DE1545897A1

DE1545897A1 - Verfahren zur Acylierung von Verbindungen der Cephalosporinreihe

Info

Publication number: DE1545897A1
Application number: DE19651545897
Authority: DE
Inventors: Wetherill Lewis Aubrey; William Graham; Covill Michael John
Original assignee: Glaxo Laboratories Ltd
Current assignee: Glaxo Laboratories Ltd
Priority date: 1964-05-28
Filing date: 1965-05-28
Publication date: 1969-12-11
Also published as: SE348474B; IL23586A; CH469740A; GB1104937A; GB1104937A9; FR1465394A; BE664645A; NL6506818A; AT269349B; DK122228B; US3502665A

Description

GLAXO LABORATORIES LIMITED, Greenford, Middlesex, England

Verfahren zur Acylierung von Verbindungen der Cephalosporinreihe

Die vorliegende Erfindung betrifft von Cephalosporin C abgeleitete Antibiotika.

N-Desacylierung von Cephalosporin C ergibt den sogenannten Cephalosporinkera, nämlich 7-Aminocephalosporansäure, die im folgenden 7-ACA abgekürzt wird. Dieses Amin kann dann zu 7-Acylamidocephalosporansäuren acyliert werden, die dem Cephalosporin C analog sind und die ebenfalls antibakterielle Aktivität besitzen. PUr die Acylierung von 7-ACA wurden verschiedene Methoden vorgeschlagen, die jedoch im allgemeinen den Nachteil haben, dass das Endprodukt mit wesentlichen Mengen nicht umgesetzter 7-ACA verunreinigt ist. Da die acylierte 7-ACA für therapeutische Zwecke gebraucht wird, ist es offensichtlich, dass die noch vorhandene restliche 7-ACA höchst nachteilig ist. Versuche, die

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Gegenwart von restlicher 7-ACA dadurch zu vermeiden, dass ein Überschuss an Säurehalogenid verwendet wird, haben sich nach den bekannten Verfahren als undurchführbar erwiesen. Bin weiterer Nachteil, dass noch nicht umgesetzte restliche 7-ACA vorliegt, liegt darin, dass die Herstellung dieses Ausgangsmaterials teuer ist und dass es daher aus wirtschaftlichen Gründen wünschenswert ist, das am Schluss der Reaktion nicht umgesetzte Material zurückzugewinnen. Diese Verfahrensmaßnahme erhöht jedoch die Kosten des Verfahrens·

Es wurde nun gefunden, dass 7-ACA oder deren Säureadditionssalz, dessen Herstellung in der Patentschrift . ... ... (Patentanmeldung, die von derselben Anmelderin am gleichen Tage unter dem internen Aktenzeichen 3.77-301 Ceph. 71 eingereicht wurde), vollständig oder fast vollständig durch Säurehalogenide acyliert werden kann, wenn die Umsetzung unter im wesentlichen wasserfreien Bedingungen in einer Lewis-Base, die Halogenwasserstoffakzeptoren enthält, durchgeführt wird.

Die vorliegende Erfindung betrifft daher ein Verfahren zur Acylierung von 7-ACA oder deren Additionssalz mit einem Acylhalogenid (d.h. -Chlorid oder -bromid) zu einer 7-Acylamidocephaloeporansäure, das darin besteht, dass die Acylierung unter im wesentlichen wasserfreien Bedingungen in flüssiger Phase in einer Lewis-Base und vorzugsweise in einer Lewis-Base mit einem tertiären Stickstoffatom, die eine Dielektrizitätskonstante über 15 und vorzugsweise über 30 aufweist und die einen Halogenwasser-

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stoffakzeptor enthält, durchführt. Die Dielektrizitätskonstante der Base liegt vorzugsweise im Bereich von 30 - 40.

Die Lewis-Base sollte inert sein, und zwar inert in Bezug auf das Acylhalogenid und die 7-ACA oder deren Salz, sie kann jedoch als Halogenwasserstoffakzeptor wirken. Die Lewis-Base sollte unter den Bedingungen der Reaktion flüssig sein und vorzugsweise flüssig bei 20⁰C.

Die Lewis-Base kann selbst als Halogenwasserstoffakzeptor wirken, was von ihrem Absorptionsvermögen für den bei der Reaktion freigesetzten Chlorwasserstoff oder Bromwasserstoff abhängt. Durch einen einfachen Versuch und Blindversuch kann festgestellt werden, ob ein zusätzlicher Halogenwasserstoffakzeptor notwendig ist, um das Vorhandensein von wesentlichen Mengen restlicher 7-ACA bei Beendigung der Umsetzung zu vermeiden. Als zusätzliche Halogenwasserstoffakzeptoren, die verwendet werden können, eignen sich basische Substanzen, wie Alkali- und Erdalkalicarbonate und -bicarbonate, z.B. Calciumcarbonat, Lithiumcarbonat, Strontiumcarbonat oder Bariumcarbonat. Vorzugsweise wird die anorganische basische Substanz in feingepulverter Form verwendet, vorteilhafterweise mit einer Partikelgrösse von weniger als 10 Mikron. Zu organischen tertiären Basen, die als Halogenwasserstoff akzeptoren verwendet werden können, gehören tertiäre aliphatische Amine, z.B» Tri-niedrigalkyl-amine, wie Triäthylamin.

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Als Lewis-Basen, die vorzugsweise gemäss der vorliegenden Erfindung verwendet werden, eignen sich solche, die eine der folgenden Gruppen enthalten:

a) ^N - C = 0

b) - C = N

Als geeignete Lewis-Basen können für das erfindungsgemässe Verfahren daher substituierte Amide der allgemeinen Formel

1 2 Ί 1

R -CO.NR .R^ verwendet werden, in der R ein Waeeeretoffatom

ρ oder einen Alkylrest mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen und R und R , die gleich oder verschieden sein können, einen Alkylrest mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen bedeuten, oder wahlweise können

2 "5

R und R zusammen einen divalenten aliphatischen Rest bedeuten, der zusammen mit dem benachbarten Stickstoffatom einen heterocyclischen Ring bildet. Als Beispiele für derartige Amide können genannt werden Ν,Ν-Dimethylformamid, KJJ-Diäthylformamid, Ν,Ν-Dipropylformamid, N,N-Dibutylformamid, Ν,Ν-Dimethylacetamid, N,N-DiäthyIacetamid, Ν,Ν-Dimethylvaleramid, Ν,Ν-Dimethylpropionamid, N-Pormylpiperidin und N-Pormylmorpholin. Aus dieser Gruppe von Verbindungen werden vorzugsweise Ν,Ν-Dimethylacetamid oder N,N-Dimethylformamid verwendet. Diese beiden Lösungsmittel werden insbesondere deshalb bevorzugt, weil sie ohne einen zusätzlichen Halogenwasserstoffakzeptor angewandt werden können. Dadurch werden die Reaktionsbedingungen vereinfacht.

