DE3049382A1 - Material zur bestimmung des haematokritwertes - Google Patents
Material zur bestimmung des haematokritwertesInfo
- Publication number
- DE3049382A1 DE3049382A1 DE19803049382 DE3049382A DE3049382A1 DE 3049382 A1 DE3049382 A1 DE 3049382A1 DE 19803049382 DE19803049382 DE 19803049382 DE 3049382 A DE3049382 A DE 3049382A DE 3049382 A1 DE3049382 A1 DE 3049382A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- porous
- layer
- hydrophilic
- blood
- material according
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/52—Use of compounds or compositions for colorimetric, spectrophotometric or fluorometric investigation, e.g. use of reagent paper and including single- and multilayer analytical elements
- G01N33/525—Multi-layer analytical elements
Description
Material zur Bestimmung des Hämatokritwertes
Die Erfindung bezieht sich auf ein integrales Schichtmaterial zur Bestimmung des Hämatokritwertes von Blut,
welcher ein wichtiger Testfaktor auf dem Gebiet der medizinischen, klinischen oder physiologischen Hämatologie
ist.
Bekanntlich ist Blut aus Plasma und ZellenbestandteiLen
(nämlich Erythrozyten, Leukozyten, Thrombozyten und dgl.) zusammengesetzt. Der Volumenprozentsatζ an
Erythrozyten, bezogen auf das Volumen von Gesamtblut,
wird als Hämatokritwert bezeichnet, der ein wichtiger
Wert bei der Bewertung des Grades der Anämie ist. Verfahren zur Bestimmung des Hämatokritwertes
(nachstehend mit "HKT" abgekürzt), die bisher
130049/0503
•it-
verwendet wurden, umfassen ein Zentrifugierverfahren, eine
elektrische Widerstandsmethode, ein Verfahren zur Bestimmung des spezifischen Gewichtes und dgl. Jedoch besitzen diese
Verfahren die Nachteile, daß eine lange Zeitdauer und komplizierte Naßverfahren erforderlich sind, um diese Arbeitsweisen
auszuführen.
Aufgabe der Erfindung ist die Schaffung eines einfachen und trockenen HKT-Bestimmungsmaterials, welches die Bestimmung
des HET-Wertes nach einem Verfahren ermöglicht, bei
welchem lediglich ein Tropfen von außerordentlich geringer Menge an Gesamtblut aufgebracht wird.
Gemäß einer Aisführungsform umfaßt die Erfindung ein
integrales Material zur Bestimmung des Hämatokritwertes,
das einen wasserundurchlässigen planaren Träger mit einer darauf integral vorgesehenen porösen Ausbreitschicht umfaßt,
welche eine hydrophile Oberfläche aufweist und in welcher die Oberfläche von den inneren Hohlräumen oder das Innere
hydrophil und wasserunlöslich ist (was nachfolgend einfach mit "hydrophil"bezeichnet wird), wobei die poröse Ausbreitschicht
derartig ist, daß Blut in Abhängigkeit von der Ausbreitnatur, z.B. Viskosität des Blutes, durch diese hindurch
ausgebreitet werden kann. Gemäß einer zweiten Ausführungsform der Erfindung wird ein Material zur Bestimmung des Hämatokritwertes
der vorstehend angegebenen Art geschaffen, das zusätzlich eine Bindeschicht zwischen d«m Träger und
der porösen Ausbreitschicht umfaßt.
Die Erfindung wird nachstehend anhand der Zeichnung näher erläuterto
130049/0503
Pig. 1 zeij^t anhand einer sch.ematisch.en Schnittansicht
eine Ausführungsform eines HKT-Bestimmungsmaterials, das einei
wasserundurchlässigen planaren Träger mit einer darauf integral vorgesehenen hydrophilen Ausbreitschicht umfaßt.
Fig, 2 zeigt anhand einer schematischen Schnittansicht
eine Ausführungsform eines HKT-Bestimmungsmaterials, das
einen wasserundurchlässigen planaren Träger umfaßt, auf welchemin der angegebenen Reihenfolge eine Bindemittelschicht und eine hydrophile poröse Schicht aufgebracht sind.
einen wasserundurchlässigen planaren Träger umfaßt, auf welchemin der angegebenen Reihenfolge eine Bindemittelschicht und eine hydrophile poröse Schicht aufgebracht sind.
Fig. 5 zeigt in perspektivischer Darstellung eine ausgebreitete
Blutprobe, welche auf eine poröse Ausbreitschicht
eines HET-Bestimmungsblattes, wie schematisch in Fig. 2 gezeigt,
aufgebracht ist.
4 zeigt in schematischer Darstellung den Zustand,
bei welchem eine Blutprobe durch die poröse Ausbreitschicht eines HKT-Bestimmungsblattes, wie in Fig. 1 gezeigt, ausgebreitet
ist.
