DE3434123C2 - - Google Patents

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Description

Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur Her­ stellung einer bioverträglichen Stoffzusammensetzung, die Poly-2-hydroxyethylmethacrylat und Hyaluronsäure oder ein Salz davon enthält, sowie geformte Gegenstände, die solche Zusam­ mensetzungen enthalten oder daraus gebildet sind.
Es ist bekannt, prothetische Vorrichtungen, wie künstliche Herzklappen, vaskuläre Transplantate etc. für ihre in-vivo- Anwendung durch Modifizieren des Artikels bzw. der prothe­ tischen Vorrichtung mit einer körperverträglichen Substanz bioverträglicher zu machen. Hyaluronsäure ist eine solche bekannte, natürlich vorkommende Substanz, die viele Anwen­ dungen in der Medizin und der Biologie aufweist. Hierzu wird beispielsweise auf die US 42 72 522 und die darin angege­ benen Veröffentlichungen hingewiesen.
Aus der DE-OS 26 31 908 ist ein vernetztes Polymeres aus Kollagen und einem Mucopolysaccharid bekannt. Als ein solches vernetztes Polysaccharid wird dort beispielsweise auch Hyaluronsäure beschrieben. Dabei werden jedoch Mucopolysaccharidlösungen eingesetzt.
Die Erfindung hat nun zum Ziel, polymere Gegenstände wie Gußartikel, Filme, Folien, Fasern, Gewebe und Gewirke be­ reitzustellen, die Hyaluronsäure oder Salze davon enthalten, wobei die Hyaluronsäure durch den Artikel hindurch dispergiert und/oder als Überzug bzw. Auflage an der Oberfläche vorliegen soll.
Dieses Ziel wird durch das in Anspruch 1 definierte Verfahren erreicht. Dabei kann in einer bevorzugten Ausführungsform die Hyaluronsäure auch vernetzt werden, und zwar nach Herstellung des Artikels. Die auf diese Weise modifizierten polymeren Artikel sind daher gut geeignet zur Verwendung bei verschie­ denen prothetischen Vorrichtungen, wie künstliche Herzklappen, intraokulare Linsen, vaskuläre Transplantaten, Schrittma­ cherleitungen und dergleichen, sowie bei verschiedenen Arten von Arzneimittelzuführungssystemen.
Bei dem erfindungsgemäßen Verfahren wird die Hyaluronsäure in ein Polymer ein- und/oder auf die Oberfläche eines polymeren Körpers aufgebracht, indem man die Hyaluronsäure mit einer Polymerlösung oder einer Emulsion mischt und daraus einen Artikel oder Gegenstand, beispielsweise einen Film, bildet oder indem man diese Mischung als Überzug bzw. Auftrag auf einen solchen Gegenstand oder Artikel aufbringt. Dabei kann sowohl die Oberfläche des polymeren Substrates als auch die Hyaluronsäure aktiviert werden.
Gemäß in dem erfindungsgemäßen Verfahren wird die Hyaluronsäure in fester Form und zwar vorzugsweise als Pulver einer Polymerlösung aus Poly-2-hydroxyethylmethacrylat beige­ mischt und danach ein Artikel, beispielsweise ein Film aus der erhaltenen Mischung geformt und/oder ein Gegenstand wird mittels einer solchen Mischung überzogen und beschichtet.
Schließlich ist es erfindungsgemäß auch möglich, in dem zuvor beschriebenen Verfahren die Hyaluronsäure vor oder nach dem Mischen mit dem Polymer unter Verwendung verschiedener Vernetzungsmittel zu vernetzen.
Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele näher erläu­ tert.
Beispiel 1
Bei diesem Beispiel wurde ein nichtkovalent vernetztes Hydrogel, das Natriumhyaluronat enthält, in einer Hydro­ gelmatrix von Poly-2-ydroxyethylmethacrylat zuberei­ tet. Das Natriumhyaluronat ist durch die gesamte Matrix des Hydrogels und an der Oberfläche des Hydrogels ver­ teilt. Diese Substanz besitzt verbesserte elastische Eigenschaften und Bioverträglichkeitseigenschaften ge­ genüber dem gleichen Material, das Natriumhyaluronat nicht enthält.
