稀释1∶28,000包含50ppm氯等同物(1∶1Cl2等同物)
6 氯(共100ppm) 漂白剂和液体溴化钠(1∶1摩尔比混合物)漂白剂稀释1∶1,750&NaBr稀释1∶14,000包含100ppm氯等同物(1∶1Cl2等同物)
7 氯(共150ppm) 漂白剂和液体溴化钠(1∶1摩尔比混合物)漂白剂稀释1∶1,200&NaBr稀释1∶9,300包含150ppm氯等同物(1∶1Cl2等同物)
8 氯(共50ppm) DBDMH(等价于50ppm Cl2水平)-0.9克/升包含50ppm氯等同物(1∶1Cl2等同物)
9 氯(100ppm) DBDMH(等价于100ppm Cl2水平)-1.7克/升包含100ppm氯等同物(1∶1Cl2等同物)
10 氯(150ppm) DBDMH(等价于150ppm Cl2水平)-3.4克/升包含150ppm氯等同物(1∶1Cl2等同物)
1阴性对照包含被污染的水(每毫升细菌2.67×105)。
2阳性对照是加入50ppm Cl2等同物的普通禽类工业实践。
本发明的杀微生物溶液按照下述方式制备：
1.为了形成贮存液，将100g的1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲(DBDMH)搅拌入10升(10,000ml)水20分钟。过滤后，得到的澄清液每升包含1300mg Br2。当是Cl2时，这相当于每升580mg(或580ppm Cl2)。
2.具有50ppm Cl2等同物溶液含量的DBDMH洗涤溶液是通过将875ml上述贮存液与10升(10,000ml)上述制备的鸡冰水溶液混合形成的。以相同的方式分别制备包含100ppm Cl2等同物的150ml ppm Cl2等同物的DBDMH洗涤溶液(不同的是分别与1750ml和2625ml的贮存液混合)，即将上述贮存液与单独的10升份的上述制备的鸡冰水溶液混合。
表9汇总了在此受试组中得到的结果。
                            表9-畜体细菌减少
  受试组  受试材料消毒剂浓度 整只鸡细菌减少(％)   平均冰水细菌减少(％)1
    1  无消毒剂     对照2     对照
    2  Clorox漂白剂3，50ppm Cl2     6.6％     8.2％
    3  Clorox漂白剂，100ppm Cl2     28.2％     32.8％
    4  Clorox漂白剂，150ppm Cl2     41.1％     59.3％
    5  NaBr 50ppm Cl2等同物+漂白剂     14.8％     18.4％
    6  NaBr 100ppm Cl2等同物+漂白剂     38.5％     41.6％
    7  NaBr 150ppm Cl2等同物+漂白剂     73.5％     84.7％
    8  DBDMH，50ppm Cl2等同物     99.9999％     99.9999％
    9  DBDMH，100ppm Cl2等同物     99.9999％     99.9999％
    10  DBDMH，150ppm Cl2等同物     99.9999％     99.9999％
1此值代表处理水每毫升的细菌计数。
2阴性对照包含被污染的水(每毫升细菌2.67×105)。
3阳性对照是添加50ppm氯的普通禽类工业实践。
实施例3
进行此组试验来决定在冰水槽“汤(soup)”中浸泡1.5小时后，Clorox漂白剂，Aquatize杀生物剂，和1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲(DBDMH)对于畜体细菌(大肠杆菌野生菌株)残留物的作用。试验利用PH7，PH8和PH9(用磷酸三钠调节)的汤操作来进行整只鸡细菌计数。用PH8的试验来进行独立的细菌计数。
通常试验包括标准步骤，即利用56天大的鸡并将畜体首先浸入暖水浴中，此暖水浴包含每毫升104大肠杆菌(Escherichia coli)，每毫升104肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)，每毫升104绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)，每毫升104空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)，和每毫升104分别来自三种菌株的酸败细菌(单核细胞增多性李斯特杆菌(Listeria monocytogenes)和宋内氏志贺氏菌(Shigellasonnei))。然后将畜体浸入冰水槽“汤”中，此汤包含基本有机液体(血，脂肪，皮和肉粒)和试验中的杀微生物剂。
表10和11汇总了这些受试组的试验设计。
         表10-在PH7，PH8和PH9的全部鸡细菌计数
 受试组  受试材料(冰水槽) 重复(reps) 鸡/重复
 1  无(对照) 5  10
 2  Clorox漂白剂(20ppm Cl2等同物) 5  10
 3  Aquatize(1∶500稀释) 5  10
 4  Aquatize(1∶1000稀释) 5  10
 5  DBDMH(10ppm Cl2等同物) 5  10
 6  DBDMH(20ppm Cl2等同物) 5  10
        表11-在PH8的独立鸡细菌计数
 受试组  受试材料(冰水槽) 重复(reps) 鸡/重复
 7  无(对照) 5  5
 8  Clorox漂白剂(20ppm Cl2等同物) 5  5
 9  DBDMH(10ppm Cl2等同物) 5  5
 10  DBDMH(20ppm Cl2等同物) 5  5
通过在表12中显示的在合适的肉汤中生长的每个细菌样本来制备用于本受试组的细菌贮存液。每一个这种肉汤培养基的容量为至少500ml，允许细菌生长至少6小时。观察容器，不允许发展成浓的、混浊的视觉外观，那说明生长期太长了。因此溶液具有仅仅是模糊的或稍微不清楚的外观。
                     表12-肉汤处理
有机物1 肉汤 平板培养基
S.sonnei 营养肉汤 营养琼脂
L.monocytogenes 脑心浸液肉汤 脑心浸液琼脂
E.coli 脑心浸液肉汤 脑心浸液琼脂
S.enteritidis 胰蛋白酶的大豆肉汤 胰蛋白酶的大豆琼脂
P.aeruginosa 胰蛋白酶的大豆肉汤 胰蛋白酶的大豆琼脂
C.jejuni 布鲁氏菌属肉汤 布鲁氏菌属琼脂
1宋内氏志贺氏菌(Shigella sonnei)，单核细胞增多性李斯特杆菌(Listeria monocytogenes)，大肠杆菌(Escherichia coli)，肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)，绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)和空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)。
按下述方式制备本发明的杀微生物溶液：
1.为了形成贮存液，将100g的1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲(DBDMH)搅拌入10升(10,000ml)水20分钟。经过滤，得到的澄清液每升包含1300mgBr2。当是Cl2时，这相当于每升580mg(或580ppm Cl2)。
2.具有10ppm Cl2等同物含量的DBDMH冰水溶液是通过将175ml上述贮存液与10升(10,000ml)上述制备的鸡冰水溶液混合形成的。DBDMH冰水溶液包含20ppm Cl2等同物和以相同的方式制备的150ml ppm Cl2等同物，除了350ml的上述贮存液是与另一10-升部分上述制备的鸡冰水溶液混合。
表13是在这些试验中使用的“鸡汤”组合物。
        表13-“鸡汤”组合物
    材料1     材料/2100ml2
    加入的水     1840ml
    细菌贮存液     200ml
    血液     40ml
    鸡腹部脂肪(基础)     30g
    大腿肉粒     10g
    带有脂肪的鸡皮     10g
    总计     2100ml等同物
1将组合的材料冷却过夜。
2材料是基本的，并在使用前充分搅拌。
用于整只鸡洗涤采样的步骤如下：
1.在收集后将所有样本置于华氏50度以下。
2.在样本收集24小时内开始样本的微生物学分析。
3.将个体样本鉴别、收集日期、收集时间(移动阶段)、处理组和样本点的位置这些信息记录在每个样本瓶上。
4.在每一和定义的样本时间，带着乳胶或橡胶手套从加工线一个一个单独地取畜体。在每次收集之间用乙醇漂洗手套。
5.将畜体上任何多余的液体排干。将每个畜体独立地转移入无菌细菌分离器袋中。
6.向每一个装在无菌细菌分离器袋中的畜体上，加入400mlButterfield’s磷酸稀释液(BPD)，在此期间确保将BPD倒入了畜体腔的内部。用摇动动作将畜体内外漂洗一分钟(ca.35 RPM)。最好用一只手抓住雏鸡畜体，用另一只手抓住袋子的密封上部，然后摇动在18-24英寸的弧内做往复运动，确保漂洗所有畜体表面(内部和外部)。
7.然后将漂洗液从每一个细菌分离器袋中转入独立的样品瓶中，注意确保收集日期、收集时间(移动阶段)和处理组和样本点的位置这些信息与样品相符。
8.将每个瓶子用石蜡膜密封并放置在苯乙烯容器中，此容器带有碎冰或干冰或结冰的制冷机包使能过夜运至测试试验室。
9.将所有填充了的苯乙烯贮存器放在冰冷的地方(不到冻结)直到出货的急件送件人收集的1到2小时内。
按照下面的方法来对细菌有机物进行定量或定性测定：
需氧平板计数-计数规则按照BAM第8版第3章。
大肠杆菌状的和大肠杆菌计数-AOAC，991.14，Petrifilm。
沙门氏菌-AOAC 986.35，ELISA假定的筛选。
沙门氏菌-USDA LC-75，发生率。
弯曲菌-USDA LC-69，发生率。
李斯特杆菌属-USDA LC-57，发生率。
本受试组中使用的更详细的试验过程和试验设计如下：
a)便用的受试微生物是：
大肠杆菌ATCC11229
绿脓杆菌ATCC15442
肠炎沙门氏菌ATCC13076
宋内氏志贺氏菌ATCC9290
单核细胞增多性李斯特杆菌ATCC7644
空肠弯曲杆菌ATCC 29428
b)试验步骤：让所有受试菌株在表12列举的培养基中独立地在35℃生长24小时。通过在10,000xg离心10分钟来采集细胞并用Butterfield’s磷酸缓冲液(PH7.2的BPB)洗涤两次。将细胞再混悬在BPB中来获得对于每一微生物大约1.0×108CFU/mL的细胞混悬液。靶接种体水平是在最终受试溶液中是大约106CFU/mL。肠炎沙门氏菌和绿脓杆菌的情况下，物种是通过倒入制备的带有粗棉布过滤器的无菌离心管洗涤的。然后将培养物压成丸，利用上述的技术洗涤并重复3次。
c)鸡(56天大)在普通商业条件下加工。
d)将细菌加入大的批次的“鸡汤”中，然后在用于每一次试验的冰水中等分得到的混合物。然后将试验下的特定的消毒组合物加入到一份冰水中。每一份冰水包含每毫升104大肠杆菌(Escherichia coli)，每毫升104肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)，每毫升104绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)，每毫升104空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)，和每毫升104分别来自三种菌株的酸败细菌(单核细胞增多性李斯特杆菌(Listeria monocytogenes)和宋内氏志贺氏菌(Shigella sonnei))。