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Als Lewis-Basen können auch Verbindungen der allgemeinen Formel

2 3 2 3

R .R SO verwendet werden, in der R und R die oben angegebene

-Bedeutung haben. Als Beispiel einer derartigen Base kann Dimethyleulfoxyd genannt werden. Basen dieser Art werden vorteilhafterweise in Verbindung mit einem zusätzlichen Halogenwasserstoff akzeptor verwendet.

Bequeme Gruppen von Lewis-Basen stellen die N,N-Dialkylcyanamide dar, z.B. Ν,Ν-Dimethylcyanaaid.

line weitere Gruppe von Lewisbasen sind Tetraalkylharnstoff-

2 3 2 3 2 verbindungen der allgemeinen formel R .R^N.CONR .R , in der R und R die oben angegebene Bedeutung besitzen· Als Beispiele für derartige substituierte Harnstoffverbindungen können N,N₁N¹,N'-Tetramethylharnstoff und Ν,Ν,Ν',N'-Tetraäthylharnstoff genannt werden.

Sine weitere Gruppe von Lewis-Basen mit anderer chemischer Zusammensetzung, die verwendet werden können, stellen die Alkyl-

4 4

cyanide der allgemeinen Formel R CN dar, in der R einen Alkyl rest mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen bedeutet. Bei Verwendung dieser Substanzen ist es jedoch notwendig, einen zusätzlichen Halogenwasserstoff akzeptor zu verwenden, um das Vorhandensein von restlicher 7-ACA zu vermeiden. Während diese Verfahrensmaßnahme in gewissem Sinne einen Nachteil bedeutet, wurde andererseits gefunden, dass bei Verwendung eines Gemisches aus Acetonitril und einer organischem +,ertiären Base, wie Triäthylamin, sehr

RAD

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hohe Auebeutjen an gewünschter 7-Acylamidocephalosporansäure erhalten werden können. Der Halogenwaeeerstoffakzeptor kann auch/ wie oben definiertes Amid der allgemeinen Formel

12 3 R .CO.HR R^y sein, insbesondere Ν,Ν-Dimethylacetamid.

Obwohl dee erfindungegemässe Verfahren direkt auf 7-ACA angewandt werden kann, wird das Verfahren vorzugsweise mit einem Säureadditionssalz von 7-ACA durchgeführt, und zwar aus den

GrUnden, die in der Patentschrift · (Patentanmeldung,

die von derselben Anmelderin am gleichen Tag unter dem internen Aktenzeichen 3.77-301 Ceph. 71 eingereicht wurde), beschrieben sind. Sie Reaktionsbedingungen, die für die Salze anzuwenden eind, sind im allgemeinen ähnlich denen, die für 7-ACA selbst notwendig sind· Vorzugsweise wird 7-ACA-p-toluolsulfonat verwendet.

Se muss hervorgehoben werden, dass es nicht wesentlich ist, dass 7-ACA oder deren Salz in dem Reaktionsmedium löslich ist und diese Verbindungen können auch als Suspension im Reaktionsmedium verwendet werden. So ist z.B. 7-ACA nur wenig löslich in Η,Ν-Dimethylacetamid oder Ν,Ν-Dimethylformamid, geht jedoch bei fortschreitender Reaktion in Lösung. Andererseits ist 7-ACA-p-toluolsulfonat in Η,Ν-Dimethylacetamid oder Ν,Ν-Dimethylformamid löslich.

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Das verwendete Säurehalogenid hängt selbstverständlich davon ab, welche Acylgruppe in 7-Stellung des Cephalosporinkernes eingeführt werden soll, wobei die Natur der Acylgruppe ein verschiedenes Verhalten auf das antibakterielle Spektrum des entstehenden Amids zeigt. Wegen des vorteilhaften Spektrums der 7-(Thienyl-2'-acetamido)-cephalosporansäure wurde hauptsächlich 2-Thienyl-acetylchlorid verwendet. Andere Acylgruppen führen jedoch zu einer Änderung des Spektrums und das erfindungsgemässe Verfahren kann daher z.B. zur Herstellung von 7-Acylamidocephalosporansäuren verwendet werden, die in 7-Stellung eine der folgenden Gruppen aufweisen:

1.) R¹CCH₂)J₁CO-, wobei R¹ einen Aryl-, Cycloalkyl-, substituierten Aryl-, substituierten Cycloalkyl- oder einen heterocyclir sehen Rest und η eine ganze Zahl von 1 bis 4 bedeuten. Als Beispiele für diese Gruppe können genannt werden Phenylacetyl, Nitrophenylacetyl, Phenylpropionyl, Cyclopentyl, Cyclohexyl und Thienyl-3-acetyl; Thienyl-2-acetyl gehört selbstverständlich ebenfalls dazu.

2.) ^c _nH2_n+i^C0"~> ^{wol3ei n} eine ganze Zahl von 2 bis 7 bedeutet. Der Alkylrest kann gerad- oder verzweigtkettig sein und gewünscht enf alls durch ein Sauerstoff- oder Schwefelatom unterbrochen oder durch ein oder mehrere Halogenatome substituiert sein. Als Beispiele für diese Gruppen können Hexanoyl, Heptanoyl, Octanoyl und Butylthioacetyl genannt werden«

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3.) ^c _n ^H2r-1^C0"» ^{wobei n eine} gan^ze Zahl von 2 bis 7 bedeutet. Der Alkenylrest kann gerad- oder verzweigtkettig und gewünschtenfalls durch ein Sauerstoff- oder Schwefelatom unterbrochen sein. Als Beispiele für solche Gruppen können Acrylyl, Crotonyl und Allylthioacetyl genannt werden.

4.) R¹O CR¹¹R¹¹¹CO-, wobei R¹ die oben angegebene Bedeutung besitzt und R" und R^MI, die gleich oder verschieden sein können, ein Wasserstoffatom oder einen Alkyl-, Aryl- oder heterocyclischen Rest bedeuten. Ein Beispiel für diese Gruppe ist Phenoxyacetyl.