1g einer linearen Poly-2-hydroxyethylmethacry­ lat-p-HEMA Polymerzubereitung wurde verwendet. Das Polymer wurde 10-15 Minuten lang mit dem Minimum von destilliertem Wasser vorgequollen. Das vorgequollene p-HEMA wurde dann langsam mit Ethanol bedeckt, wobei gerührt wurde, bis ein Gesamtbetrag von 20 ml zugege­ ben worden war, was eine viskose Lösung zur Folge hatte. Diese wurde dann zentrifugiert, um irgendwelches ungelö­ stes p-HEMA oder einen sonstigen unlöslichen Stoff zu entfernen. 2-4 mg Na-HA wurde vorgequollen, dann in 10 ml destilliertem Wasser gelöst. Ein gleiches Volumen Ethanol wurde dann beigemischt. Die p-HEMA-Lösung und die Na-HA-Lösungen wurden dann einander beigemischt, und das Gemisch wurde entweder in Glasschalen gegossen und in einem Gebläseofen bei 60°C getrocknet, um Filme zu erhalten, oder auf einen rotierenden Glaskern (mit Silikon bedeckt) aufgebracht und durch Verdampfung in einem warmen Luftstrom getrocknet, um eine Röhre zu er­ halten. Das getrocknete Polymergemisch ergab einen sprö­ den Film, der in Wasser quellen mußte, um ein elastisches, nichtsprödes Material mit opakem Aussehen zu erhalten.
Die Bioverträglichkeit der Zubereitungen gemäß der Erfindung wurde durch den nachstehend beschriebenen Ver­ such bewiesen.
Beispiel 2 - Blutverträglichkeitstest
Die Freisetzung von 3H-Serotonin durch menschliche Blutplättchen wurde in vorausgehenden Studien angewendet, um die Blutreaktivität des Produktes des Beispiels 1 ab­ zuschätzen. Normales menschliches venöses Blut wurde in Kunststoffspritzen abgezogen und unmittelbar in Kunst­ stöffröhrchen übermittelt, die 3,8% Natriumcitrat (ein Teil Citrat und neun Teile Vollblut) enthielten. Blut­ plättchenreiches Plasma wurde durch Zentrifugierung bei­ 4°C 15 Minuten lang, 125 x g, zubereitet und durch eine serologische Pipette in eine Kunststoff- oder silizierte Teströhre entfernt. 3H-Serotonin (3H-5-hydroxytryptamine, 3H-5HT: New England Nuclear, 26,3 Ci/mmol, lmCi/ml ethanol-water) wurde dem plättchenreichen Plasma (plate­ let rich plasma = PRP), 0,2-0,5 ul/ml PRP, beigemischt und 15 Minuten lang bei 37°C inkubiert. Bei der Prüfung wurden silizierte oder Polypropylen-Teströhren verwendet; Thrombin wurde als Positivkontrolle benutzt, belegte und unbelegte Proben wurden geprüft. 1,0-2,0 ml 3H-5HT-PRP wurde jeder von Duplikatröhren, die zu untersuchende Proben enthielten zugegeben; eine 50 ul Aliquote wur­ de zur Ermittlung der Gesamtradioaktivität aus dem Kon­ trollgemisch entfernt. Im Anschluß an die entsprechende Inkubationszeit (10-120 Minuten) wurden 0,2-0,5 ml Ali­ quoten der Suspension entfernt und 2 Minuten bei 12 000 x g über Silikonöl in einer Eppendorf-Microfuge zentrifugiert. 50 ul des Überstandes wurden aus jeder Röhre entfernt, mit 5 ml eines flüssigen Szintillations­ fluids vermischt, und die Radioaktivität wurde durch Betaspektrometrie gemessen. Der Betrag von 3H-5HT, durch Thrombin freigesetzt oder die Testproben war die Zu­ nahme an Radioaktivität des Überstandes (Radioaktivität der experimentellen Proben minus Radioaktivitätskontrol­ le). Die überzogenen Proben des Produktes des Beispiels 1 waren konsistent weniger reagierend, vom Betrag des freigesetzten 3H-5HT aus betrachtet; die nichtüberzo­ genen Proben bewirkten eine 52% größere Freisetzung als die überzogenen Proben.

Claims (6)

1. Verfahren zur Herstellung einer bioverträglichen Poly-2-hydroxymethacrylat und Hyaluronsäure oder ein Salz davon enthaltende Stoffzusammensetzung, indem man zu einer Lösung des Acrylats Hyaluronsäure oder ihr Salz zusetzt und die Zusammensetzung abscheidet, dadurch gekennzeichnet, daß man die Hyaluronsäure oder ihr Salz
  • a) in fester pulverförmiger Form oder,
  • b) in Form von mit Hyaluronsäure oder dem Salz beschichteten Partikeln einsetzt.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man aus der Stoffzusammensetzung einen Körper bildet und die an der Oberfläche des Körpers vorliegende Hyaluronsäure vernetzt.
3. Ein geformter Gegenstand, hergestellt aus einer Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 oder 2.
4. Gegenstand nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß er ein Gußartikel, ein Film, eine Folie, eine Faser, ein Gewebe oder ein Gewirke ist.
5. Geformter Gegenstand, beschichtet mit einer Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 oder 2.
6. Gegenstand nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß er ein Gußartikel, ein Film, eine Folie, eine Faser, ein Gewebe oder ein Gewirke ist.
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