e)将鸡分别加入到10个50-加仑容器中，这些容器包含各自的处理(或对照)并将鸡放在容器中经历1.5小时冷却期。
f)在1.5小时冷却期间，每10分钟将混合物有力的搅拌。
g)在1.5小时冷却期后，将整只鸡放置在独立的无菌细菌分离器袋中，处理全部的鸡漂洗液(如上所描述)并将漂洗液的样本置于合适的琼脂平板上。将平板在37℃放置在培养箱中24小时。然后在24小时后读平板来测定在每个平板上的总计数。
此受试组的结果汇总在表14和15中。
                            表14
    水处理   整只鸡总需氧细菌(减少百分率)1
    水PH7     水PH8     水PH9
    无(对照)     --     --     --
Clorox漂白剂(20ppm Cl2等同物)     15％     15％     2％
Aquatize杀生物剂(1∶500稀释)     76％     71％     64％
Aquatize杀生物剂(1∶1000稀释)     42％     45％     33％
DBDMH(10ppm Cl2等同物)     85％     82％     78％
DBDMH(20ppm Cl2等同物)     99％     98％     96％
1每一个值代表每处理50只鸡。
                                表15
    有机物1         消毒处理(每只鸡的平均细菌计数)2，3
  对照   Clorox漂白剂(20ppm)     DBDMH(10ppm)    DBDMH(20ppm)
    S.sonnei   4551     3552     456     12
    L.monocytogenes   2463     2065     262     6
    E.coli   3055     2759     357     4
    S.enteritidis   3969     3160     560     10
    P.aeruginosa   2783     2280     289     9
    C.jejuni   1282     981     183     15
  与对照比较平均减少百分率 --     18.3％     85.8％   98.8％
1大肠杆菌(Escherichia coli)，肠炎沙门氏菌(Salmonellaenteritidis)，绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)，空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)，单核细胞增多性李斯特杆菌(Listeriamonocytogenes)和宋内氏志贺氏菌(Shigella sonnei)。
2注：交叉污染更像在加工环境里，在此环境中处理鸡且为个体培养决定取样。
3每个值代表每处理25只鸡。
实施例4
进行研究来测定浸入冰水槽溶液1.5小时后和酸败20-天期限(由细菌污染引起)后，Clorox漂白剂和1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲(DBDMH)对于畜体细菌残留物的作用。在PH8(通过磷酸三钠调整)下进行试验。在处理前或处理后测定皮着色(MinoltaColor Meter L值或亮度，a值或红和b值或黄)。
通常研究包括标准步骤，即利用56天大的鸡并将畜体首先浸入暖水浴中，此暖水浴包含每毫升104大肠杆菌(Escherichia coli)，每毫升104肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)，每毫升104绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)，每毫升104空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)，和每毫升104分别来自三种菌株的酸败细菌(单核细胞增多性李斯特杆菌(Listeria monocytogenes)和宋内氏志贺氏菌(Shigellasonnei))。然后将畜体浸入冰水槽“汤”中，此汤包含普通有机液体(血，脂肪，皮和肉粒)和各种的杀微生物剂(称为受试物质)。
在PH8下试验四受试组鸡来得到全部的鸡细菌计数。表16列出了对于这些全部细菌计数试验的试验设计。
                            表16
  受试组  受试材料(冰水槽)     重复    鸡/重复
    1  无(对照)     6     10
    2  Clorox漂白剂(20ppm Cl2等同物)     6     10
    3  DBDMH(10ppm Cl2等同物)     6     10
    4  DBDMH(20ppm Cl2等同物)     6     10
按实施例3制备DBDMH贮存液，细菌贮存液和“鸡汤”。另外，细菌肉汤处理，整只鸡洗涤取样步骤和用来对细菌有机物定量和定性分析的方法按照实施例3进行。
本受试组中使用的更详细的试验过程和试验设计如下：
a)使用的受试微生物是：
大肠杆菌ATCC11229
绿脓杆菌ATCC15442
肠炎沙门氏菌ATCC13076
宋内氏志贺氏菌ATCC9290
单核细胞增多性李斯特杆菌ATCC7644
空肠弯曲杆菌ATCC 29428
b)试验步骤：让所有受试菌株在表12列举的培养基中独立地在35℃生长24小时。通过在10,000xg离心10分钟来采集细胞并用Butterfield’s磷酸缓冲液(PH7.2的BPB)洗涤两次。将细胞再混悬在BPB中来获得对于每一微生物大约1.0×108CFU/mL的细胞混悬液。靶接种体水平在最终受试溶液中是大约106CFU/mL。在肠炎沙门氏菌和绿脓杆菌的情况下，物种是通过倒入制备的带有粗棉布过滤器的无菌离心管洗涤的。然后将培养物压成丸，利用上述的技术洗涤并重复3次。
c)鸡(56天大)在普通商业条件下加工。
d)将细菌加入大的批次的“鸡汤”中，然后在用于每一试验的冰水中等分得到的混合物。然后将试验下的特定的消毒组合物加入到一份冰水中。每一份冰水包含每毫升104大肠杆菌(Escherichia coli)，每毫升104肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)，每毫升104绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)，每毫升104空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)，和每毫升104分别来自三种菌株的酸败细菌(单核细胞增多性李斯特杆菌(Listeria monocytogenes)和宋内氏志贺氏菌(Shigella sonnei))。
e)将鸡分别加入到10个50-加仑容器中，这些容器包含各自的处理(或对照)并将鸡放在容器中经历1.5小时冷却期。
f)在1.5小时冷却期间，每10分钟将混合物有力的搅拌。
g)在1.5小时冷却期后，将全部鸡放置在商业冰箱中储存20天。
h)在冷却处理前或冷却处理后马上对测定所有鸡的皮着色(利用Minolta Color Meter L值或亮度，a值或红和b值或黄)。
i)在第0天，从每一处理中随机选取每次处理的总共5只完整的鸡并放置在独立的无菌细菌分离器袋中，进行整只鸡漂洗(如实施例3中的描述)并将漂洗液样本放置在合适的琼脂平板上。
j)对于每一个接下去的第2，4，6，8，10，12，14，16，18，和20天，从每一处理中随机选取每次处理的总共5只完整的鸡并放置在独立的无菌细菌分离器袋中并进行整个鸡漂洗(如实施例3中的描述)并将漂洗液样本放置在合适的琼脂平板上。
k)将所有处理的琼脂平板放置在培育箱中24小时，35℃。在24小时后读平板来测定在每个板上的总计数。
这些试验的结果汇总于表17-30中。
                                            表17
水处理                              与对照比较总细菌减少百分率(处理后天数)
第0天  第2天  第4天  第6天  第8天  第10天  第12天  第14天  第16天  第18天  第20天
无(对照) -  -  -  -  -  -  -  -  -  -  -
Clorox漂白剂(20ppm) 22.5  23.1  22.2  25.2  26.0  25.7  25.9  26.5  23.2  23.12  20.5
DBDMH(10ppm) 77.8  77.3  76.8  77.1  74.6  71.9  69.2  66.2  61.9  58.5  53.7
DBDMH(20ppm) 99.5  99.4  99.2  98.5  97.3  95.1  91.2  84.3  71.2  68.0  67.2
                                            表18
水处理                                     平均皮TBA值1(处理后天数)
  第0天  第2天     第4天     第6天     第8天     第10天     第12天     第14天     第16天     第18天     第20天
无(对照) 0.14a  0.31a    0.45a    0.69a    0.88a    1.23a    1.36a    1.66a    2.08a    2.39a    3.02a
Clorox漂白(20ppm) 0.10a  0.42a  0.68a  0.72a  0.90a  1.10a  1.49a  1.73a  2.19a  2.51a  2.88a
DBDMH(10ppm) 0.20a  0.54a  0.79a  0.54a  0.76a  1.20a  1.77a  1.94a  2.33a  2.45a  2.92a
DBDMH(20ppm) 0.22a  0.36a  0.46a  0.71a  0.75a  1.22a  1.53a  1.87a  2.19a  2.68a  2.73a
1指在没有普通上标的行内是有显著性差异的(P＜0.05)，由最小显著性差异决定。
                                         表19
                      皮着色值(Minolta Color Meter)1
        平均冷却前Minolta值        平均冷却后Minolta值
  水处理 L     a     b     L     a     b
  无(对照) 62.84a   5.32a   15.42a   58.84a   5.93a  16.84a
  Clorox漂白剂(20ppm) 63.62a   5.49a   15.94a   58.84a   5.64a  16.16a