5.) R¹SCR¹¹R¹¹¹CO-, wobei R¹, R" und R" · die oben angegebene Bedeutung besitzen. Als Beispiele für solche Thiogruppen können S-Phenylthiοacetyl, S-Chlorphenylthioacetyl und S-Bromphenylthioacetyl genannt werden«

6.) R^l(CH₂)_mS(CH₂)_nCR"R"»C0-, wobei R», R" und R"¹ die oben angegebene Bedeutung besitzen und m eine ganze Zahl von 1 bis 4 und η 0 oder eine ganze Zahl von 1 bis 4 bedeuten. Als Beispiele für solche Gruppen können S-Benzylthioacetyl, Benzylthiopropionyl und ß-Phenäthylthioacetyl genannt werden.

7.) R¹CO-, wobei R¹ die oben angegebene Bedeutung besitzt. Als Beispiel solcher Gruppen können Benzoyl, substituiertes Benzoyl und Cyclopentanoyl genannt werden.

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Sas Acylhalogenid wird normalerweise im Überschuss verwendet und im allgemeinen werden molare Verhältnisse von 1,1 bis 2,0 geeignet gefunden, wobei die optimale Menge von den Reaktionsbedingungen und insbesondere von der Natur des Halogenwasserstoffakzeptors abhängt. Restliches überschüssiges Acylhalogenid kann nach Beendigung der Reaktion zerstört werden, z.B. durch Zugabe von Methanol.

Das erfindungsgemässe Verfahren kann bei einer Temperatur von als

weniger/eo°C durchgeführt werden. Vorzugsweise wird es bei einer Temperatur von weniger als 25⁰C und insbesondere bei einer Temperatur im Bereich von -5° bis +15⁰C durchgeführt.

Die V-Acylamidocephaloeporansäure kann aus dem Reaktionsmedium als solche oder in Form eines Salzes isoliert werden, z.B. in Form eines Alkalisalzes durch Umsetzung mit einem Alkali-2-äthylhexoat.

Das erfindungsgemässe Verfahren kann zur Acylierung von Verbindungen der allgemeinen !Formel

COOH

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- ίο -

oder von deren Säureadditionssalz verwendet werden, wobei X eine Gruppe bedeutet, die von einem nucleophilen Rest abgeleitet ist, z.B. eine Azidgruppe, oder einen schwefelhaltigen nucleophilen Rest, der über den Schwefel gebunden ist. Als Beispiele für die letztere Gruppe können S-Thiobenzoyloxy, S-Thiopicolinoyloxy, 4-Methyl-pyrimidyl-2-thio und 4,6-Dimethylpyrimidyl-2-thio genannt werden.

Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung. Mit dem in den Beispielen genannten Natriumsalz ist Natrium-7-(thienyl-2'-acetamido)-cephalosporanat gemeint.

A) Acylierung von 7-Amlnocephalo8poransäure

Beispiel 1 N.N-Dimethylacetamid/Triäth.ylamin als Lösungsmittel

2,5 g 7-ACA wurden in 20 ml Ν,Ν-Dimethylacetamid suspendiert.

2,3 ml Triethylamin wurden zugesetzt und der Festetoff gelöst.

1,26 ml 2-Thienylacetylchlorid wurden zu der Lösung im Laufe von 10 Minuten zugegeben, das Gemisch in 150 ml 2n-Salzsäure ge-

mit mit

schüttet und das Produkt mit zweimal/25 ml und einmal/10 ml Methylenchlorid extrahiert. Die Extrakte wurden vereinigt und die Lösung wurde getrocknet und mit einer 12,6#igen Lösung (G/7) Ton Hatrium-2-äthylhexoat in 15 ml Äthylacetat gemischt. Das ausgefallene Natriumsalz wurde durch Filtration gesammelt und mit Aceton gewaschen, was 3,3 g, entsprechend 85,7 £ der Theorie, Ausbeute ergab; /0£7·η + 120° (c = 1 in Wasser).

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•-11"·

Beispiel 2

Ν»N-Dimethylacetamid ale Lösungsmittel 5 g 7-ACA wurde als Suspension in 40 ml N,N-Dimethylacetamid verrührt. 4,55 ml, entsprechend 2 Mol, 2-Thienyl-acetylchlorid wurden innerhalb von 10 Minuten bei einer Temperatur von 18 2O⁰C zugegeben. 5 ml Methanol wurden zur Zerstörung des überschüssigen Säurechlorids zugesetzt und das Gemisch in 100 ml Wasser geschüttet und die 7,2'-Thienylacetamidocephalosporansäure in 100 ml Methylenchlorid extrahiert. Das Natriumsalz wurde wie in Beispiel 1 isoliert und ergab eine Ausbeute von 6,9 g, entsprechend 89,7 ?6 der Theorie; ßxJ-§ + 131,8° (c = 1,0 in Wasser).

Beispiel 3

Acetonitril/Triäthylamin in Gegenwart von Calciumcarbonat als Lösungsmittel

5 g 7-ACA wurden unter Rühren in 40 ml Acetonitril suspendiert. 4 ml Triäthylamin wurden zugegeben und der Feststoff gelöst. Es wurde mit 0,75 g Calciumcarbonat versetzt und anschliessend mit 2,86 ml 2-Thienyl-acetylchlorid innerhalb von 10 Minuten durch einen Tropftrichter. Das Calciumcarbonat wurde abfiltriert und das Natriumsalz aus dem Filtrat wie in Beispiel 1 beschrieben isoliert, wobei 6,81 g Produkt, entsprechend 88,5 i* der Theorie, gewonnen wurden; /ρ<_7τ\ + 127° ( = 1 in Wasser).

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Beispiel 4 Acetonitril/Triäthylamin als Lösungsmittel

5 g 7-ACA wurden in 35 ml Acetonitril unter Zusatz von 5»39 ml Triäthylamin gelöst. Unter Rühren wurden 2,52 ml 2-Thienylacetylchlorid innerhalb von 10 Minuten zu der Lösung zugesetzt. Das ausgefallene Triäthylamin-hydrochlorid wurde abfiltriert und das Piltrat mit einer 12,6#igen Lösung (G/V) von Natrium-2-äthylhexoat in 25 ml Äthylacetat verdünnt. Das Produkt wurde durch Filtration und Waschen mit Aceton isoliert, wobei 7»3 g» entsprechend 95 i» der Theorie, des Natriumsalzes gewonnen wurden; {&Jt\ ^{+ 12}9,6° (c = 1,0 in Wasser).