In den Figuren 1 bis 4 bezeichnen das Bezugszeichem 1
einen wasserundurchlässigen planaren Träger, das Bezugszeichen 2 eine Bindeschicht, das Bezugszeichen 3 eine
hydrophile poröse Ausbreitschicht, das Bezugszeichen 5 einen inneren Ausbreitkreis, das Bezugszeichen 6 einen äußeren Ausbreitkreis, das Bezugszeichen 7 den Durchmesser des äußeren Ausbreitkreises, das Bezugszeichen 8 den Durchmesser des
inneren Ausbreitkreises, das Bezugszeichen A die Richtung
der Auftragung der Blutprobe und der Betrachtung und der
Messung der Aasbreitkreise von der porösen AusbreitSchichtseite her und das Bezugszeichen B die Richtung der Betrach-
einen wasserundurchlässigen planaren Träger, das Bezugszeichen 2 eine Bindeschicht, das Bezugszeichen 3 eine
hydrophile poröse Ausbreitschicht, das Bezugszeichen 5 einen inneren Ausbreitkreis, das Bezugszeichen 6 einen äußeren Ausbreitkreis, das Bezugszeichen 7 den Durchmesser des äußeren Ausbreitkreises, das Bezugszeichen 8 den Durchmesser des
inneren Ausbreitkreises, das Bezugszeichen A die Richtung
der Auftragung der Blutprobe und der Betrachtung und der
Messung der Aasbreitkreise von der porösen AusbreitSchichtseite her und das Bezugszeichen B die Richtung der Betrach-
130049/0603
tung und Messung der Ausbreitkreise von der Trägerseite her,
wenn ein transparenter, wasserundurchlässiger planarer Träger verwendet wird.
Fig. 5 zeigt in graphischer Darstellung die Beziehung
zwisehen· dem HKT-Wert, bestimmt in Beispiel 1(G) und dem
Durchmesser des Ausbreitkreises (äußerer Kreis).
Die Erfindung wird nachstehend anhand der in der Zeichnung dargestellten HKT-Bestimmungsblätter, welche Ausführungsformen der Erfindung darstellen, näher erläutert. Das HKT-Bestimmungsblatt
gemäß der Erfindung hat einen Grundaufbau, wie in Fig. 1 gezeigt, worin eine poröse Ausbreitschicht 3
auf einem wasserundurchlässigen Träger 1 unter Bildung eines integralen Blattes vorgesehen ist, oder es besitzt einen Grundaufbau,
wie in Fig. 2 gezeigt, worin eine Bindemittelschicht 2 und eine poröse Ausbreitschicht 3 auf einem hydrophoben planaren
Träger 1 unter Bildung eines integralen Blattes vorgesehen sind. Die Bindemittelschicht 2 stellt keinen unbedingt
erforderlichen Bestandteil gemäß der Erfindung dar; jedoch wird sie bei dem gewöhnlichen Herstellungsverfahren bevorzugt
verwendet, um den hydrophoben Träger 1 mit der porösen Ausbreitschicht 3 in einem fließfähigen Berührungszustand
zu verkleben, wobei dieser Zustand in den US-PSen 3 922 158 und 4 042 335 und in dem US Reissue Patent 30 267 definiert
ist.
Bei der Bestimmung des HKT-Wertes wird ein Tropfen Gesamtblut auf das HKT-Bestimmungsblatt gemäß der Erfindung von
der Seite A her der porösen Ausbreitschicht, wie in Fig. 3 gezeigt, die eine perspektivische Ansicht des Blattes darstellt,
aufgebracht. Die Menge Gesamtblut, welche darauf aufgebracht werden soll, liegt zweckmäßig im Bereich zwischen
130049/0503 .. ,
etwa 5 und 100 yul, zeBo 10/Ul. Das so aufgebrachte Gesamtblut
breitet sieb, augenblicklich in die hydrophile, poröse
Ausbreitschicht konzentrisch in einer horizontalen Richtung unter Bildung eines gefärbten konzentrischen Innenkreises 5»
welcher Erythrozyten enthäl , und eines weniger gefärbten konzentrischen Außenkreises 6 innerhalb einiger 10 Sekunden
aus. Als Ergebnis hiervon ist die Ausbreitung einer Probe vervollständigt.
Der HKT-Wert kann bestimmt werden, indem man den Durchmesser
von dem Ausbreitaußenkreis 7 oder sowohl den Durchmesser
von dem Ausbreitaußenkreis als auch denjenigen des Ausbreitinnenkreises 8, wie in ]?ig._4 gezeigt, von der durch
den Pfeil A oder B angezeigten Richtung her mißt und in Beziehung zu einer vorhergehend hergestellten Umwandlungstabelle
oder Kalibrierung bringt.
Die Ausbreitschicht für das HKT-Bestimmungsblatt gemäß
der EKfillung kann eine faserige oder nicht-faserige poröse
Membran mit einer hydrophilen und wasserunlöslichen Oberfläche und mit inneren Hohlräumen, deren Oberfläche hydrophil
und wasserunlöslich ist, oder mit einem hydrophilen und wasserunlöslichen Inneren sein. Der gewünschte Grad an Porosität
variiert in Abhängigkeit von dem GracL an Hydrophilizität,
dem Zustand der Poren, der Form und der Verteilung der Poren und dgl. und es ist schwierig, spezifische Bereiche
festzulegen. Als allgemeine Richtschnur umfaßt jedoch die Ausbreitschicht ein nicht-faseriges poröses Material,dessen
mittlerer Porendurchmesser im Bereich von etwa 0,1 /um bis etwa 2,5 /um, vorzugsweise von etwa 0,4 /um bis etwa 2 /um
liegt, und falls die Ausbreitschicht ein faseriges poröses Material, z.B. ein Tuch, ist, wird ein Gewebe, das unter
Verwendung von zwei gefachten Garnen mit einer Garnzahl von etwa 100 bis etwa 200, vorzugsweise von etwa 120 bis etwa
130049/0503
COPY
^(.•bildet wurde, verwendet. Ein geeigneter Porositätsgrad
liegt im Bereich von etwa 20 bis etwa 80%, vorzugsweise von etwa 25 bis etwa 80%.