  DBDMH(10ppm) 61.55a   5.14a   15.63a   58.84a   6.09a  16.22a
  DBDMH(20ppm) 60.77a   5.69a   15.67a   58.84a   6.24a  16.37a
1指在没有普通上标的行内是有显著性差异的(p＜0.05)，通过最小显著性差异决定。
                    表20-消毒处理在第0天的作用
  有机物           消毒处理(每只鸡的平均细菌计数)2
    对照   C1orox漂白剂(20ppm)     DBDMH(10ppm)     DBDMH(20ppm)
  S.sonnei     3687     2948     845     8
  L.monocytogenes     2569     2281     528     13
  E.coli     3879     2310     861     22
  S.enteritidis     1678     1064     292     12
  P.aeruginosa     2974     2681     743     6
  C.jejuni     2276     1935     519     17
  与对照比较平均减少百分率     --     22.5％     77.8％     99.5％
                    表21-消毒处理在第2天的作用
    有机物           消毒处理(每只鸡的平均细菌计数)2
    对照   Clorox漂白剂(20ppm)     DBDMH(10ppm)     DBDMH(20ppm)
   S.sonnei     4119     3241     962     12
   L.monocytogenes     2749     2442     601     19
   E.coli     4193     2604     966     31
   S.enteritidis     1921     1191     344     18
   P.aeruginosa     3313     2889     820     9
   C.jejuni     2534     2114     573     25
  与对照比较平均减少百分率 --     23.1％     77.3％   99.4％
                    表22-消毒处理在第4天的作用
 有机物           消毒处理(每只鸡的平均细菌计数)2
    对照   Clorox漂白剂(20ppm)     DBDMH(10ppm)     DBDMH(20ppm)
 S.sonnei     4664     3528     1101     19
 L.monocytogenes     2920     2751     670     28
 E.coli     4379     3001     1050     47
 S.enteritidis     2152     1309     394     27
 P.aeruginosa     3592     3127     931     13
 C.jejuni     2830     2267     627     39
 与对照比较平均减少百分率     --     22.2％     76.8％     99.2％
                    表23-消毒处理在第6天的作用
  有机物            消毒处理(每只鸡的平均细菌计数)2
    对照   Clorox漂白剂(20ppm)     DBDMH(10ppm)     DBDMH(20ppm)
  S.sonnei     5424     3802     1288     37
  L.monocytogenes     3176     3071     741     55
  E.coli     4769     3142     1124     100
  S.enteritidis     2426     1347     433     55
  P.aeruginosa     4141     3454     1013     25
  C.jejuni     3113     2423     671     78
  与对照比较平均减少百分率     --     25.2％     77.1％     98.5％
                    表24-消毒处理在第8天的作用
  有机物          消毒处理(每只鸡的平均细菌计数)2
    对照   Clorox漂白剂(20ppm)     DBDMH(10ppm)     DBDMH(20ppm)
  S.sonnei     5969     4008     1604     76
  L.monocytogenes     3407     3474     880     107
  E.coli     5194     3438     1364     204
  S.enteritidis     2764     1519     507     104
  P.aeruginosa     4768     3798     1268     48
  C.jejuni     3353     2594     834     157
  与对照比较平均减少百分率     --     26.0％     74.6％     97.3％
              表25-消毒处理在第10天的作用
  有机物          消毒处理(每只鸡的平均细菌计数)2
    对照   Clorox漂白剂(20ppm)     DBDMH(10ppm)     DBDMH(20ppm)
  S.sonnei     6292     4415     1954     156
  L.monocytogenes     3854     3767     1096     218
  E.coli     5683     3694     1621     401
  S.enteritidis     3116     1605     616     212
  P.aeruginosa     5243     4305     1485     91
  C.jejuni     3589     2844     1043     294
  与对照比较平均减少百分率     --     25.7％     71.9％     95.1％
                 表26-消毒处理在第12天的作用
  有机物           消毒处理(每只鸡的平均细菌计数)2
    对照   Clorox漂白剂(20ppm)     DBDMH(10ppm)     DBDMH(20ppm)
  S.sonnei     6890     5030     2347     323
  L.monocytogenes     4348     4195     1335     442
  E.coli     6316     3902     2063     775
  S.enteritidis     3461     1819     740     413
  P.aeruginosa     5743     4720     1730     186
  C.jejuni     4133     3213     1309     594
  与对照比较平均减少百分率     --     25.9％     69.2％     91.2％
               表27-消毒处理在第14天的作用
  有机物          消毒处理(每只鸡的平均细菌计数)2
    对照 Clorox漂白剂(20ppm)     DBDMH(10ppm)   DBDMH(20ppm)
  S.sonnei     7768     5313     2848     657
  L.monocytogenes     4781     4755     1564     843
  E.coli     6762     4279     2581     1453
  S.enteritidis     3901     2055     919     832
  P.aeruginosa     6426     5200     2055     363
  C.jejuni     4454     3446     1551     1191
  与对照比较平均减少百分率     --     22.2％     66.2％     84.3％
                 表28-消毒处理在第16天的作用
  有机物           消毒处理(每只鸡的平均细菌计数)2
    对照   Clorox漂白剂(20ppm)     DBDMH(10ppm)     DBDMH(20ppm)
  S.sonnei     7970     6108     3513     1286
  L.monocytogenes     5263     5228     1901     1646
  E.coli     7201     4692     3005     2933
  S.enteritidis     4281     2328     1081     1711
  P.aeruginosa     6969     6005     2560     700
  C.jejuni     4898     3733     1880     2259
  与对照比较平均减少百分率     --     23.2％     61.9％     71.2％
                 表29-消毒处理在第18天的作用
  有机物          消毒处理(每只鸡的平均细菌计数)2
    对照   Clorox漂白剂(20ppm)     DBDMH(10ppm)     DBDMH(20ppm)
  S.sonnei     9004     6957     4242     1604
  L.monocytogenes     5799     5694     2221     1985
  E.coli     7725     5097     3617     3645
  S.enteritidis     4835     2613     1286     2074
  P.aeruginosa     7814     6869     3087     826
  C.jejuni     5319     3900     2359     2835
  与对照比较平均减少百分率     --     23.1％     58.5％     68.0％
              表30-消毒处理在第20天的作用
  有机物          消毒处理(每只鸡的平均细菌计数)2
    对照   Clorox漂白剂(20ppm)     DBDMH(10ppm)     DBDMH(20ppm)
  S.sonnei     9288     7409     4941     1834