B) Acylierung von 7-AminocephaloBporanBäure-p-toluolsulfonatdihydrat

Beispiel 5

Acetonitril/Triäthylamin als Lösungsmittel 8,15 g 7-ACA-p-toluolsulfat-dihydrat, suspendiert in 35 ml Acetonitril, wurden auf -10° gekühlt und mit 7,15 ml Triäthylamin behandelt. Zu der entstandenen Lösung wurden innerhalb von 15 Minuten 2,86 ml 2-Thienyl-acetylchlorid in 5 ml Acetonitril zugegeben, wobei durch äussere Kühlung eine Temperatur von -5 bis 0° eingehalten wurde. 40 ml Wasser und 100 ml Diäthyläther wurden zugesetzt und die Schichten getrennt. Die wäßrige Schicht wurde erneut mit 40 ml Diäthyläther extrahiert und mit 4 ml konzentrierter Salzsäure auf pH 1 angesäuert. Die Lösung wurde mit 40, 30 und nochmals 30 ml eines Gemisches von Chloro-

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form und Tetrahydrofuran im Verhältnis von 3 s 2 extrahiert und die organischen Schichten wurden vereinigt. Die entstandene Lösung wurde über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und mit einer 12,65ligen Lösung (G/V) von Natrium-2-äthylhexoat in 30 ml Äthylacetat behandelt. Der Feststoff wurde abfiltriert, mit Aceton gewaschen und im Vakuum getrocknet und ergab 6,1 g, entsprechend 85 £, des gewünschten Natriumsalzes; Z\7_D + 133° ( c = 1,0 in Wasser), E¹^_n \ _max# 237 mp (306), Λ _Infl# 260 ψ (200) (pH 6-Puffer).

Beispiel 6 H.N-Dimethylacetamid als Lösungsmittel

10 g 7-ACA-p-toluolsulfonat-dihydrat in 33,5 ml N,N-Dimethylaoetamid wurden bei 10° mit 5,15 ml 2-Thienyl-acetylchlorid behandelt. Die Reaktion wurde durch weiteres 30minütiges Rühren zu Ende gebracht und die Lösung in ein Gemisch von 98,6 ml 2n-Salzsäure und 75 ml Methylenchlorid geschüttet. Die Schichten wurden absitzengelassen und dann getrennt. Die wäßrige Phase wurde dreimal mit 25 ml Methylenchlorid gewaschen und die organischen Schichten wurden vereinigt. Die entstandene Lösung wurde mit 100 ml 2n-Salzsäure und 100 ml 2j(ige^r wäßrige? Natriumehloridlösung gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. 18,5 ml Methylalkohol wurden zu der wasserfreien Lösung zugesetzt und anschliessend wurde eine 11,8?iige Lösung (G/V) von Natrium-2-äthylhexoat in 43,6 ml Äthylacetat zugegeben. Die weisse Testsubstanz wurde

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abfiltrierf, mit Aceton gewaschen und im Vakuum getrocknet, wobei 7,21 g, entsprechend 83 # der Theorie, des gewünschten Natriumsalzes erhalten wurden; /5i 7-n + ¹²9° (c = 1,0 in Wasser), ^E1cm * max. ^{237 1}^ ⁽³³³⁾'*Infl ²⁶° ¹^ ^{(206) (pH 6}-

Beispiel 7

N.N-Djmethylacetamid in Gegenwart, von Calciumcarbonat als Lösungsmittel

25 g Calciumcarbonat wurden unter Rühren in einer Lösung von 50 g 7-ACA-p-toluolsulfonat-dihydrat in 250 ml N,N-Dimethylacetamid suspendiert. 25,8 ml 2-Thienyl-acetylchlorid wurden innerhalb von 10 Minuten zugegeben und die Temperatur durch äussere Eis/Wasser-Kühlung auf 15 - 20° gehalten. 46 ml Methanol wurden zugegeben und das Gemisch wurde in 493 ml 2n-Salzsäure und 375 ml Methylenchlorid geschüttet. Das Produkt wurde wie in Beispiel 6 beschrieben isoliert und ergab 40 g, entsprechend 92 jtf, des gewünschten Hatriumsalzee; /ö^Zn + 133° (c = 1,0 in Wasser), *]*_m λ _aai 237 ψ (340), λ _Infl. 260 τψ (212) (in pH 6-Puffer). Die Parbe einer 25#igen Lösung betrug 0,2Y Lovibond-Einheiten.

Beispiel 8

H.H-Dimethylacetamid-enthaltendes Acetonitril als Lösungsmittel Eine Suspension von 50 g 7-ACA-p-toluolsulfonat-dihydrat in 250 ml Acetonitril, das 41,2 ml Ν,Η-Simethylacetamid enthielt, wurdeji mit 18,4 ml 2-Thienyl-acetylChlorid in 25 ml Acetonitril bei 15° behandelt. Der Peststoff löste sich bei der Zugabe der

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Lösungsmittel und die Lösung wurde durch Filtration geklärt. Das Filtrat wurde in ein Gemisch aus 250 ml Methylenchlorid und 425 ml Wasser geschüttet. Die Schichten wurden getrennt. Die wäßrige Phase wurde zweimal mit 125 ml Methylenchlorid extrahiert und die organischen Schichten vereinigt. Die erhaltene Lösung wurde zweimal mit 125 ml Wasser gewaschen^und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Es wurden 92,5 ml Methanol und anschliessend eine 11,8;'>ige Lösung (G/V) von Natrium-2-äthylhexoat in 219 ml Äthylacetat zugegeben« Die weisse Pestsubstanz wurde abfiltriert und ergab 38 g, entsprechend 87,5 $> der Theorie, des Natriumsalzes; /&_7_D + 131° ( c = 1,0 in Wasser)„