Beispiele für geeignete hydrophile poröse Ausbreitschichten, die verwendet werden können,umfassen nicht-faserige poröse
Membranen, wie in den US-PSen 3 553 067, 3 594- 263, 3 922 158,
4- 050 898 usw. beschrieben, solche, die durch Erteilung hydrophiler Eigenschaften an nicht-faserige poröse Membranen
hergestellt wurden, poröse teilchenförmige Membranen, hydrophil gemachte Gewebe, wie in der japanischen Patentanmeldung
Nr. 72 04-7/79j entsprechend der US-Patentanmeldung
Ser.No. 157 737 (angemeldet am 9· Juni 1980) beschrieben, Blätter, bestehend aus Glasfasern oder Papieren usw. Typische
Beispiele für Stoffe, welche verwendet werden können, können gestrickt, gewirkt oder gewebt sein und geeignete Beispiele
für Stoffe, welche verwendet werden können, umfassen Stoffe aus natürlichen Pasern oder Fäden, Stoffe aus gemischten
Garnen aus natürlichen Fasern und synthetischen Polymeren und Stoffe aus synthetischen Polymeren. Hiervon werden Membranfilter
mit den. nachstehend beschriebenen Eigenschaften besonders bevorzugt. Wenn derartige Membranfilter verwendet
werden, können solche mit einer Porengröße von etwa 0,1 yum bis etwa 3/um verwendet werden, wobei solche mit einer Porengröße
von etwa 0,4- Aim bis etwa 2 yum bevorzugt werden.
Die Dicke der porösen Ausbreitschicht ist nicht besonders begrenzt so lange die Dicke nicht geringer als etwa
10 yum ist; jedoch liegt die Dicke im Hinblick auf die Menge der aufgebrachten Flüssigkeit, der Meßgenauigkeit, der Handhabungseigenschaften
usw. im allgemeinen im Bereich von etwa 30 /um. bis etwa 3 mm, vorzugsweise von etwa 50 /um bis etwa
1 mm, insbesondere von 100 /um bis 5OO /um.
130049/0503
.}■■
Die gemäß der Erfindung verwendete poröse Ausbreitschicht
kann eine gleichförmige Struktur, bestehend aus einem einzigen Material, haben oder sie kann durch Kombination von zwei
oder mehreren Materialin mit verschiedenen physikalischen Eigenschaften zur Erzielung von verbesserten Eigenschaften
gebildet sein·
Geeignete Verfahren für das integrale Vorsehen einer porösen Aasbreitschicht auf einem wasserundurchlässigen
planaren Träger oder einer Bindeschicht (Bindemittelschicht) umfassen eine integrale Laminatbildung aus einer vorhergehend
hergestellten porösen Membran oder eines vorhergehend hergestellten Gewebes auf dem Träger oder der Bindeschicht und
das Aufbringen eines Überzugs aus einer Lösung oder einer Dispersion, die zur Bildung einer porösen Ausbreitschicht
auf dem Träger oder der Bindeschicht fähig ist, um dadurch eine poröse Ausbreitschicht integral auszubilden, wobei
beide Arbeitsweisen zweckmäßig angewendet werden.
Die poröse Ausbreitschicht zur Verwendung für das
Hämatokritwert-Bestimmungsblaut gemäß der Erfindung muß solche
Eigenschaften besitzen, daß die Oberfläche, auf welche die Probe aufgebracht werden soll, und die Oberfläche der
Hohlräume in der porösen Ausbreitschicht oder von deren
Innerem eine hohe Hydrophilizität aufweisen, und daß, wenn ein Tropfen Blut darauf aufgebracht wird, das Blut sich nahezu
isotropisch innerhalb der Ebene ausbreitet, auf welche das Blut aufgebracht ist. TJm solche Eigenschaften zu erhalten,
müssen die porösen Materialien einer Behandlung unterworfen werden, um sie in solcher Weise hydrophil zu machen.
Geeignete Behandlungen, welche zur Anwendung gelangen können, sind eine Oberflächenbehandlung unter Verwendung einer
130049/0503
./10·
hydrophilen Verbindung, z.B. eines kationischen, anionischen oder nicht-ionischen oberflächenaktiven Mittels oder eines
Weichmachers oder eines Kolloids (z.B. Gelatine ), eine Behandlung für die Erteilung eines solchen hydrophilen Verhaltens
beispielsweise durch Hydrolyse mit einer Säure oder einem Alkali, eine Behandlung, um chemisch ein solches hydrophiles
Verhalten durch Umsetzung mit einer hydrophilen Verbindung zu erteilen, eine Koronabehandlung, eine Flammenbehandlung,
eine Bestrahlungsbehandlung mit ultraviolettem Licht, eine elektrische Entladungsbehandlung, eine Vakuumabscheidungsbehandlung,
einer Aifsprüh- oder Zerstäubungsbehandlung usw.
Der Zusatz von Mitteln zur Stabilisierung des Farbtons von Hämoglobin, z.B. einem pH-Puffermittel, einem Antikoaguliermittel,
einem antihämolytischen Mattel, einem Antioxydationsmittel,
einem Oxydationsmittel usw., und von Erythro— zyten-Membran-Modifizierungsmitteln^.B. einem Farbstoff,
einem Pigment, einem anorganischen Salz, einem Aldehyd, einem Isocyanat, Wasserstoffperoxyd usw. zu der porösen Ausbreitschicht
dient zur Verbesserung der Genauigkeit oder zur Verbesserung der Arbeits- und Behandlungsweisen, wie Ablesen
(readout).