  L.monocytogenes     6419     6506     2678     2238
  E.coli     8272     5635     4460     4036
  S.enteritidis     5335     2976     1513     2258
  P.aeruginosa     8604     7886     3853     908
  C.jejuni     5789     4332     2789     3059
  与对照比较平均减少百分率 --   20.5％   53.7％   67.2％
在表19-30中每一个每只鸡的平均细菌计数数据代表5只鸡的平均值。
实施例5
本研究的目的是测定漂白剂杀微生物的对照(20ppm Cl2等同物)和用1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲的杀微生物的对照对于胸脯肉和大腿肉的感官的味觉评价的作用。进行正式的受过培训的味觉评价。试验利用49-天大的鸡进行，此鸡的加工没有被外部来源的细菌感染并且是在无菌条件下进行。
在本研究中总共使用120只鸡。60只鸡作为对照组。它们在包含20ppm Cl2等同物水平的Clorox漂白剂的冰水槽中处理。其余60只鸡在相同形式的冰水槽中处理，除了冰水包含在20ppm Cl2等同物水平的DBDMH。在冰水槽中的1.5小时冷却期间，每10分钟将冰水槽的内容物用力搅拌。在1.5小时冷却期后，将所有的鸡独立地放入袋中并在商业冰箱中放置储存20天。老化后，切割独立的胸脯和大腿样本并煮至内部温度190°F。利用10名受过培训的测试小组专家来进行味道评价。使用等级系统(“1”或“2”)，其中“1”代表较好的味道样本。使用每个人的目标评价或等级的简单平均值。通过利用每一对象作为block employed delta 0.05来进行统计评价。
表31和32列出了这些味道评价的结果。
               表31-冰水槽水处理对味道偏爱的影响(胸脯肉评价)
水处理                                    摘要—味道等级1
  S1   S2   S3   S4   S5   S6   S7   S8   S9   S10   平均值2
无(20ppm Cl2等同物漂白剂对照)   2   1   1   1   2   1   1   2   1   2   1.4a
DBDMH(20ppm Cl2等同物)   1   2   2   2   1   2   2   1   2   1   1.6a
1S(人)＝受过培训的味道专门小组人数
2注：指在没有普通上标的行内是有显著性差异的(p＜0.05)，通过最小显著性差异决定。
             表32-冰水槽水处理对味道偏爱的影响(大腿肉评价)
  水处理                                         摘要—味道等级1
  S1   S2   S3   S4   S5   S6   S7   S8   S9   S10   平均值2
  无(20ppm Cl2等同物漂白剂对照)   1   2   2   1   1   2   2   2   1   2   1.6a
  DBD(20ppm Cl2等同物)   2   1   1   2   2   1   1   1   2   1   1.4a
1S(人)＝受过培训的味道专门小组人数
2注：指在没有普通上标的行内是有显著性差异的(p＜0.05)，通过最小显著性差异决定。
实施例6
本研究的目标是测定在梯度水平研究模型中，在冰水槽溶液中浸泡1.5小时和酸败20天长时期后，Clorox漂白剂和1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲(DBDMH)对于畜体细菌野生菌株的影响。在标准加工56天大的鸡后，将畜体首先浸入暖水浴中，此暖水浴包含每毫升104大肠杆菌(Escherichia coli)，每毫升104肠炎沙门氏菌(Salmonellaenteritidis)，每毫升104绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)，每毫升104空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)，和每毫升104分别来自两种菌株的酸败细菌(单核细胞增多性李斯特杆菌(Listeriamonocytogenes)和宋内氏志贺氏菌(Shigella sonnei))。然后将畜体浸入冰水槽“汤”中，此汤包含基本有机液体(血，脂肪，皮和肉粒)和各种的杀微生物剂(称作受试材料)。在PH8条件下进行这些试验(用磷酸三钠调整)。在处理前或处理后测定皮着色(利用Minolta ColorMeter L值或亮度，a值或红和b值或黄)。在20天时期内测定冷却后的皮的各种菌株细菌。测定感官评价来说明酸败时间和保存期限。在冰水槽中沙门氏菌感染后，模拟并报告USDA HACCP沙门氏菌检测。
受试材料和这些试验的试验设计汇总在表33中。
                            表33
  受试组  受试材料(冰水槽)     重复   鸡/重复
    1  无(对照)     10     12
    2  Clorox漂白剂(20ppm Cl2的等同物)     10     12
    3  DBDMH(5ppm Cl2的等同物)     10     12
    4  DBDMH(10ppm Cl2的等同物)     10     12
    5  DBDMH(15ppm Cl2的等同物)     10     12
    6  DBDMH(20ppm Cl2的等同物)     10     12
    7  DBDMH(25ppm Cl2的等同物)     10     12
在表33中列出浓度的DBDMH贮存液和DBDMH受试溶液，细菌贮存液和“鸡汤”按实施例3制备。另外，细菌肉汤处理，整个鸡的洗涤取样步骤，和用来对细菌有机物定量和定性分析的方法按照实施例3进行。
本受试组中使用的更详细的试验过程和试验设计与实施例5中的相同，除了下述例外：
a)储存在冰箱中的20天期间的温度是4°F。
b)在所有加工的鸡上观察“发肿(bloating)”度(定义为被认为可注射的皮肤区域下水或空气加入量)。
c)在每一个取样天(第0，2，4，6，8，10，12，14，16，18和20天)，利用模板和消过毒的手术刀除去从胸脯直到颈部的23.8cm2皮肤来分析从每一处理得到的10只畜体。将每一皮肤样本放入添加有15mLButterfield’s磷酸缓冲液(BPBS)的袋中并在细菌分离器袋中处理60秒。将BPBS制成10倍稀释级数混合物，并将每个20ml的两个类似的平行样本铺展在合适的平板计数琼脂上来测定总的存活的数目。将平板在35℃保温24小时。从由每个冷却和储存的结合采集的三个样本的两个测定来计算平均值。细菌数目作为合并和平均log10菌落—形成单位(CFU‘S)/平方厘米报告。
d)也在取样第0天，将从每次处理得到的剩余的110只畜体中的102只(除去所有发肿和奇怪的处理的鸡)用在实施例3中描述的取样步骤来进行“整只鸡”冲洗。记录沙门氏菌检测并作为每51只鸡的阳性沙门氏菌菌落数目和总共的百分比报告。
表34-37汇总了此受试组的结果。
                    表34
    水处理     沙门氏菌阳性样本(数目/51只)1(在冷却前鸡用沙门氏菌接种)
    无(对照)     32/51(62.74％)
    Clorox漂白剂(20ppm)     11/51(22.57％)
    DBDMH(5ppm)     7/51(13.73％)
    DBDMH(10ppm)     4/51(7.84％)
    DBDMH(15ppm)     2/51(3.92％)
    DBDMH(20ppm)     1/51(1.96％)
    DBDMH(25ppm)     0/51(0.00％)
1按照USDA HACCP标准12/51只或更少被认为是统计学上可接受的。
使用总共102只鸡来测定沙门氏菌阳性样本和测定的简单平均值。
                        表35
    水处理     鸡(每60只处理的鸡数目)1
    无(对照)     1/120(0.83％)
    Clorox漂白剂(20ppm)     0/120(0.00％)
    DBDMH(5ppm)     2/120(1.67％)
    DBDMH(10ppm)     0/120(0.00％)
    DBDMH(15ppm)     1/120(0.83％)
    DBDMH(20ppm)     0/120(0.00％)
    DBDMH(25ppm)     1/120(0.83％)
1每次处理4只或更多被认为是高度反对的。
                                    表36
    水处理            感官得分(处理后天数)1，2
    5天     10天     15天   20天
    无(对照)     5.6c     7.3c     8.2c   9.0d
    Clorox漂白剂(20ppm)     3.8b     3.6b     5.5b   7.1c
    DBDMH(5ppm)     2.4a     3.2b     3.9a   5.6a
    DBDMH(10ppm)     1.9ab     2.3a     3.4a   4.8a
    DBDMH(15ppm)     1.3a     2.1a     2.6a   4.9a
    DBDMH(20ppm)     1.1a     1.8a     2.7a   4.3a
    DBDMH(25ppm)     1.4a     2.1a     2.3a   4.6a
1非结构性新鲜的畜体内部气味感觉的连续级数范围在值1.0(最低强度)到值9.0(最高强度)之间。注：指在没有普通上标的行内是有显著性差异的(p＜0.05)，通过最小显著性差异决定。
25只或更多被认为是高度反对的。
                                    表37
  水处理                            皮肤着色1
       平均冷却前Minolta值2         平均冷却后Minolta值2
  L   a    b     L   a    b
  无(对照) 59.72a  4.34a  13.67a  51.84a  5.12a  15.27a
  Clorox漂白剂(20ppm) 60.76a  4.93a  13.74a  55.81a  5.08a  15.49a
  DBDMH(5ppm) 58.80a  4.67a  13.61a  52.68a  5.42a  15.64a
 DBDMH(10ppm) 59.97a  4.31a  13.64a  53.19a  5.69a  15.75a
 DBDMH(15ppm) 58.43a  4.84a  13.81a  54.21a  5.55a  15.64a
 DBDMH(20ppm) 58.54a  4.99a  13.67a  53.74a  5.49a  15.80a
 DBDMH(25ppm) 58.97a  4.68a  13.50a  54.25a  5.63a  15.76a