Beispiel 9

25 g 7-ACA—- p-toluclsulfonat-dihydrat wurden unter Rühren in 100 ml Acetonitril suspendiert und 20 ml Ν,Ν-Dimethylaeetamid wurden zugegeben» Die Hauptmenge der Pestsubstanz ging in Lösung. Das Rühren wurde fortgesetzt und das Reaktionsgefäss wurde mit Eiswasser gekühlt, während 9 ml 2-Thineyl-acetylchlorid auf einmal zugegeben wurden. Die Reaktionstemperatur stieg von 15 auf 22° und der gesamte suspendierte Peststoff ging in Lösung. Die Reaktion wurde durch lOminütiges Rühren zu Ende gebracht. 200 ml Aceton wurden zugegeben und die Lösung wurde während des Einbringens von 17 g Natriumbicarbonat gerührt. Das Rühren wurde fortgesetzt. Sobald der pH-Wert des Reaktionsgemisches auf 2,5 nach ungefähr 45 Minuten angestiegen war (bestimmt mit der Glaselektrode) wurde die Pestsubstanz

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durch Filtration abgetrennt. Das Fütrat wurde mit 13 g Natrium-2-äthylhexoat in 30 ml Methanol behandelt. Der Feststoff wurde wie oben beschrieben isoliert und ergab 19,86 g Natriumsalz als weisse kristalline Festsubstanz in einer Ausbeute von 91 # der Theorie; ß*J-£ + 131,8° (c = 1,0 56 in Wasser), * _max. 237 ψ, E]J_ffl 330, λ _max# 260 wfx B₁ ¹J_n 208. Farbe (1 g in 4 ml Wasser, 1 cm - Zelle) 0,7Y, 0,2R Lovibond-Einheiten. Auf dem Papierchromatogramm nur 1 Fleck.

Beispiel 10

25 g 7-ACA-p-toluolsulfonat wurden mit 12,9 ml 2-Thienylacetylchlorid in einer Suspension von 12,5 g Calciumcarbonat in 125 ml N,N-Dimethylacetamid behandelt und das Produkt wurde wie in Beispiel 6 beschrieben, in Kethylenchlorid extrahiert« Die gewaschenen Extrakte wurden vereinigt und die erhaltene Lösung mit 225 ml Aceton verdünnt. 13 g Natrium*?- äthylhexoat in 70 ml Methanol wurden zugegeben und das Produkt wie oben beschrieben isoliert. 20 g, entsprechend 92 $ der Theorie, des Natriumsalzes ergaben sich als weisser kristalliner Feststoff; /Ö_7_D 131° (c = 1,0 in Wasser), E]^_m bei

max. ²³⁷ T' ⁵²⁷'*max. ²⁶° Ψ> Atm ²⁰⁵ <ⁱⁿ P^H 6-Puffer).

Beispiel 11 NtN-^imethylacetamid in Gegenwart von Calciumcarbonat

als Lösungsmittel

Zu einer Suspension von 67,5 g Calciumcarbonat in einer Lösung von 100 g 7-ACA-p-toluolsulfonat-dihydrat in 550 ml N,N-Dime-

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thylacetamid wurden bei -5° 70 ml S-Benzylthioacetylchlorid innerhalb von 15 Minuten unter Rühren zugegeben, wobei die

• Temperatur unter 10° gehalten wurde. Nach weiteren 25 Minuten ca.

wurden/10 ml Methanol zugesetzt und nach 20 minütigem Rühren wurde das Reaktionsgemisch in 1,5 1 2n-Salzsäure, die mit Ammoniumchlorid gesättigt war, geschüttet. Das Produkt wurde mit 1 Liter, 500 ml und 250 ml eines Gemisches aus Tetrahydrofuran/Petroläther im Verhältnis 4 : 1 extrahiert und die organischen Phasen wurden zweimal mit 300 ml gesättigter Ammoniumsulfatlösung gewaschen. Nach dem Trocknen der vereinigten Extrakte über Natriumsulfat und Eindampfen wurde das erhaltene gummiartige Produkt in 700 ml Aceton gelöst und mit 300 ml einer 22,3#igen Lösung von Natrium-2-äthylhexoat in Aceton versetzt. Die Kristallisation des Natrium-7-S-benzylthioacetamidocephalosporanats wurde bei 0° vonstattengehengelassen. Das Produkt wurde wie üblich isoliert und ergab 82 g, entsprechend 86,3 3* der Theorie; filJ-Q + 100,1° (c « 0,94- in Wasser).

Beispiel 12

N.N-Dimethylacetamid-haltiges Acetonitril als Lösungsmittel Zu einer gerührten Lösung von 20 g 7-ACA-p-toluolsulfonatdihydrat in 90 ml Acetonitril und 16,5 al N,N-Dimethylacetamid wurden tropfenweise bei 15° 8,9 ml S-Benzylthioacetylchlorid in 10 ml Acetonitril zugegeben, wobei die Temperatur auf 15+2° gehalten wurde. Nach weiteren 15 Minuten

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wurden 5 ml'Methanol zugesetzt, das Gemisch mit 125 ml 10#iger Salzsäure angesäuert und mit. 60 und anschliessend zweimal mit 20 ml Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Extrakte wurden zweimal mit 50 ml 10biger Natriumchloridlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und zu einem gummiartigen Produkt eingedampft. Das letztere wurde in 115 ml Aceton gelöst und mit einer Lösung von 7,5 g Natrium-2-äthylhexoat in 60 ml Äthylacetat versetzt. Nach dem Auskristallisieren wurde das Natrium-T-S-benzylthioacetamido-cephalosporanat abfiltriert, gewaschen und getrocknet und ergab 16,58 g, entsprechend 86,8 #, Ausbeute j Z«_7_D + 98,25° (c = 1,02 in Wasser).