Geeignete wasserundurchlässige planare Trägermaterialien, die für die Bildung des HKT-Bestimmungsblattes gemäß
der Erfindung verwendet v/erden können, umfassen plattenartige Materialien aus Metall, Holz, Papier, Glas od. dgl.,
Folien aus synthetischem Harz z.B. Polyester (z.B. Polyäthylenterephthalat,
Bisphenol A-Polycarbonat usw.), Celluloseester (z.B. Cellulosediacetat, Cellulosetriacetat, Celluloseacetat-propionat
usw.) oder Polymethylmethacrylat od.dgl.Die
Dicke des wasserundurchlässigen planaren Trägers liegt im
130049/0503 COPY
•/11-
Bereich von. etwa 10 ,um bis etwa 3 inni, vorzu^cwei.se von etwa
20 /um bis etwa 1 inm, insbesondere von etwa ^>0 /um bis etwa
500 /um. Hiervon sind transparente plansre Trägei· bequora und
zweckmäßig, da sie das Messen des Durchmessers des Ausbreitungskreises
von jeder Seite des HKT-Bestimmungsblattes erlaube
Das HKT-Bestimmungsblatt gemäß der Erfindung umfaßt
einen wasserundurchlässigen planaren Träger mit einer darauf integral vorgesehenen hydrophilen porösen Ausbreitungsschicht,
die eine Bindeschicht enthalten kann, welche ein gleichförmiges Anhaften der porösen Ausbreitungsschicht an dem Träger
in einem fließfähigen Kontakt zustand und. eine Regelung der Ausbreitung einer Blutprobe durch die poröse Ausbreitungsschicht
innerhalb eines" geeigneten Bereiches"bewirkt. -
Ein hydrophobes Bindemittel kann für die Bindeschicht
verwendet werden, so lange es nicht vollständig Wasser abweist; für eine Bestimmung des HKT-Wertes mit hoher Genauigkeit
ist es jedoch, erwünscht, in erster Linie ein hydrophiles Bindemittel zu verwendeno
Eine auf die poröse Aus breitschicht aufgebrachte Blutprobe
wird innerhalb der Msbreitschicht gleichförmig ausgebreitet und bei Verwendung einer hydrophilen Bindeschicht
dringt es gleichzeitig in die Bindeschicht hinein. Die Bindeschicht besitzt im wesentlichen semipermeable Eigenschaften
und daher diffundieren Wasser und Verbindungen von niedrigem Molekulargewicht in die Bindeschicht und dringen in diese
ein, während Teilchen, wie Erythrozyten, Leukozyten, Thrombozyten usw. die Bindeschicht nicht durchdringen, sondern
gleichförmig in die poröse Ausbreitschicht hinein und an der Grenzfläche zwischen der porösen Ausbreitschicht und
der Bindeschicht ausgebreitet werden. Verbindungen von
130049/0503
./la-
hohem Molekulargewicht, wie z.B. Albumin und Globulin, dringen
in die Bindeschicht hinein oder auch nicht, in Abhängigkeit von dem Molekulargewicht und der Kristallinität des
Bindemittelpolymeren, welches die Bindeschichtmatrix bildet.
Geeignete hydrophobe Bindemittel, welche fib? die Bindeschicht verwendet werden können, umfassen thermoplastische
Harze, z.B. Polyvinylacetat,Polystyrol, Polymethylmethacry—
lat, Vinylchlorid-vinylacetat-copoljraierisate, Celluloseester
usw., und die hitzehärtenden Harze, z.B. Polyurethane, Melamin usw..
Geeignete hydrophile Bindemittel, welche für die Bindeschicht verwendet werden können, umfassen eine große Mannigfaltigkeit
von Materialien, z.B. natürliche Materialien von hohem Molekulargewicht (z.B. Gelatine, Agarose, Dextran usw.)
und hydrophile synthetische Materialien von hohem Molekulargewicht (z.B. Polyvinylalkohol, Polyacrylamid, Polyacrylsäure
usw.). Hiervon wird Gelatine für photographischen Gebrauch
aufgrund ihrer ausgezeichneten Quellungseigensciiaften für
Wasser, Gelbildungsfähigkeit, Hafteigenschaften, Wasserabsorptionseigenschaften
usw. und leichter Herstellbarkeit besonders bevorzugt.
Verschiedene Zusätze können der Bindeschicht zur Stabilisierung
des Farbtons von Hämoglobin und zur Verhinderung des Durchdringens, der Diffusion oder Ausfällung von Hämoglobin,
sowie zur Steuerung des Aisbreitens zugegeben werden·
Beispiele für Zusätze umfassen Materialien von niederem oder hohem Molekulargewicht, z.B. nicht-ionische, kationische
oder anionische oberflächenaktive Mittel, Weichmacher, anorganische Salze, organische Säuresalze, pH-Puffermittel,
Pigmente, Farbstoffe, feste, feine teilchenförmige Pasern,
130049/0503
. fib-
Oxydationsmittel, Reduktionsmittel, Säuren, Alkalien usw.
Zur Erleichterung des Ablesens von dem Durchmesser des
Ausbreitungskreises kann ein pH-Indikator, der in Abhängigkeit von dem pH-Wert von dem Blutserum gefärbt oder entfärbt
wird, oder ein Farbreagens, welches mit einem Blutserumbestandteil , z.B. Albumin, unter Bildiing einer Farbe reagiert,
z.B. Bromkresolgrün, verwendet werden.
Die Bindeschicht kann in einigen Fällen aus zwei oder mehreren Hilfsschichten gebildet werden, um das Haftungsvermögen
und die Leichtigkeit des Ablesens zu verbessern und um ein Eindrehen zu verhindern. Die Dicke der Bindeschicht
kann im Bereich von etwa 0,1 yum bis 1 mm, Vorzugs weise von 1 yum bis 100 /um und insbesondere von 5 /um bis
50 /um liegen..