1注：指在没有普通上标的行内是有显著性差异的(p＜0.05)，通过最小显著性差异决定。
2皮肤着色(Minolta Color Meter L值或亮度，a值或红和b值或黄)上述试验的结果，即冰水槽处理对假单胞菌属种在鸡皮肤上生长的影响表示在图1中。图2是上述冰水槽处理对所有需氧细菌在鸡皮上生长的影响的试验的结果。
实施例7
进行研究来测定本发明的一些杀微生物的化合物和次氯酸钠(当用作畜体漂洗剂)的作用。在此研究中使用的本发明的杀微生物剂是1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲(DBDMH)，N，N’-溴氯-5，5-二甲基乙内酰脲(BCDMH)和Stabrom909杀生物剂(Albemarle公司)，从氯化溴和氨基磺酸阴离子生产的浓缩碱性水溶液(SSBC)。
标准加工56天大的鸡后，将畜体首先浸入暖水浴中，此暖水浴包含每毫升104大肠杆菌(Escherichia coli)，每毫升104肠炎沙门氏菌(Salmonella enteritidis)，每毫升104绿脓杆菌(Pseudomonasaeruginosa)，每毫升104空肠弯曲杆菌(Campylobacter jejuni)，和每毫升104分别来自两种菌株的酸败细菌(单核细胞增多性李斯特杆菌(Listeria monocytogenes)和宋内氏志贺氏菌(Shigella sonnei))。然后将畜体浸入冰水槽“汤”中，此汤包含基本有机液体(血，脂肪，皮和肉粒)和各种的杀微生物剂(称作受试材料)。在PH8条件下进行这些整只鸡细菌计数试验。利用Minolta Color Meter L值或亮度，a值或红和b值或黄来测定试验化合物对皮肤着色的影响。在20天时期后测定冷却后皮肤的各种菌株细菌。酸败，利用感觉气味作为模型，测定时间允许来产生腐烂的/类似氨的气味。在冰水槽中沙门氏菌感染后，模拟并报告USDA HACCP沙门氏菌检测。表38描述了试验材料剂量和整个的受试组设计。
                             表38
  受试组     受试材料(冰水槽)     重复   鸡/重复
    1     无(对照)     10     12
    2     Clorox漂白剂(20ppm Cl2的等同物)在冷却期间     10     12
    3     DBDMH(20ppm Cl2的等同物)在冷却期间     10     12
    4     BCDMH(20ppm Cl2的等同物)在冷却期间     10     12
    5     SSBC畜体喷洒(3％液体冷却前应用)     1     10
按照实施例3制备DBDMH和BCDMH贮存液和稀释的受试溶液(20ppmCl2等同物)，细菌贮存液和“鸡汤”，除了Stabrom909杀生物剂的浓度是通过在应用前添加30ml/L水稀释的。将这一稀释液喷洒到鸡上(内部和外部)，喷洒量为每只鸡200ml。另外，细菌肉汤处理，整只鸡的洗涤取样步骤，用于细菌有机物定量和定性分析的方法按照实施例3进行。
关于使用的试验时间的细节和在这些试样中使用的详细的试验设计如实施例6所述。唯一的区别是：
a)对于第5受试组的鸡，当畜体仍旧是温热时，利用喷雾手持喷嘴向10只鸡每只的内部和外部都喷洒200ml 3％的Stabrom 909杀生物剂(SSBC)。预先的利用染料的质量控制试验已经确定使用200ml液体喷洒剂能够完全覆盖畜体。允许喷洒剂在温暖的畜体上停留60秒。
b)也在取样第0天对从每次处理得到的剩余的110只畜体中的102只的处理包括“整只鸡”洗涤和沙门氏菌检测，这些全都如实施例6所述，但只应用于受试组1-4(参见表38)。
表39-42汇总了此受试组的结果。此实施例的冰水槽处理对假单胞菌属种在鸡皮肤上生长的影响表示在图3中。图4是此实施例的冰水槽处理对所有需氧细菌在鸡皮上生长的影响的试验的结果。
                         表39
    水处理   沙门氏菌阳性样本(数量51)1在冷却前鸡用沙门氏菌接种
    无(对照)     21/51(41.18％)
    Clorox漂白剂(20ppm)     8/51(15.68％)
    DBDMH(20ppm Cl2的等同物)在冷却期间     1/51(1.96％)
    BCDMH(20ppm Cl2的等同物)在冷却期间     6/51(11.76％)
1按照USDA HACCP标准12/51只被认为是统计学可接受的。总共102只鸡被用来测定沙门氏菌阳性样本和测定简单平均值。
                        表40
    水处理 发肿(数目/60只处理的鸡)1
    无(对照)     0/120(0.00％)
    Clorox漂白剂(20ppm)     0/120(0.00％)
    DBDMH(20ppm Cl2的等同物)在冷却期间     0/120(0.00％)
    BCDMH(20ppm Cl2的等同物)在冷却期间     0/120(0.00％)
1每次处理4只或更多被认为是高度反对的。
                                表41
    水处理            感官得分(处理后天数)1，2
  5天   10天   15天   20天
    无(对照)   2.4b   4.8c   6.9c   9.0d
    Clorox漂白剂(20ppm)   1.3ab   2.4b   4.6b   6.8c
    DBDMH(20ppm Cl2的等同物)在冷却期间   0.6a   1.2a   3.2a   3.4a
    BCDMH(20ppm Cl2的等同物)在冷却期间   1.4ab   1.8ab   2.7a   4.8b
1非结构性新鲜的畜体内部气味感觉的连续级数范围在值1.0(最低强度)到值9.0(最高强度)之间。注：指在没有普通上标的行内是有显著性差异的(p＜0.05)，通过最小显著性差异决定。
25只或更多被认为是高度反对的。
                                            表42
                                 皮肤着色1
         平均冷却前Minolta值2        平均冷却后Minolta值2
  水处理  L   a   b   L   a     b
  无(对照) 52.61a  3.25a  11.43a  47.21a  4.24a   12.44a
  Clorox漂白剂(20ppm) 52.76a  3.32a  11.84a  47.43a  4.85a   12.67a
  DBDMH(20ppm Cl2的等同物)在冷却期间 52.23a  3.13a  11.63a  48.02a  4.69a   12.47a
  BCDMH(20ppm Cl2的等同物)在冷却期间 52.11a  3.82a  11.26a  46.93a  4.44a   12.60a
  SSBC畜体喷洒(3％液体冷却前应用) 52.61a  3.67a  11.15a  47.03a  4.51a   12.55a
1注：指在没有普通上标的行内是有显著性差异的(p＜0.05)，通过最小显著性差异决定。
2皮肤着色(Minolta Color Meter L值或亮度，a值或红和b值或黄)。
3所有处理皮着色是在120只鸡上进行的，除了SSBC只用了10只鸡。
已经进行了许多的试验来证明一些杀生物剂在根除或控制在禽类加工系统中存在的各种的细菌种类中的微生物灭杀的效果。
此系列试验中的一种涉及测定对大肠杆菌细菌的微生物学的控制。在每一情况下，利用AOAC试验方法以相同的方式进行比较试验。此试验包括将微生物的培养物暴露在各种浓度的受试溶液前，此受试溶液是由受试化合物的水贮存液制备的。在不同的时间间隔受试混悬液中的卤素被化学抵消，变化的细菌残留量通过放置在营养琼脂上并在37℃保温2天来计算。结果以Log10菌落形成单位(CFU)表示。在实验中测定的化合物的浓度需要在30秒内获得完全灭杀(也就是没有存活的细菌残留)。
表43汇总了在实验中获得的数据，分别利用1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲(DBDMH)和N，N’-溴氯-5，5-二甲基乙内酰脲(BCDMH)，并且在其中每一种情况下使用的微生物都是大肠杆菌。可以看到1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲在1毫克溴(即Br2)/每升水处通过了试验，证据是在30秒内完全灭杀，然而N，N’-溴氯-5，5-二甲基乙内酰脲需要2毫克溴(即Br2)/每升水来达到在30秒内完全灭杀。
             表43-抗大肠杆菌有效性
  Br2浓度mg/L     接触时间     Log10CFU利用DBDMH复原    Log10CFU利用DBDMH复原
0.5mg/L     30秒   ＞4.48   ＞4.48
    1分钟     1.70     4.46
    2分钟     0     1.65
    3分钟     0     0
    4分钟     0     0
    5分钟     0     0
    10分钟     0     0
    30秒     0   ＞4.48
    1分钟     0     0.7
    2分钟     0     0
1.0mg/L     3分钟     0     0
    4分钟     0     0
    5分钟     0     0
    10分钟     0     0
2.0mg/L     30秒     0     0
    1分钟     0     0
    2分钟     0     0
    3分钟     0     0
    4分钟     0     0
    5分钟     0     0
    10分钟     0     0
表44汇总了在试验中获得的数据，分别利用1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲(DBDMH)和N，N’-溴氯-5，5-二甲基乙内酰脲(BCDMH)，并且在其中每一种情况下使用的微生物都是抗肠道球菌faecium。表44显示1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲在1毫克溴(即Br2)/每升水处通过了试验，证据是在30秒内完全灭杀，然而N，N’-溴氯-5，5-二甲基乙内酰脲需要2毫克溴(即Br2)/每升水来达到在30秒内完全灭杀。
                 表44-抗肠道球菌FAECIUM有效性
  Br2浓度mg/L     接触时间     Log10CFU利用DBDMH复原     Log10CFU利用DBDMH复原
0.5mg/L     30秒     4.32   ＞4.48
    1分钟     2.36     3.53
    2分钟     0.00     2.63
    3分钟     0.00     0.00
    4分钟     0.00     0.00
    5分钟     0.00     0.00
    10分钟     0.00     0.00
1.0mg/L     30秒     0.00   ＞4.48
