WO2009101956A1 - 新規 fki-3864 物質およびその製造方法 - Google Patents

新規 fki-3864 物質およびその製造方法 Download PDF

Info

Publication number
WO2009101956A1
WO2009101956A1 PCT/JP2009/052271 JP2009052271W WO2009101956A1 WO 2009101956 A1 WO2009101956 A1 WO 2009101956A1 JP 2009052271 W JP2009052271 W JP 2009052271W WO 2009101956 A1 WO2009101956 A1 WO 2009101956A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
fki
substance
culture
production
present
Prior art date
Application number
PCT/JP2009/052271
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Hiroshi Tomoda
Ryuji Uchida
Rokuro Masuma
Satoshi Omura
Original Assignee
School Juridical Person Kitasato Institute
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by School Juridical Person Kitasato Institute filed Critical School Juridical Person Kitasato Institute
Priority to US12/867,435 priority Critical patent/US8378125B2/en
Publication of WO2009101956A1 publication Critical patent/WO2009101956A1/ja

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D311/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings
    • C07D311/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only hetero atom, condensed with other rings ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D311/78—Ring systems having three or more relevant rings
    • C07D311/92—Naphthopyrans; Hydrogenated naphthopyrans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/145—Fungal isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/16—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing two or more hetero rings
    • C12P17/162—Heterorings having oxygen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. Lasalocid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
    • C12R2001/80—Penicillium