Das HKT-Bestimmungsblatt gemäß der Erfindung kann also
in einem "Verfahren zur Bestimmung des HKT-Wertes durch bloße
Messen des Durchmessers des ausgebreiteten Blutkreises, der durch das Aufbringen eines Tropfens von Blut auf eine poröse
Ausbreitschicht des Blattes gebildet wurde, verwendet werden
Das Verfahren beruht auf dem Prinzip, daß die hydrophil poröse Ausbreitschicht hinsichtlich ihrer Blutausbreitungseigenschaften
weitgehend von der Viskosität der Probe oder von dem Gehalt an besonderen Bestandteilen im Blut abhängig
ist. Somit hat die poröse Ausbreitschicht unterschiedliche Eigenschaften von denjenigen der vorstehend beschriebenen
Ausbreitschicht, die in mehrschichtigen, integralen analytischen
Elementen für die chemische Analyse von Blut verwendet wird, wie in der Japanische Patentanmeldung (OPI)
Nr. 53 888/74- (entsprechend der US-PS 3 922 158) und
131 786/77 (entsprechend der US-PS 4050 898) und in der
130049/0503
japanischen Patentanmeldung Nr. 72 047/79 (entsprechend der
US-Patentanmeldung Ser. No. 157 737, angemeldet am 9· Juni
1980) beschrieben ist. So besitzt die Ausbreitschicht, die in den mehrschichtigen integralen analytischen Elementen verwendet
wird, das vorstehend beschriebene Verhalten in solcher Weise, daß, wenn eine bestimmte Menge einer Flüssigkeit auf
das Blatt aufgebracht wird, ein bestimmter JTüssigkeitsausbreitungsbereich
so erhalten wird, daß eine quantitative Analyse ausgeführt werden kann. In diesem Fall muß die ITüssigkeitsausbreitungsflache
bestimmt sein, selbst, wenn die Viskosität der zu analysierenden Probe etwas variiert,und
es werden verschiedene Mittel darin einverleibt, um solche Eigenschaften zu erzielen.
Andererseits ist die in dem HKT-BeStimmungsblatt gemäß
der Erfindung verwendete hydrophile, poröse Ausbreitschicht derartig, daß die Leichtigkeit, mit welcher sich Blut ausbreitet,
direkt von der Viskosität des Blutes abhängt. D.h. daß die poröse Ausbreitschicht ein solches Verhalten hat, daß
Blut mit einer niederen Viskosität, nämlich Blut mit einem niedrigen HKT-Wert, einen Ausbreitungskreis mit einem größeren
Durchmesser aufgrund der größeren Leichtigkeit, mit welcher sich dieses Blut ausbreitet, bildet, wohingegen
Blut mit einer hohen Viskosität, nämlich Blut mit einem hohen HKT-Wert einen Ausbreitungskreis mit einem kleineren
Durchmesser aufgrund der geringeren Leichtigkeit, mit welcher sich dieses Blut ausbreitet, bildet. Dies bedeutet, daß
der Durchmesser des Ausbreitungskreises und die Viskosität von Blut oder der Hämatokritwert in direktem Zusammenhang
mit einer negativen Proportionalitätskonstante stehen.Bei der Bestimmung des HKT-Wertes unter Verwendung des HKT-Bestimmungsblattes
gemäß der Erfindung wird die Beziehung zwischen dem Durchmesser des Ausbreitungskreises (oder der Fläche
des Aisbreitungskreises) und dem HKT-Wert vorhergehend er—
130049/0603
halten, indem man eine bestimmte Menge eines Standardblutfes
verwendet und auf diese Weise eine UmwandlungstäbeHe oder
eine Kalibrierungskurve herstellt. Der HKT-Wert einer unbekannten Blutprobe kann bestimmt werden, indem man einfach die
Probe auf die poröse Ausbreitschicht in der gleichen Menge, wie sie für die Herstellung der Umwandlungstabelle oder der
Kalibrierungskurve verwendet wurde, aufbringt und den Durchmesser
oder die Fläche des Ausbreitungskreises mißt.
Das HKT-Bestimmungsblatt gemäß der Erfindung besitzt
den weiteren wichtigen "Vorteil, daß nämlich der HKT-Wert
ohne genaues Abwiegen einer Blutprobe bestimmt werden kann. Blut ist aus einer Hämozytenkomponente und einer Blutserumskomponente
zusammengesetzt, und wenn es auf die Oberfläche der porösen Ausbreitschicht des HKT-Bestimmungsblatts gemäß
der Erfindung aufgebracht wird, werden Doppelkreise infolge der Ausbreitung gebildet, wobei der Innenkreis die Hämozyt enkomponente
enthält und der Außenkreis die Blutserumskomponente allein umfaßt. Es wurde nunmehr gefunden, daß das Verhältnis
von dem Durchmesser oder der Fläche des Innenkreises zu demjenigen des Außenkreises in einem bestimmten Verhältnis
zu dem HKT-Wert einer aufgebrachten Blutprobe steht. Somit kann der HKT-Wert ohne genaues Abwiegen einer Blutprobe
durch vorhergehendes Bestimmen des Verhältnisses von Durchmesser oder Fläche des Innenkreises zu demjenigen des Außenkreises
und Herstellen einer Kalibrierungskurve von HKT gegen das Durchmesser- oder Flächenverhältnis ähnlich wie bbei
dem vorstehend beschriebenen Verfahren der Ausbreitung einer bestimmten Probenmenge zur Bestimmung der Durchmesser von
Außen- und Innenausbrextungskreisen bestimmt werden.
130049/0503
Die Erfindung wird nachstehend anhand von Beispielen
näher erläutert.