    1分钟     0.00     2.38
    2分钟     0.00     0.00
    3分钟     0.00     0.00
    4分钟     0.00     0.00
    5分钟     0.00     0.00
    10分钟     0.00     0.00
2.0mg/L     30秒     0.00     0.00
    1分钟     0.00     0.00
    2分钟     0.00     0.00
    3分钟     0.00     0.00
    4分钟     0.00     0.00
    5分钟     0.00     0.00
    10分钟     0.00     0.00
表45汇总了在MBEC Biofilm Technologies，Inc.进行的试验得到的试验结果。卡尔加里，加拿大在各种杀生物剂在生物膜移除上的影响。试验程序，在卡尔加里大学发展，利用一种装置，其允许在仔细地控制条件下的96个相同的生物膜的生长。此装置由两部分容器构成，此容器由相对于底部平板较高的包含96个胚栓的密封的上部平板组成。底部平板可以由槽(用于生物膜生长)或标准96-孔板(用于杀生物剂作用)构成。生物膜在96个胚栓上生长。此装置已经被用作评价对于抗生素和杀生物剂对于生物膜的效应的通用方法。在这一点上见H.Ceri，等，“TheMBEC Test：A New In Vitro Assay Allowing Rapid Screening forAntibiotic Sensitivity of Biofilm”，Proceedings of the ASM，1998，89，525；Ceri，等.，″Antifungal and Biocide Susceptibility testingof Candida Biofilms using the MBEC Device″，Proceedings of theInterscience Congerence on Antimicrobial Agents and Chemotherapy，1998，38，495；和H.Ceri，等.，″The Calgary Biofilm Device：A NewTechnology for the Rapid Determination of AntibioticSusceptibility of Bacterial Biofilms″，Journal of ClinicalMicrobiology，1999，37，1771-1776。
利用上述试验程序和试验装置评价了六种杀生物剂系统。其中五种系统是氧化型杀生物剂，即氯(来自NaOCl)，卤素(来自NaOCl+NaBr)，卤素(来自BCDMH)，溴(来自DBDMH)和氯(来自三氯雷尿酸)，所有都以溴(Br2)mg/L表示，所以所有的试验结果都在相同的基础上。第6种杀生物剂是戊二醛，非—氧化型杀生物剂。
这些杀生物剂系统被用来攻击假单胞菌aeruginosa(ATCC 15442)。这是一种革兰氏阴性细菌，已经发现其在许多水系统中以微生物粘液形式普遍存在。在这一点上见J.W.Costerton和H.Anwar，″Pseudomonasaeruginosa：The Microbe and Pathogen″，Pseudomonas aeruginosaInfections and Treatment，A.L.Baltch和R.P.Smith编，MarcelDekker出版社，纽约，1994.在禽类加工领域，S.Notemnms，J.Dormans，和G.C.Mead，Biofouling，1991，第5卷，第21-36页，报导了通过利用扫描电子显微镜在禽类屠宰房中观察生物膜。
在表45中列出的MBEC(最小生物膜根除浓度)结果对应于在实验中使用的1小时杀生物剂接触时间。为包含卤素的杀生物剂给出的值按照溴(Br2)mg/L表示。作为活性成分的戊二醛的数据是按照mg/L表示。数据显示在MBEC是溴(Br2)1.4mg/L这一条件下，相对于任何其他受试的杀生物剂，BDBMH是更有效的。实际上，与BCDMH需要的总卤素(以Br2表示)相比，只要略多于来自BDBMH的卤素中的一半就能移去生物膜。
                 表45-抗假单胞菌AERUGINOSA生物膜有效性
    杀生物剂系统     MBEC     MBEC平均值
    氯(来自NaOCl)     5.0，2.5     3.8
    卤素(来自NaOCl+NaBr)     2.5，2.5     2.5
    卤素(来自BCDMH)     2.5，2.5     2.5
    溴(来自DBDMH)     1.4，1.4     1.4
  氯(来自三氯雷尿酸)     2.6，1.3     2.0
    戊二醛     50，50     50
在另一受试组中，其结果在图5-10中描述。试验中利用了一些本发明的溴基杀微生物剂来说明它们的在根除或控制异养性平板计数细菌，也就是各种未经确认的物种的天然发生的致病菌的混合物中的有效性。这些细菌既以生物膜形式也以浮游生物形式被攻击。
在这些实验中利用的试验条件包括使用由三个平行的透明PVC取样管组成的仪器。这些管被用作生物膜(也就是固着的或表面附着的)细菌样本收集；一个作为对照管，一个是相对低杀生物剂浓度，第三个是较高的杀生物剂浓度。在每一种情况下，杀生物剂的攻击分为三个阶段。第一个是14天的接种。接下来是48小时消毒期。最后提供2星期恢复期。实验中的杀生物剂是slug-分剂量的并且在第1小时暴露过程中，调整浓度来达到想要的浓度水平。
自然生长的异氧性平板计数(HPC)细菌的来源是沉淀物，并且相关的水收集自医院的循环热水系统。将过滤筒插入医院水系统中并且在约两个月后在过滤器上收集适宜量的沉淀物。然后收获采集的过滤物/水混悬液来培养。杀生物剂攻击试验的接种体由脱氯自来水，HPC-培养的贮存液和营养供给溶液组成。在试验开始前将接种体在37℃保温1-14天。将接种体与另外脱氯自来水一起引入有三个平行的透明PVC取样管组成的仪器。将这一混合物通过仪器以3.2加仑/分钟的速度间歇式地再回流1-14天来产生坚固的生物膜和浮游生物的HPC细菌种群。
这些细菌的样本是在杀生物剂攻击前在14天接种期的末尾收集的。然后在每一试验中，HPC细菌被特定浓度的溴基杀生物剂攻击，在1，2，3，12和48-小时时间间隔取样。这些样品是通过拭擦透明PVC取样管的预先测量的部分(长度，17/32英寸)的内部表面取得的。在放到平板上前，将拭擦物在含有0.1ml中和剂(用来除去残留的溴)的5ml去离子水中形成涡流1分钟。并行地，取水样来列举浮游生物的HPC细菌。
在48小时杀生物剂攻击期间，步骤包括提供两星期恢复期。提供这一恢复期的目的是测定在循环水中多快存活的HPC细菌会仍旧以生物膜和浮游生物形式存在。因此，将循环水从试验装置中排干，并将装置中重新充满热—无菌的自来水，此自来水也允许像前面一样间歇地循环。在7天和14天后，将装置重新取样，以如前面做的相同的方式根除生物膜和浮游生物的HPC细菌。
这些试验的结果以图的形式显示在图5到10中。在图5的试验中分别使用在0.5ppm和2ppm的由氨基磺酸盐—稳定的氯化溴衍生得到的活性溴种类(Stabrom909杀生物剂，Albemarle公司)，都作为溴，来攻击与生物膜有关的HPC细菌。另外，以相同的方式进行对照，除了不应用杀生物剂。我们能看到在较高的溴浓度，在三小时内根除了几乎99％的与生物膜有关的HPC细菌，然而当0.5ppm溴时，根除约95％的HPC细菌。也能看到在活性溴的两个浓度水平，在48小时杀生物剂攻击阶段只发生非常少的生物膜HPC的恢复。而且，甚至在整个两星期恢复期后，HPC生物膜细菌仍旧没有恢复到它们的原始的种群水平。
在图6中在试验里使用的活性溴种类以及它们的浓度与在图5中的一致，并且使用对照。然而，在这些试验中HPC细菌是浮游生物形式的。能够看到在较高的溴浓度，在三小时内超过90％的浮游生物的HPC细菌被根除，并且在0.5ppm溴时，大约85％浮游生物的HPC细菌被根除。这些试验结果也说明甚至在这些活性溴的低浓度，在两星期恢复期内，浮游生物的HPC细菌也不能恢复到与它们起初水平相等的种群。
图7中的结果涉及与图5的试验相比较高浓度的从氨基磺酸盐—稳定的氯化溴衍生得到的活性溴种类(Stabrom909杀生物剂)。特别地，这一杀微生物剂分别在4ppm和10ppm使用，都作为溴，来攻击与生物膜有关的HPC细菌。另外，以相同的方式进行对照，除了不应用杀生物剂。能够看到在较高的溴浓度，在三小时内差不多99.9％的与生物膜有关的HPC细菌被根除。在4ppm溴时，差不多99.9％的HPC细菌在三小时内被根除。可以看到，在活性溴浓度的两个水平，在48小时攻击期间只发生很少的生物膜HPC细菌恢复。而且，甚至在完整的两星期恢复期后，HPC生物膜细菌仍旧不能恢复到与他们的原始水平相近的程度。
在图8中使用的活性溴种类以及它们的浓度与在图7中的一致，并且使用对照。然而，在这些试验中HPC细菌是浮游生物形式的。能够看到溴的两个浓度，在三小时内超过99％的浮游生物的HPC细菌被根除。也能看到，在48小时杀生物剂攻击期间，在任何一个使用了溴杀生物剂的实验中，很少量的可存活的浮游生物的HPC细菌的恢复仍旧保持，很难开始发生。这些试验结果说明，为了使浮游生物的HPC细菌恢复种群到与它们的原始水平相接近的程度，需要大大多于两个星期的恢复期。
图9中的试验结果涉及使用1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲(Albrom100杀生物剂，Albemarle公司)作为活性溴种类来源。在这些试验中使用的杀微生物剂在0.5ppm和5ppm水平作为溴来攻击与生物膜相关的HPC细菌。也以相同的方式进行对照除了不应用杀生物剂。可以从图9中看到在较高的溴浓度，在12小时内差不多99.9％的HPC细菌被根除。在0.5ppm作为溴，在三小时内超过99％HPC细菌被根除。可以看到在48小时杀生物剂攻击期间，在使用溴杀生物剂的两个实验中，仍旧存在的很少量的存活的HPC生物膜开始恢复。这些实验结果也说明为使HPC细菌恢复种群到与它们的初始水平相近的程度，需要大大多于两星期的时间。
在图10中使用的活性溴种类以及它们的浓度与在图9中的一致，并且使用对照。然而，在这些试验中HPC细菌是浮游生物形式的。能够看到在较高的溴浓度，在十二小时内差不多99.9％的浮游生物的HPC细菌被根除。在0.5ppm作为溴和在三小时内，差不多99％的浮游生物HPC细菌被根除。也能看到，在48小时杀生物剂攻击期间，在使用溴杀生物剂的两个实验中，仍旧存在的很少量的存活的浮游生物的HPC细菌开始恢复。这些试验结果也说明，为了使浮游生物的HPC细菌恢复种群到与它们的原始水平相接近的程度，需要多于两个星期的恢复期。
在本发明的实践中，利用不同杀微生物剂的消毒步骤的结合，其中至少一种是本发明的杀微生物剂，优选一种或多种本发明的溴基杀微生物剂，能证明有效。例如，本发明的杀微生物剂，优选本发明的溴基杀微生物剂，能被应用于或与不同的与禽类加工表面相关的表面接触，例如管道，槽(例如，烫槽，冰水槽)，传送带或传送线，并且禽类畜体本身能用抗微生物剂处理，例如包含羧酸(醋酸或乳酸)和/或过氧羧酸(例如过醋酸，过氧蛋白磺酸，过氧癸酸或类似物)的溶液或凝胶。这种羧酸的使用的描述例如见US专利6113963。这种结合操作的结果是高度有效的消毒。实际上，可以想到与迄今通常已经获得的相比，这种结合操作会导致更大程度的微生物的根除，特别是当使用的溴基杀生物剂是1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲且使用的羧酸是过醋酸时。甚至，这些杀生物剂的结合可能是协同的。