Beispiel 13

3-(4t6-Dimethylpyripidin-2-ylthiomethyl)-7-(phenylacetamido)-ceph-3-em-4-onsäure

4,20 g 3-(4,6-Dimethylpyrimidin-2-ylthiomethyl)--7-aminoceph-3-em-4-onsäure wurden in 50 ml Ν,Ν-^imethylacetamid suspendiert und unter Rühren tropfenweise innerhalb von 10 Minuten mit 2,78 g Phenylacetylchlorid versetzt. Die Lösung wurde weitere 10 Minuten gerührt und 5 ml LIethanol wurden zugegeben. Die dunkle Lösung wurde in ein Gemisch aus 100 ml Wasser und 40 ml Chloroform geschüttet. Die organische Schicht wurde abgetrennt und die wäßrige Schicht dreimal mit 40 ml Chloroform extrahiert. Die vereinigten organischen Schichten wurden zweimal mit 40 ml 2n-Salzsäure, mit 40 ml Wasser und 40 ml Salzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zu einem dunklen Öl eingedampft. Dieses öl in 200 ml Xthylacetat

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wurde rait 500 ml 3?»iger Natriumbi carbonat lösung extrahiert. Die wäßrige Schicht wurde gesammelt und mit verdünnter Salzsäure auf pH 2 eingestellt, wobei ein weisser Niederschlag ausfiel. Die Suspension wurde viermal mit 15C ml Äthylacetat extrahiert und die organische Phase zweimal mit 1f( ml Wasser und mit 1c 0 iiil SaI. lösung gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet. Eindampfen der wasserfreien Lösung unter verminderten Druck ergab 2,64 g eines rehfarbenen Peststoffs. Die Festsubstanz wurde zweimal aus wäßrigem, 25 ?° Wasser enthaltendem Aceton unkristallisiert und ergab ein kristallines Produkt; Z\7_D -73,3° (c = 1 in Dioxaji);X_niaXi 264 niu (E^ 332,

t 15 600); V !!οί^{θ1 1}?80 (ß-Lactam), 1720 (nicht-ionisiertes max c

Carboxyl), 1664 und 1553 cm" (Amid),

Analyse: ^22^22^4^4^2

berechnet: C 56,2 H 4,7 ^ gefunden: 56,2 4,8

Beispiel H

3-(4_>6-Dimethylpyrimidin-2-ylthiomethyl)-7-(2-thienylacet amido)-ceph-3-em-4-onsäure

1,5 g 3-(4,6-Dimethylpyrimidin~2-ylthiomethyl)-7-aminoceph-3-em-4-onsäure wurden in 18 ml Dimethylacetamid suspendiert und unter Rühren tropfenweise innerhalb von 10 Minuten mit 1,0 g 2-Thienylacetylchlorid versetzt. Die Lösung wurde weitere 10 Minuten gerührt und anschliessend wurden 1,8 ml Methanol zugegeben. Die entstandene dunkle Lösung wurde in ein Gemisch

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aus 36 ml Wasser und H.ml Chloroform geschüttet. Die organische Schicht wurde abgetrennt und die wäßrige Schicht wurde erneut zweimal mit Chloroform extrahiert. Die vereinigten organischen Schichten wurden dreimal mit H ml 2n-Salzsäure, mit 14 ml Wasser und mit 14 ml Salzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zu einem braunen gummiartigen Produkt eingedampft. Dieser Rückstand in 71,5 ml Äthylacetat wurde mit 178 ml 3#iger Natriumbicarbonatlösung extrahiert. Die wäßrige Schicht wurde abgetrennt und mit verdünnter Salzsäure auf pH 2 eingestellt, wobei eine Suspension eines weisslichen kristallinen Peststoffes entstand. Die Suspension wurde viermal mit 53 ml Äthylacetat extrahiert, die organische Phase zweimal mit 30 ml Wasser, und mit 30 ml Salzlösung gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet. Eindampfen der wasserfreien Lösung unter vermindertem Druck ergab ein weissliches kristallines Produkt, das aus 5 ml Wasser und 15 ml Aceton umkristallisiert wurde und dabei 0,154 g weisse kristalline Pestsubstanz ergab; /ΟιΛ) -75° (c = 1 in Dioxan), λ max. ²⁴¹-^{242 1}^ <^E1¹cm *¹⁰' ^ 19800); λ _Infl# 264 ψ (E₁ ¹J_n 367, £17800); >j_maXt (in Nujol) 1775 (ß-Lactam), 1702 (nicht-ionisiertes Carboxyl), 1660 und 1540 cm"¹ (Amid).

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Beispiel 15

3-Benzoylthiomethyl-7-(2'-thienylacetamido)-ceph-3-em-• 4-onaäure

4|20 g, entsprechend 0,12 Mol, 7~Amino-3-benzoylthiomethylceph-3-em-4-onsäure wurden in 50 ml N,N-DimethyIacetamid bei Zimmertemperatur suspendiert und gerührt und mit 2,78 g, entsprechend 0,24 Mol, 2-Thienyl-acetylchlorid tropfenweise innerhalb von 10 Minuten versetzt. Das Gemisch wurde weitere 10 Minuten gerührt, wobei Lösung eintrat. Zu der entstandenen dunklen Lösung wurden 5 ml Methanol gegeben und die Lösung wurde dann in ein Gemisch aua 100 ml Wasser und 40 ml Methylenchlorid geschüttet. Die dunkle organische Schicht wurde gesammelt und mit den Methylenchloridextrakten vereinigt, die durch dreimaliges Extrahieren der wäßrigen Schicht mit jeweils 40 ml Methylenchlorid erhalten wurden. Der Extrakt wurde zweimal mit 40 al 2n-Salzsäure, mit 40 ml Wasser und mit 40 ml Salzlösung gewaschen und dann über Natriumsulfat getrocknet. Verjagen der Lösungemittel im Vakuum ergab 7,51 g eines dunkelbraunen halbfesten Produktes. Dieses Produkt wurde in einem Gemisch aus 200 ml Äthylacetat und 500 ml 3£iger Hatriumbicarbonatlösung gelöst. Die wäßrige Schicht wurde gesammelt und durch vorsichtige Zugabe von 2n-Salzsäure auf pH 1,5 eingestellt und dann viermal mit 150 ml Ithylacetat extrahiert. Dieser Extrakt wurde zweimal mit 100 ml Wasser und mit 100 ml Salzlösung gewaschen und dann über Natriumsulfat getrocknet. Verjagen des Lösungsmittels im Vakuum ergab 5,48 g eines tief goldenen, gummiert!- gen Produkts, das aus 25 ml Aceton-Wasaer im Verhältnis 1 ; 1