Eine Lösung mit einem Gehalt von 0,2% Polyoxyäthylen-nonylphenoxy-äther
(nicht-ionisches oberflächenaktives Mittel, HS210, hergestellt von Nippon Oils & Fats Co., Ltd.) und
10% Gelatine wurde als Überzug auf eine 185 /um dicke, transparente
Polyäthylenterephthalat(PE(P)-Folie, die mit einer
Haftschicht von Gelatine versehen war, aufgebracht, um eine Bindeschicht mit einer Trockendicke von 15 /Umj bestehend
aus Gelatine, zu bilden« Diese Überzugsschicht wurde mit Wasser gequollen und Microfilter FM-120. (Warenzeichen für
Cellulosetriacetat, hergestellt von Fuji Photo Film Co., Ltd.) mit einer mittleren Porengröße von 1,2 /Um und einem
Gehalt von 0,5% (bezogen auf Gewicht) eines oberflächenaktiven Mittels, HS210, wurde unter Pressen als Laminat aufgebracht,
um ein ΗΚΤ-Bestimmungsblatt zu bil en.
Ein frisches ACD Konservenblut (konserviertes Blut mit
einem Gehalt an Natriumeitrat, Citronensäure und Dextrose als Konservierungsmittel) wurde zentrifugiert, um es in eine
Hämozytenkomponente und eine Blutserumskomponente zu trennen. Dann wurden diese Komponenten miteinander in verschiedenen
Verhältnissen vermischt, um Proben herzustellen. Der HKT-Wert von jeder der so hergestellten Proben wurde unter Verwendung
einer AMCO-Zentrifuge (E-24) und eines Kapillarhämatokritrohres
gemessen. Auf diese Weise wurden Standardproben mit einem HKT-Wert von 0 bis 70% erhalten.
130049/0503
■ AT-
C. Messung;
Das vorstehend unter (A) hergestellte HKT-Bestimmungsblatt
wurde zu 30 χ 30 mm Quadrate geschnitten. 10 /ul von
jeder Blutprobe von 0 bis 70% im HKT-Wert,wie vorstehend unte:
(B) hergestellt, wurden in eine Mikropipette aufgenommen und auf das Quadrat des HKT-Bestimmungsblattes aufgebracht. 30
Sekunden nach dem Aufbringen wurden Doppelkreise erhalten, wobei der Innenkreis die Erythrozyten und der Aißenkreis
das Blutserum enthielt. Der Außendurchmesser von jedem Kreis wurde von der der Probenauftragsseite gegenüberliegenden
Seite, d.h. von der Seite des transparenten PET-Films,
her gemessen· Der Durchmesser des Außenkreises und der HCT-Wert, erhalten in (C) bestätigten die Beziehung, wonach der
Durchmesser des (AuJßen)-Ausbreitungskreises in direkter
Beziehung zu dem HKT-Wert mit einer negativen Proportionalität skonst ante stand, wie dies in Fig. 5 gezeigt ist.
Ein Tropfen (etwa 20 /ul") von jeder Blutprobe mit 7
bis 61% HEP, wie in Beispiel 1 (B) hergestellt, wurde auf ei 30 χ 3o mm Quadrat des HKT-Bestimmungsblattes, wie in
Beispiel 1 (A) hergestellt, aufgebracht. 30 Sekunden nach
dem .Aufbringen wurden der Durchmesser des Erythrozyten enthaltenden
Innenkreises und der Durchmesser des Blutserum umfassenden Außenkreises gemessen, um das Verhältnis zu
bestimmen. Auf diese Weise wurden die in der nachstehenden Tabelle I aufgeführten Ergebnisse erhalten. Tabelle I zeigt,
daß das Verhältnis des Durchmessers des Innenkreises zu dem des Außenkreises in linearer Beziehung zu dem HKT-Wert stehi
130049/0503
304938? -ji-
■fit-
HKT__(%)
16 27 38 44 61
Ausbreitungskreis 0,33 0,41 0,48 0,56 0,58 0,57
Innendurchmesser/
Außendurchmesser
Auf eine poröse Ausbreitschicht eines wie in Beispiel 1 beschrieben, hergestellten HKT-Bestimmungsblattes wurden
1Q All frisches Blut aufgebracht, das unter Verwendung von
Heparin als Antikoaguliermittel einer menschlichen Vene
entnommen worden war. 30 Sekunden nach dem Aufbringen wurde
der .Durchmesser des Außenausbreitungskreises gemessen, der 9,5 mm betrug. Der HKT-Wert wurde n±t 43% aus der in I1Xg. 5
gezeigten Kalibrierungskurve bestimmt.
Andererseits wurde der HKT-Wert der gleichen Blutprobe
gemäß dem Zentrifugierverfahren unter Verwendung eines Hämatokritrohres
in der gleichen Weise wie in Beispiel 1 (B) bestimmt. Dabei betrug der bestimmte HKT-Wert 43%.-
Bies zeigte, daß der unter Verwendung des HKT-Bestimmungsblattes
gemäß der Erfindung bestimmte HKT-Wert gut mit dem
HKT-V/ert übereinstimmte, der gemäß dem üblichen Zentrifugierverfahren
unter Verwendung eines Hämatokritrohres bestimmt
wurde.
130049/05 03 COPY
Auf -ein 18 nun breites im Handel erhältliches Klebeband
(hergestellt von Nitto Electric Industrial Co., Ltd.), das einen 100 /um dicken transparenten Polyäthylenterephthalatfilm
mit einem darauf aufgebrachten Überzug aus einer druckempfindlichen
Klebstoffzusammensetzung umfaßte, wurde ein Mikrofilter (FM-80, hergestellt von Fuji Photo EiIm Co., Ltd.)
mit einer mittleren Porengröße von 0,8 /um, das durch Imprägnierung mit 0,2% Alkylphenoxypolyäthoxyäthanol (nichtionisches oberflächenaktives Mittel, Triton X-/+05, hergestellt
von Rohm und Haas) hydrophil gemacht worden war, unter Druckanwendung auflaminiert, um dadurch ein HKT-Bestimmungsblat-t-..her
zus teilen.