按照本发明在结合操作中能使用的另一种杀微生物剂是磷酸三钠，一种按照Capita et al.，Meat Science，2000，55(4)，471-474的物质，作为在生禽类畜体上除去沙门氏菌的辅剂已经由USDA批准。在结合操作中磷酸三钠和一种或多种本发明的杀微生物剂被应用于畜体，优选一种或多种本发明的溴基杀微生物剂，被用在与禽类加工有关的设备，装置，仪器的消毒中。也按照本发明，结合操作可以将二氧化氯处理与本发明的杀微生物剂的使用一起利用。Smith，Meat Processing，1996，35(10)，47说明二氧化氯已经被USFDA批准用在禽类加工水中，并且在本发明的实践中本发明的一种或多种杀微生物剂，优选一种或多种本发明的溴基杀微生物剂被用在禽类加工中的使用的各种设备，装置和/或仪器的消毒中，并且二氧化氯被用来消毒至少一些禽类加工水。
可以执行的按照本发明的结合操作的另一种方式包括向禽类的消化道施用合适的生物的病原体—控制剂，例如在禽类的饮用水中加入这种生物剂或在禽类的饲料中加入这种生物剂。可以以这种方式使用的例证性的生物的病原体—控制剂包括在US专利6083500中描述的特定的大肠杆菌菌株。因此，在本发明的实践中，将这种生物的病原体—控制剂提供给禽类通过饮水和/或吃食来消耗，本发明的至少一种杀生物剂的杀微生物有效量的水溶液，其优选至少一种本发明的溴基杀微生物剂，被用于在禽类加工中使用的装置、仪器、设备和/或水，和/或在禽类加工中得到的畜体和/或部分畜体的消毒。
另一结合操作包括(i)用在US专利6172040B1中描述的固定不动的乳铁传递蛋白抗微生物剂来处理畜体并且(ii)消毒所有或部分仪器、装置、设备和/或水，通过将它们与本发明的至少一种杀微生物有效量的杀微生物剂的水溶液接触，优选至少一种本发明的溴基杀微生物剂。
适用于分配本发明的杀微生物剂的自动化的分配设备在文献中已有描述，并且至少一些在市场上有售。作为对这些设备的参考，例如见US专利5683724，其中描述了自动化的分配系统。
虽然化学家明白当与溶液或介质或其类似物有关的“水的”的含义，但是为了可能会在专业上进行超越所使用的每个词来诡辩的那些律师的利益，可能需要对什么是“水的”的含义进行说明。形容词“水的”指溶液或介质或任何其它形容词修饰的名词，可以是高纯度的或普通纯度的水(例如从龙头中流出的水)。既然我们涉及食品加工，能够解释一个人不会去用下水道的水或包含致命剂量毒药(例如氰化物)的水。而且天然—发生的痕量不纯物能存在于，假设，通常适于饮用的水，例如普通井水或市政用水中，形容词“水的”也允许在水中存在可溶解的盐，这些盐是在水中形成溴基杀生物剂的过程中形成的，例如通过在高碱性的水溶液中氯化溴和氨基磺酸钠之间的反应。另外，“水的”允许存在小量无毒无害、水溶性的有机溶剂，例如可用作1，3-二卤素-5，5-二烷基乙内酰脲溶剂的乙醇。“水的”也允许在水中存在在水中能溶解量的卤素基杀微生物剂，加上任何可能在反应后残留的溶解的反应物。水中也包括一些原子，这些原子是从反应发生的容器中溶解出来的，加上在水中可以发现它们的方式的产生空气的不纯物。在这里的观点是术语“水的”不限定介质或溶剂是绝对的纯水——水溶液或介质或其类似物可能包含在特定的条件下包括当使用普通正常意义时正常存在的和/或有理由认为存在的物质。
在此文献中无论何处通过化学名称或结构式提到的化合物，无论以单数或以复数提及，在与其它通过化学名称或化学类型提到的另一种物质(例如，另一种成分或溶剂)接触前被认为是存在的。它与什么化学药品变化无关，如果一些，在得到的混合物或溶液中发生，这种变化是在按照本公开要求的条件下将指定的物质结合在一起的天然结果。举例，短语“至少一种1，3-二卤素-5，5-二烷基乙内酰脲”和有类似意思的短语表示在与水性介质例如水接触前，提及的至少一种1，3-二卤素-5，5-二烷基乙内酰脲是具体的1，3-二卤素-5，5-二烷基乙内酰脲。因此此短语是提及溶液的简单的、明确的方式，并没有暗示或意味着化学药品在水中存在不变化。发生的变化是将这些物质结合在一起的天然的结果并且因此不需要进一步的详细的说明。
尽管权利要求也可能以现在时态(例如“包括(comprises)”或“是(is)”)提及物质，但是对于此物质的参考是在它第一次与本发明公开的一种或多种其它的物质接触、混合(blended)或混合(mixed)前，它是存在的。
可能要另外说明的例外是，冠词“a”或“an”如果或在这里使用时不是用来限制，并且不应解释为将说明书或权利要求限制到冠词所指的单个的要素。更合适的，冠词“a”和“an”如果和在这里使用时指一种或多种这样的要素，除非正文另外说明。
本发明容许在附加的权利要求书的实质和范围内的许多变化。

Claims (39)

1.一种改进的禽类加工方法，该方法包括用卤素基杀微生物剂消毒这类加工中使用的设备、仪器、装置和/或水，以及/或者由这类加工方法获得的禽类的畜体和/或部分，所述杀微生物剂是：
(I)一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是(a)溴、氯或氯化溴，或者其任意两种或全部三种，和(b)水溶性来源的氨基磺酸根阴离子在含水介质中的衍生产品；或者
(II)一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种1，3-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品，其中一个卤原子是氯原子且另一个是氯或溴原子，并且其中各个烷基独立地包含1至约4个碳原子；或者
(III)一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品，其中的一个烷基是甲基，另一个烷基包含1至约4个碳原子；或者(IV)(I)、(II)和(III)的任意两种或多种的组合。
2.权利要求1的改进方法，其中使用的杀微生物剂包括杀微生物量的一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是(a)溴、氯或氯化溴，或者其任意两种或全部三种，和(b)水溶性来源的氨基磺酸根阴离子在含水介质中的衍生产品。
3.权利要求1的改进方法，其中使用的杀微生物剂包括杀微生物量的一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是(a)溴或氯化溴，或者其二者，和(b)水溶性来源的氨基磺酸根阴离子在含水介质中的衍生产品。
4.权利要求1的改进方法，其中使用的杀微生物剂包括杀微生物量的一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种1，3-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品，其中一个卤原子是氯原子且另一个是氯或溴原子，并且其中各个烷基独立地包含1至约4个碳原子。
5.权利要求1的改进方法，其中使用的杀微生物剂包括杀微生物量的一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种N，N’-溴氯-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品，其中的各个烷基独立地包含1至约4个碳原子。
6.权利要求1的改进方法，其中使用的杀微生物剂包括杀微生物量的一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种N，N’-溴氯-5，5-二甲基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品。
7.权利要求1的改进方法，其中使用的杀微生物剂包括杀微生物量的一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种N，N’-溴氯-5，5-二烷基乙内酰脲和至少一种1，3-二氯-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品，其中前者的乙内酰脲中各个烷基独立地包含1至约4个碳原子，后者的乙内酰脲中各个烷基独立地包含1至约4个碳原子。
8.权利要求1的改进方法，其中使用的杀微生物剂包括杀微生物量的一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种N，N’-溴氯5，5-二甲基乙内酰脲和1，3-二氯-5-乙基-5-甲基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品。
9.权利要求1的改进方法，其中使用的杀微生物剂包括杀微生物量的一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品，其中的一个烷基是甲基，另一个烷基包含1至约4个碳原子。
10.权利要求1的改进方法，其中使用的杀微生物剂包括杀微生物量的一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是1，3-二溴-5-异丁基-5-甲基乙内酰脲、1，3-二溴-5-正丙基-5-甲基乙内酰脲或1，3-二溴-5-乙基-5-甲基乙内酰脲或者它们的任意两种或全部三种在含水介质中的衍生产品。
11.权利要求1的改进方法，其中使用的杀微生物剂包括杀微生物量的一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少两种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲(III)在含水介质中的衍生产品，其中一种是1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲。
12.权利要求1的改进方法，其中使用的杀微生物剂包括杀微生物量的一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是1，3-二溴-5，5二甲基乙内酰脲和1，3-二溴-5-乙基-5-甲基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品。
13.权利要求1的改进方法，其中使用的杀微生物剂包括杀微生物量的一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是1，3-二溴-5，5二甲基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品。
14.改进的禽类加工方法，该方法包括用卤素基杀微生物剂消毒这类加工中使用的设备、仪器、装置和/或水，以及/或者由这类加工方法获得的禽类的畜体和/或部分，所述杀微生物剂包括：(i)一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，所述卤素类物质由溴、氯或氯化溴，或者它们的任意两种或全部三种，与水溶性来源的氨基磺酸根阴离子在水或含水介质中的反应获得；或者(ii)至少一种1，3-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲的杀微生物水溶液，其中的一个卤原子是氯原子且另一个是氯或溴原子，并且其中各个烷基独立地包含1至约4个碳原子；或者(iii)至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲的杀微生物水溶液，其中的一个烷基是甲基，另一个烷基包含1至约4个碳原子；或者(iv)(i)、(ii)和(iii)的任意两种或多种的组合。