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kristallisiert wurde, wobei ein rehfarbenes Material entstand, das/i durch Filtration gesammelt, zweimal mit 5 ml Aceton (wodurch viel farbstoff entfernt wurde) und dreimal mit 10 ml Äther gewaschen und dann im Vakuum über Fhosphorpentoxyd getrocknet wurde, wobei 2,56 g, entsprechend 45 ^₁ unreine 3-Benzoylthiomethyl-7-(2^l-thienylacetamido)-ceph-3-em-4-onsäure erhalten wurden. Die Verbindung ergab bei der Papierchromatographie nur einen Fleck mit einem R^-Wert von 0,70, wenn die absteigende Technik und Whatman Nr. 1-Papier, das mit 0,1 M wäßrigem Natriumacetat bei pH 5,0 gepuffert wurde, verwendet wurde und wenn als Entwicklungslösung die obere Phase eines Gemisches aus Äthylacetat/n-Butanol/pH 5 - Puffer im Verhältnis 8/1/8 verwendet wurde und die untere Phase in den Boden der Chromatographiekammer gegeben wurde. Infrarot-Spektrum (in Nujolmull) und protonenmagnetisches Resonanz-Spektrum (in Dimethyl-BulfoxydlöBung) waren identisch mit denen von reiner Verbindung, das ültraviolettspektrum (in Äthanol) war jedoch weniger intensiv (A..,. 237-238 mti, £ 22 200; λ __„· 273-275 ψ, Γ 15000) als das von reinem Material und der Rotationswert lag wesentlich niedriger / fil/^f =» -94° (c = 1,0 in Dioxan) als der von reiner Verbindung.

Mutterlauge und Waschlösungen des unreinen Produktes wurden vereinigt und im Vakuum zur Trockene gedampft, was 2,86 g eines dunklen Sirups ergab, der nicht kristallisiert werden konnte. Papierchromatographische Analyse^ zeigte, dass zusätzlich zu der gewünschten Verbindung noch beträchtliche Mengen langsamer

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wandernder Materialien mit einem R^-Wert <0,5 vorhanden waren. Der Sirup wurde einer 5-Stufen-Gegenstromverteilung in demselben Lösungsmittelsystem, das für die Papierchromatographie verwendet wurde, unterworfen, wobei in jedem der 6 Gleichgewichtsgefässe aliquote Teile von 40 ml jeder Phase verwendet wurden und wobei die untere Phase der schneller wandernden Phase entsprach. Nach Beendigung des Durchganges wurde der Inhalt jeder Phase papierchromatographisch untersucht. Dabei wurde gefunden, dass die obere Phase in den Gefässen 1 und 2 im wesentlichen die Gesamtmenge des gewünschten Produktes enthielt und dass dieses frei von langsamer wandernden Verunreinigungen war. Diese beiden Phasen wurden vereinigt und im Vakuum vom Lösungsmittel abgestreift, wobei 1,77 g eines dunklen gummiartigen Produktes erhalten wurden, das aus 15 ml Aceton-Wasser ( 1 :-1 ) kristallisiert wurde und ein rehfarbenes Material ergab, das durch Piltration gesammelt, zweimal mit 2 ml Aceton (wodurch der meiste Farbstoff entfernt irarde) und dreimal mit 10 ml Äther gewaschen und anschliessend im Vakuum über Phosphorpentoxyd getrocknet wurde, was 0,46 g, entsprechend 8 #, unreine 3-Benzoylthiomethyl-7-(2'-thienylacetamido)-ceph-3-em-4-onsäure ergab; R^ 0,70, InfrarotSpektrum (Nujolmull) und protonenmagnetisches Resonanzspektrum (Dimethylsulfoxydlösung) identisch mit dem der reinen Verbindung, Ultraviolettspektrum (Äthanol); λ _max# 237-238 nyu, £ 22000; Λ _max# 273-274 ψ, S H500),

optische Rotation /~<\_7j² = -103° (c = 1,00 in Dioxan).

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Die beiden rohen Präparate des Produktes wurden vereinigt und 2,80 g davon wurden in 10 ml Aceton unter Rückfluss 5 Minuten erhitzt und dann 2 Stunden bei 0° gehalten. Der Feststoff wurde durch Filtration gesammelt, mit 2 ml kaltem Aceton und dreimal mit 10 ml Äther gewaschen und dann im Vakuum über Phosphorpentoxyd getrocknet, was 2,22 g des gewünschten Produktes als farbloses Pulver ergab; F * 191-192° (Zersetzung), A_max. (Äthanol) 237-238 nyi, £ 23700 und 273-275 aft, £ 17800), C⁹J^ -131° (c = 1,00 in Dioxan).

Beispiel 16

3-Azidomethyl-7-bromacetamidoceph-3-em-4-onsäure In analoger Weise wie in Beispiel 15 wurden aus 2,55 g (0,01 Mol) 7-Amino-3-azidomethylceph-3-em-4-onsäure und 3»20 g (0,02 Mol) Bromacetylchlorid, 0,52 g, entsprechend 14 #» rohe 3-Azidomethyl-7-bromacetamidoceph-3-em-4-onsäure als braunes gummiartiges Produkt erhalten, das durch den R^-Wert (0,58) und das Infrarotspektrum im Vergleich zu einer Säure, die durch Acylierung in Äthylacetat hergestellt wurde /""·>> (Nu j öl) 2110, 1770 und 1665 cm" _7\ identifiziert wurde.

Beispiel 17 Acylierung von 3-Azidomethyl-7-aminoceph-3--ein-4-onBäure

Zu einer Lösung von 10 g 7-ACA-p-toluolsulfonat-dihydrat in 100 ml Wasser wurden 2 g Natriumazid zugesetzt und der pH mit 2n-Natriumcarbonat auf pH 8 eingestellt. Das Gemisch wurde 17 1/2 Stunden auf 50⁰C erhitzt, abgekühlt und mit verdünnter

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Salzsäure auf pH 2 angesäuert. Nach dem Kühlen wurden 2,84 g eines braunen Feststoffes abfiltriert. Dieses Produkt zeigte im Infrarotspektrum starke Azidabsorption und nur vernachlässigbare Aeetylabeorption.

1 g dieser Pestsubstanz wurde durch Behandlung in Aceton mit p-Toluolsulfoneäure in das p-Toluolsulfonsäuresalz Überführt» das entstanden· SaIs wurde in 10 ml Ν,Ν-Dimethylacetamid gelöst und mit 0,35 g Calciumcarbonat versetzt. Unter Rühren und Kühlung auf O⁰C wurden O,25pl S-Benzylthioacetylchlorid und ansohliessend 2 ml Methanol zugegeben. Nach 5 Minuten wurde das Gemisch in η-Salzsäure geschüttet und dreimal mit Athylacetat extrahiert. Nach dem Waschen und Trocknen wurde das organische Lösungsmittel verdampft und der Rückstand in Aceton gelöst und mit 2 ml einer 22jtigen Natrium-2-äthylhexoat-Lösung in Aceton behandelt. Das Aceton wurde verdampft und der Rückstand mit denaturiertem Industriealkohol verrieben und 0,15 g des Feststoffs abfiltriert· Dieses Produkt wurde papierchromatographisch als Natrium^-azidomethyl-T-S-benzylthioacetamidoceph^-emM-oat identifiziert.