. Ein Tropfen von jeder der in Beispiel A (B) hergestellten
Standardblutproben" wurde auf dieses Blatt aufgebracht, um den Durchmesser des Außenausbreitungskreiaes zu messen.
Eine lineare Beziehung wurde zwischen dem gemäß dem gebräuchlichen Zentrifugierverfahren bestimmten HKT-Wert und dem
Durchmesser des Ausbreitungskreices beobachtet.
130049/0503
Claims (1)
- .-{040382Patentansprüche1O) Material zur Bestimmung des Hamatokritwertes, dadurch gekennzeichnet, daß es einen wasserundurchlässigen planaren Träger mit einer darauf integral vorgesehenen porösen Ausbreitschicht umfaßt, welche eine hydrophile Oberflache aufweist und in welcher die Oberfläche der inneren Hohlräume oder das Innere hydrophil und wasserunlöslich ist, wobei die poröse Ausbreitschicht derartig ist, daß Blut sich hierdurch in Abhängigkeit von der Ausbreitungsnatur des Blutes ausbreitet.20) Material nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß zwischen dem planaren Trager "und der porösen.Aüsbrertschicht eine Bindeschicht vorgesehen ist. _.. -3.) Material nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dni die hydrophile poröse Ausbreitschicht einen mittleren Porendurchmesser im Bereich von etwa 0,1 /Um bis etwa 2,5 ,um aufweist.4.) Material nach einem der Ansprüche 1 bis 3» dadurch gekennzeichnet, daß die hydrophile poröse Ausbreitschicht wasserunlöslich ist.5.) Material nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß die hydrophile poröse Ausbreitschicht eine Schicht aus einem nicht-faserigen porösen Material oder aus einem faserigen porösen Material umfaßt.6.) Material nach Anspruch 5» dadurch gekennzeichnet, daß das nicht-faserige poröse Material eine poröse Membran umfaßt.130049/QS0 3 COPY§0493827·) Material nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß das faserige poröse Material aus Glasfasern, einem Tuch oder Papier besteht.8.) Material nach einem der Ansprüche 1 "bis 7> dadurch gekennzeichnet, daß der wasserundurchlässige planare Träger transparent ist.9.) Material nach einem der Ansprüche 1 bis 8, dadurch gekennzeichnet, daß der wasserundurchlässige planare Träger ein Träger aus Metall, Holz, Papier, Glas oder einer synthetischen Harzfolie ist.10.) Material nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Bindeschicht eine Schicht aus einem hydrophilen Bindemittel ist.11.) Material nach Anspruch 7» dadurch gekennzeichnet, daß das Tuch ein solches ist, das unter Verwendung von zwei gefachten Garnen mit einer Garnzahl von etwa 100 bis etwa 200 gebildet worden ist.130049/0803
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP17362479A JPS5696245A (en) | 1979-12-28 | 1979-12-28 | Material for measuring hematocrit value |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE3049382A1 true DE3049382A1 (de) | 1981-12-03 |
Family
ID=15964054
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE19803049382 Withdrawn DE3049382A1 (de) | 1979-12-28 | 1980-12-29 | Material zur bestimmung des haematokritwertes |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4340565A (de) |
JP (1) | JPS5696245A (de) |
DE (1) | DE3049382A1 (de) |
GB (1) | GB2069131B (de) |
Families Citing this family (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS5782766A (en) * | 1980-11-11 | 1982-05-24 | Konishiroku Photo Ind Co Ltd | Amynological measuring element |
US4405560A (en) * | 1981-10-07 | 1983-09-20 | Murata Manufacturing Co., Ltd. | Carrier for holding analytical samples |
JPS58139067A (ja) * | 1982-02-12 | 1983-08-18 | Fuji Photo Film Co Ltd | 液体試料の測定法 |
US4491012A (en) * | 1982-10-04 | 1985-01-01 | Nuclepore Corp. | Method for measuring erythrocyte deformability |
US4478944A (en) * | 1982-11-24 | 1984-10-23 | Eastman Kodak Company | Analytical element containing a barrier zone and process employing same |
JPS59108942A (ja) * | 1982-12-14 | 1984-06-23 | Fuji Photo Film Co Ltd | シ−ト状分析要素を用いる定量方法 |
DE3323973A1 (de) * | 1983-07-02 | 1985-01-03 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Erythrozyten-rueckhaltesubstrate |
DE3583414D1 (de) * | 1984-04-27 | 1991-08-14 | Fuji Photo Film Co Ltd | Bestandteil eines analytischen elements zur analyse von einem festkoerper in einer fluessigen probe. |
US4880749A (en) * | 1984-06-05 | 1989-11-14 | Eastman Kodak Company | Analytical element and its use in a whole blood hemoglobin assay |
US4790979A (en) * | 1986-08-29 | 1988-12-13 | Technimed Corporation | Test strip and fixture |
EP0287651B1 (de) * | 1986-10-17 | 1992-09-09 | BAXTER INTERNATIONAL INC. (a Delaware corporation) | Verfahren und vorrichtung zur bestimmung von hämatokrit in einem system zur bearbeitung von blutbestandteilen |
US4952516A (en) * | 1987-06-12 | 1990-08-28 | Pall Corporation | Self-venting diagnostic test device |