15.权利要求14的改进方法，其中使用的杀微生物剂包括杀微生物量的一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，所述卤素类物质由溴、氯或氯化溴，或者它们的任意两种或全部三种，与水溶性来源的氨基磺酸根阴离子在水或含水介质中的反应获得。
16.权利要求15的改进方法，其中所述一种或多种活性卤素类物质由溴或氯化溴，或者其二者，与水溶性来源的氨基磺酸根阴离子在水或含水介质中的反应获得。
17.权利要求14的改进方法，其中使用的杀微生物剂包括杀微生物量的至少一种N，N’-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲的杀微生物水溶液，其中的一个卤原子是氯原子且另一个是氯或溴原子，并且其中各个烷基独立地包含1至约4个碳原子。
18.权利要求17的改进方法，其中所述至少一种N，N’-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲是至少一种N，N’-溴氯-5，5-二烷基乙内酰脲，其中各个烷基独立地包含1至约4个碳原子。
19.权利要求18的改进方法，其中所述N，N’-溴氯-5，5-二烷基乙内酰脲是N，N’-溴氯-5，5-二甲基乙内酰脲。
20.权利要求17的改进方法，其中所述至少一种N，N’-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲是至少一种N，N’-溴氯-5，5-二烷基乙内酰脲，其中各个烷基独立地包含1至约4个碳原子；和至少一种1，3-二氯-5，5-二烷基乙内酰脲，其中各个烷基独立地包含1至约4个碳原子。
21.权利要求20的改进方法，其中所述N，N’-溴氯-5，5-二烷基乙内酰脲是N，N’-溴氯-5，5-二甲基乙内酰脲并且所述1，3-二氯-5，5-二烷基乙内酰脲是1，3-二氯-5-乙基-5-甲基乙内酰脲。
22.权利要求14的改进方法，其中使用的杀微生物剂包括杀微生物量的至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲的杀微生物水溶液，其中的一个烷基是甲基且另一个烷基包含1至约4个碳原子。
23.权利要求22的改进方法，其中所述至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲是1，3-二溴-5-异丁基-5-甲基乙内酰脲、1，3-二溴-5-正丙基-5-甲基乙内酰脲、1，3-二溴-5-乙基-5-甲基乙内酰脲或者其两种或全部三种的组合。
24.权利要求22的改进方法，其中所述至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲是至少两种所述1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲的混合物，其中一种是1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲。
25.权利要求22的改进方法，其中所述至少一种1，3-二溴-5，5二烷基乙内酰脲是1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲和1，3-二溴-5-乙基-5-甲基乙内酰脲的混合物。
26.权利要求22的改进方法，其中所述至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲是1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲。
27.权利要求1-26任一项的改进方法，其中被消毒的设备、仪器、装置和/或水，以及/或者由这类加工方法获得的禽类的畜体和/或部分之中或之上具有至少一种大肠杆菌、肠炎沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌、空肠弯曲杆菌、结肠弯曲杆菌、红嘴鸥弯曲杆菌、单核细胞增多性李斯特杆菌、荧光假单胞菌、绿脓杆菌、屎肠球菌和金黄色葡萄球菌。
28.一种屠宰禽类的改进方法，该方法包括其中禽类畜体或其部分用水洗涤的步骤，该改进包括将有效提供杀微生物活性量的卤素基杀微生物剂引入所述水中，所述杀微生物剂以下列形式被引入：
(I)一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是(a)溴、氯或氯化溴，或者其任意两种或全部三种，和(b)水溶性来源的氨基磺酸根阴离子在含水介质中的衍生产品；或者
(II)(A)至少一种1，3-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲，其中一个卤原子是氯原子且另一个是氯或溴原子，并且其中各个烷基独立地包含1至约4个碳原子，或者(B)一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种1，3-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品，其中一个卤原子是氯原子且另一个是氯或溴原子，并且其中各个烷基独立地包含1至约4个碳原子；或者(C)(A)和(B)二者；或者
(III)(D)至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲，其中的一个烷基是甲基，另一个烷基包含1至约4个碳原子，或者(E)一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品，其中的一个烷基是甲基，另一个烷基包含1至约4个碳原子；或者(F)(D)和(E)二者，或者(IV)(I)、(II)和(III)的任意两种或多种的组合。
29.权利要求28的改进方法，其中所述杀微生物剂包括(A)至少一种1，3-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲，其中一个卤原子是氯原子且另一个是氯或溴原子，并且其中各个烷基独立地包含1至约4个碳原子，或者(B)一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种1，3-二卤代-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品，其中一个卤原子是氯原子且另一个是氯或溴原子，并且其中各个烷基独立地包含1至约4个碳原子；或者(C)(A)和(B)二者。
30.权利要求28的改进方法，其中所述杀微生物剂包括(G)至少一种N，N’-溴氯-5，5-二烷基乙内酰脲，其中各个烷基独立地包含1至约4个碳原子，或者(H)一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种N，N’-溴氯-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品，其中各个烷基独立地包含1至约4个碳原子，或者(I)(G)和(H)二者。
31.权利要求28的改进方法，其中所述杀微生物剂包括(J)至少一种N，N’-溴氯-5，5-二甲基乙内酰脲，或者(K)至少一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种N，N’-溴氯-5，5-二甲基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品，或者(L)(J)和(K)二者。
32.权利要求28的改进方法，其中所述杀微生物剂包括(D)至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲，其中的一个烷基是甲基且另一个烷基包含1至约4个碳原子，或者(E)至少一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品，其中的一个烷基是甲基且另一个烷基包含1至约4个碳原子，或者(F)(D)和(E)二者。
33.权利要求28的改进方法，其中所述杀微生物剂包括(M)至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲，其选自1，3二溴-5，5-二甲基乙内酰脲、1，3-二溴-5-乙基-5-甲基乙内酰脲、1，3-二溴-5-正丙基-5-甲基乙内酰脲和1，3-二溴-5-异丁基-5-甲基乙内酰脲，或者(N)至少一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品，所述乙内酰脲选自1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲、1，3-二溴-5-乙基-5-甲基乙内酰脲、1，3-二溴-5-正丙基-5-甲基乙内酰脲和1，3-二溴-5-异丁基-5-甲基乙内酰脲，或者(O)(M)和(N)二者。
34.权利要求28的改进方法，其中所述杀微生物剂是(P)1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲，或者(Q)至少一种或多种活性卤素类物质的杀微生物水溶液，该溶液是1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲在含水介质中的衍生产品，或者(P)和(Q)二者。
35.一种屠宰禽类的改进方法，该方法包括其中禽类畜体或其部分用水洗涤的步骤，该改进包括将有效提供杀微生物活性量的1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲以固体形式或者以1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲的杀微生物溶液或浆状物形式引入所述水中。
36.权利要求33、34或35的改进方法，其中所述要洗涤的畜体或其部分之中或之上具有至少一种大肠杆菌、绿脓杆菌、肠炎沙门氏菌、宋内志贺菌(Shigella sonnei)、单核细胞增多性李斯特杆菌和空肠弯曲杆菌。
37.一种屠宰禽类的改进方法，该方法包括其中禽类畜体或其部分用水洗涤的步骤，该改进包括将有效控制至少一种病原菌量的1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲和/或用该化合物形成的水溶液或浆状物作为杀微生物剂引入所述水中，所述病原菌是至少一种大肠杆菌、绿脓杆菌、  肠炎沙门氏菌、宋内志贺菌、单核细胞增多性李斯特杆菌和空肠弯曲杆菌，所述至少一种1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲中的一个烷基是甲基且另一个烷基包含1至约4个碳原子。
38.权利要求37的改进方法，其中至少部分所述1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲以1，3-二溴-5，5-二烷基乙内酰脲的形式被引入，并且其中在所述水中就地形成一种或多种活性溴类物质。
39.权利要求37的改进方法，其中所述杀微生物剂包括至少1，3-二溴-5，5-二甲基乙内酰脲和/或用该化合物形成的水溶液或浆状物。
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