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Claims

Patentansprüche

1. Verfahren zur Acylierung von Verbindungen der allgemeinen Formel

H₂X 0OH

und deren Säureadditionesalzen, wobei X einen Acetatrest oder einen Rest, der sich von einer nuoleophilen Verbindung ableitet, Insbesondere den Azido- oder S-Thiobenzoyloxyreet bedeutet, su dem entsprechenden 7-Acylat, dadurch gekennzeichnet, dass man die Acylierung unter in wesentlichen wasserfreien Bedingungen in flüssiger Phase in einer inerten, einen Halogenwaeserstoffakzeptor enthaltenden Lewis-Base mit einer Dielektrizitätskonstante über 15 und vorzugsweise über 30 durchführt.

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Lewis-Base mit einer Dielektrizitätskonstante über 30 verwendet·

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3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Lewis-Base verwendet, die selbst als Halogenwasseiv stoffakzeptor wirkt, und keinen Halogenwasserstoffakzeptor zusetzt.

4. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Lewis-Base verwendet, die nicht als Halogenwasserstoff akzeptor wirkt, und einen Halogenwasserstoffakzeptor zusetzt.

5. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass man als Halogenwasserstoffakzeptor ein Alkalicarbonat oder

-bicarbonat oder ein Erdalkalicarbonat oder —bicarbonat verwendet.

6. Verfahren nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, dass man

Lithium

als Halogenwasserstoffakzeptor Calciumcarbonat, SSXStftüicarbonat, Strontiumcarbonat ader Bariurnearbonat verwendet.

7. Verfahren nach Anspruch 5 oder 6, dadurch gekennzeichnet, dass man einen Halogenwasserstoffakzeptor mit einer Teilchengrösse von weniger als 10 Mikron verwendet.

8. Verfahren nach Anspruch 4, dadurch gekennzeichnet, dass man als Halogenwasserstoffakzeptor ein tertiäres aliphatisches Amin verwendet.

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9. Verfahren nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, daee man als Amin Triäthylamin verwendet.

10. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass man eine bei 20⁰C flüssige Lewis-Base verwendet.

11. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Lewis-Base mit einem tertiären Stickstoffatom verwendet.

12. Verfahren nach Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Lewis-Base mit der Gruppierung

>N - 6 = 0
verwendet.

13. Verfahren nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Lewis-Base der allgemeinen Formel

R¹ . CO . NR² . R⁵

verwendet, in der R ein Wasserstoffatom oder einen Alkylrest

2 "*> mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen und R und R , die gleich oder verschieden sein können, einen Alkylrest oder wahlweise zusammen eine divalente aliphatische Gruppe bedeuten, die zusammen mit dem benachbarten Stickstoffatom einen heterocyclischen Ring bildet.

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14· Verfahren nach Anspruch 15_f dadurch gekennzeichnet, daee man als Lewis-Base Ν,Ν-Dimethylformamid, Ν,Ν-Diäthylformamid,

.Ν,Ν-Dipropylformamid, Ν,Ν-Dibutylformamid, Ν,Ν-Dimethylacetamid, Ν,Ν-Diäthylacetamid, N,N-Dimethylvaleramid, Ν,Ν-Dimethylpropionamid, N-'ormylpiperidin oder N-Formylmorpholin verwendet.

15. Verfahren nach Anspruch 11, dadurch gekennzeichnet, dass man als Lewis-Base ein N,N-Dialkylcyanamid verwendet.

16· Verfahren nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet, dass man als Lewis-Base eine Verbindung der allgemeinen Formel R «r'n.C0NR².r' verwendet, in der R² und Έ? die in Anspruch angegebene Bedeutung besitzen.

17* Verfahren nach Anspruoh 1 bis 10, dadurch gekennzeichnet, dass man als Lewis-Basβ eine Verbindung der allgemeinen Formel

2 "3 2 ^5

R .R 30 verwendet, in der R und R^ die in Anspruch 13 angegebene Bedeutung besitzen.

18. Verfahren nach Anspruoh 11, dadurch gekennzeichnet, dass man als Lewis-Base eine Verbindung der allgemeinen Formel R CN verwendet, in der R* einen Alkylreet mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen bedeutet.

19. Verfahren nach Anspruoh 18, dadurch gekennzeichnet, dass man als Lewis-Base Acetonitril verwendet.

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20. Verfahren nach Anspruch 18 oder 19, dadurch gekennzeichnet, dass man ein Gemisch aus der Lewis-Base und einer organischen tertiären Base verwendet.

21. Verfahren nach Anspruch 20, dadurch gekennzeichnet, dass man als Base Triethylamin verwendet.

22. Verfahren nach Anspruch 18 oder 19, dadurch gekennzeichnet,

dass man ein Gemisch aus der Lewis-Base und einer zusätzlichen

1 2 3 Lewis-Base der allgemeinen Formel R .CO.KR R verwendet, in

12 3 der R , R und R die in Anspruch 13 angegebene Bedeutung besitzen.

23. Verfahren nach Anspruch 22, dadurch gekennzeichnet, dass man als zusätzliche Lewis-Base Ν,Ν-Dimethylacetamid verwendet.

24. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass man als 7-Aminocephalosporan8äuresalz das p-Toluolsulfonat verwendet.

25. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch

der

gekennzeichnet, dass man ein Halogenid mit einer/Acylgruppei verwendet, die in der Beschreibung unter 1.) bis 7.) aufgeführt sind.

26. Verfahren nach Anspruch 25, dadurch gekennzeichnet, dass man als Acylhalogenid 2-Thienyiacetylchlorid verwendet.

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27. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass man das Acylhalogenid in einem molaren Verhältnis von 1,1 bis 2,0 verwendet.

28. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass man die Acylierung bei einer Temperatur unter 25⁰G durchführt.

29. Verfahren nach Anspruch 28, dadurch gekennzeichnet, dass man die Acylierung bei einer Temperatur im Bereich von -5° bis +15⁰G durchführt.

30. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass man den Überschuss an Acylhalogenid durch Zugabe von Methanol zerstört»

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