US5565363A (en) * | 1991-10-21 | 1996-10-15 | Wako Pure Chemical Industries, Ltd. | Reagent composition for measuring ionic strength or specific gravity of aqueous solution samples |
US6058934A (en) * | 1995-11-02 | 2000-05-09 | Chiron Diagnostics Corporation | Planar hematocrit sensor incorporating a seven-electrode conductivity measurement cell |
AU2003228581A1 (en) * | 2002-04-17 | 2003-11-03 | Biosafe Medical Technologies, Inc. | Method and device for measurement of hematocrit |
JP4967389B2 (ja) * | 2005-03-29 | 2012-07-04 | 東レ株式会社 | 液体展開用シート |
WO2008079731A1 (en) * | 2006-12-22 | 2008-07-03 | Home Diagnostics, Inc. | Gel formation to reduce hematocrit sensitivity in electrochemical test |
DE102006062619B4 (de) * | 2006-12-29 | 2012-04-26 | Medion Diagnostics Ag | Verfahren zur Bestimmung von minoren Zellpopulationen in heterogenen Zellpopulationen |
Family Cites Families (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3992158A (en) * | 1973-08-16 | 1976-11-16 | Eastman Kodak Company | Integral analytical element |
US3990849A (en) * | 1975-02-07 | 1976-11-09 | Technicon Instruments Corporation | Separation of cells from liquid components of blood |
CA1095819A (en) * | 1977-01-14 | 1981-02-17 | Eastman Kodak Company | Element for analysis of liquids |
US4166093A (en) * | 1977-08-08 | 1979-08-28 | Eastman Kodak Company | Reduction of detectable species migration in elements for the analysis of liquids |
US4160008A (en) * | 1978-01-26 | 1979-07-03 | Miles Laboratories, Inc. | Multilayered test device for determining the presence of a liquid sample component, and method of use |
US4260392A (en) * | 1978-07-07 | 1981-04-07 | Technicon Instruments Corporation | Method and apparatus for obtaining an aliquot of a liquid in a gel medium |
US4250257A (en) * | 1978-08-24 | 1981-02-10 | Technicon Instruments Corporation | Whole blood analyses in porous media |
-
1979
- 1979-12-28 JP JP17362479A patent/JPS5696245A/ja active Granted
-
1980
- 1980-12-29 GB GB8041375A patent/GB2069131B/en not_active Expired
- 1980-12-29 DE DE19803049382 patent/DE3049382A1/de not_active Withdrawn
- 1980-12-29 US US06/221,183 patent/US4340565A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
GB2069131B (en) | 1984-09-05 |
JPS6217706B2 (de) | 1987-04-18 |
JPS5696245A (en) | 1981-08-04 |
US4340565A (en) | 1982-07-20 |
GB2069131A (en) | 1981-08-19 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE3100156C2 (de) | ||
DE3049382A1 (de) | Material zur bestimmung des haematokritwertes | |
EP0045476B1 (de) | Verfahren zur Abtrennung von Plasma oder Serum aus Vollblut | |
DE2922958A1 (de) | Mehrschichtiges integrales element zur chemischen analyse von blut | |
EP0175990B1 (de) | Membran für Reagenzträgerschichten, Verfahren zu deren Herstellung, sowie deren Verwendung in analytischen Mitteln und Analysenverfahren | |
DE19781288B4 (de) | Opake Reaktionsmatrix zur Analyse von Vollblut | |
DE3021166C2 (de) | ||
EP0113896B2 (de) | Teststreifen | |
DE2752352C3 (de) | Prüfmittel zum Nachweis und zur Bestimmung einer Komponente in einer Probe | |
DE2717817C2 (de) | Analytisches Element | |
DE4209721A1 (de) | Materialien zum trennen von plasma oder serum von gesamtblut | |
EP0064710B1 (de) | Mehrschichtiges Testmittel zum Nachweis einer Komponente einer flüssigen Probe | |
DE4015589A1 (de) | Vorrichtung und deren verwendung zur abtrennung von plasma aus vollblut | |
DE3140239A1 (de) | Analysenmaterialfolie | |
EP0821234A2 (de) | Diagnostischer Testträger mit mehrschichtigem Testfeld und Verfahren zur Bestimmung von Analyten mit dessen Hilfe | |
DE2332760A1 (de) | Mehrschichtiges analytisches element fuer die quantitative spektrophotometrische analyse | |
DE2801476A1 (de) | Kolorimetrisches verfahren fuer die bestimmung von bilirubin | |
DE2949747A1 (de) | Integriertes material fuer die chemische analyse einer fluessigen probe | |
EP0750196B1 (de) | Mehrschichtiges Analysenelement zur Bestimmung eines Analyten in einer Flüssigkeit | |
DE2532918A1 (de) | Integrales analytisches element fuer die analyse von fluessigkeiten | |
DE3042857A1 (de) | Mehrschichtiges chemisches analysenmaterial zur analyse waessriger fluessigkeiten | |
DE3215983C2 (de) | ||
DE3132798A1 (de) | Verfahren und vorrichtung zur bestimmung von bilirubin | |
WO1992015879A1 (de) | Testträger zur bestimmung eines analyten aus vollblut | |
EP0586789B1 (de) | Gleichmässig verteilte Anreicherung einer in Lösung vorliegenden Substanz auf der feinporigen Seite einer asymmetrisch porösen Membran |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
8128 | New person/name/address of the agent |
Representative=s name: KOHLER, M., DIPL.-CHEM. DR.RER.NAT., 8000 MUENCHEN |
|
8128 | New person/name/address of the agent |
Representative=s name: SOLF, A., DR.-ING., 8000 MUENCHEN ZAPF, C., DIPL.- |
|
8130 | Withdrawal |