Definitions

  • the present invention relates to a novel KIFKI-3864 substance useful for the prevention and treatment of obesity and diseases caused by it by inhibiting the production of intracellular triacylglycerol and a method for producing the same.
  • the present invention also relates to a novel microorganism capable of producing this FKI-3864 substance and the use of the FKI-3864 substance.
  • Obesity is a state in which neutral fat, mainly triacylglycerol, has accumulated excessively in adipose tissue with excessive energy intake.
  • neutral fat mainly triacylglycerol
  • adipocytokines are dysregulated due to enlargement of adipose tissue, resulting in impaired glucose tolerance and hyperlipidemia. Therefore, obesity is considered to be a major risk factor for so-called lifestyle-related diseases such as hyperlipidemia, diabetes and hypertension.
  • pancreatic lipase inhibitors include noradrenaline neuroagonist mazindol® (novartispharma), serotonin / noradrenaline reuptake inhibitor sibutramine® (eisai), and cannabinoid receptor antagonist rimonabant® (sanofi Aventis) and orlistat (Chugai Pharmaceutical) are pancreatic lipase inhibitors.
  • a central appetite suppressant reduces lipid absorption by suppressing appetite, but may reduce health by reducing appetite, and it can also cause dry mouth, constipation, hallucinations, hallucinations and dependence. Side effects occur.
  • pancreatic lipase inhibitors may cause gastrointestinal side effects such as diarrhea, incontinence, and fatty stool, and the development of new anti-obesity drugs without side effects is desired.
  • An object of the present invention is to provide a new substance having a stronger inhibitory activity on the production of triacylglycerol. Another object is to provide a medicinal product useful for the prevention and treatment of obesity.
  • the present inventors have produced triacylglycerol in the culture solution of the filamentous fungus KIFKI-3864 newly isolated from soil. It was found that a substance having an inhibitory activity was produced. Subsequently, as a result of separating and purifying a triacylglycerol production inhibitory active substance from the culture, it was found to be a novel substance having the chemical structure described later, and this substance was designated as FKI-3864 substance.
  • the present invention has been completed on the basis of such findings, and relates to the “FKI-3864” substance, which is a compound represented by the following formula [I].
  • the present invention also relates to the above-mentioned FKI-3864 substance which is a compound represented by the following formula [II] and / or a compound represented by [III].
  • the present invention also cultivates a microorganism belonging to the genus Penicillium and capable of producing FKI-3864 substance in a medium, accumulates FKI-3864 substance in the culture, and collects FKI-3864 substance from the culture
  • the present invention relates to a method for producing a new “FKI-3864” substance.
  • the microorganism used in this method is preferably Penicillium pinophilum FKI-3864 (FERM P-21483).
  • the present invention relates to a microorganism belonging to the genus Penicillium and having the ability to produce an FKI-3864 substance, particularly a microorganism, Penicillium pinophilum FKI-3864-3 (FERM P-21483).
  • a novel substance FKI-3864 that inhibits the production of intracellular triacylglycerol can be provided.
  • This substance is expected to be useful as a prophylactic or therapeutic agent for obesity caused by accumulation of triacylglycerol and diseases caused thereby.
  • the present invention provides a microorganism belonging to the genus Penicillium and having the ability to produce a FKI-3864 substance, particularly a Penicillium pinophilum FKI-3864 strain.
  • FIG. 5 shows an ultraviolet absorption spectrum (in a methanol solution) of a FKI-3864 material according to the present invention.
  • FIG. 2 shows an infrared absorption spectrum (potassium bromide method) of a FKI-3864 material according to the present invention.
  • FIG. 5 shows a proton nuclear magnetic resonance spectrum (in deuterated chloroform) of a FKI-3864 material according to the present invention.
  • 2 shows a carbon nuclear magnetic resonance spectrum (in deuterochloroform) of a “FKI-3864” substance according to the present invention.
  • 2 shows an ultraviolet absorption spectrum (in a methanol solution) of the FKI-3864-1 material according to the present invention.
  • FIG. 2 shows an infrared absorption spectrum (potassium bromide method) of a FKI-3864-1 material according to the present invention.
  • FIG. 5 shows a proton nuclear magnetic resonance spectrum (in deuterated chloroform) of a FKI-3864-1 material according to the present invention.
  • 3 shows a carbon nuclear magnetic resonance spectrum (in deuterated chloroform) of a FKI-3864-1 material according to the present invention.
  • 2 shows an ultraviolet absorption spectrum (in a methanol solution) of a FKI-3864-2 material according to the present invention.
  • FIG. 2 shows an infrared absorption spectrum (potassium bromide method) of a FKI-3864-2 material according to the present invention.
  • FIG. 5 shows a proton nuclear magnetic resonance spectrum (in deuterated chloroform) of a “FKI-3864-2” material according to the present invention.
  • FIG. 2 shows a carbon nuclear magnetic resonance spectrum (in deuterated chloroform) of a FKI-3864-2 material according to the present invention.
  • a microorganism belonging to the genus Penicillium and capable of producing the FKI-3864 substance is cultured in a medium, and the FKI-3864 substance is accumulated in the culture.
  • the bacteriological properties of this strain are as follows. 1. Morphological characteristics The strain grew well on the Czapek yeast extract agar medium, the wort agar medium, the potato carrot agar medium, and the like, and the conidia was well established on the various agar mediums.
  • Penicillus is formed at the tip of the conidial pattern.
  • Penicillus is a two-wheeler and is composed of 3-5 phialides. The phialide was cylindrical and had a size of 7.5-12.5 ⁇ 2.0-2.5 ⁇ m. Fiaro-type conidia are formed from the tip of the phialide and become chained as the culture time elapses.
  • the conidia were spherical to subspherical, grayish green, size 2.3-2.8 ⁇ 2.3-2.8 ⁇ m, and the surface was smooth. 2.
  • Culture properties Table 1 shows the results of macroscopic observation when cultured on various agar media at 25 ° C for 7 days.
  • Optimal growth conditions are pH 4-5 and temperature 26.1-35.7 ° C.
  • the Penicillium pinophilum FKI-3864 strain it is preferable to use the Penicillium pinophilum FKI-3864 strain, but is not limited thereto, including artificial mutants and natural mutants of the strain, Any microorganism that belongs to the genus Penicillium and has the ability to produce the FKI-3864 substance can be used.
  • a nutrient medium containing a carbon source that can be assimilated by microorganisms a nitrogen source that can be digested, and an inorganic salt, a vitamin, and the like as required.
  • carbon sources that can be assimilated sugars such as glucose, fructose, maltose, lactose, galactose, dextrin, starch, and vegetable oils such as soybean oil are used alone or in combination.
  • Digestible nitrogen sources include peptone, yeast extract, meat extract, soy flour, cottonseed flour, corn steep liquor, malt extract, casein, amino acids, urea, ammonium salts, nitrates, alone or in combination It is done.
  • phosphates, magnesium salts, calcium salts, sodium salts, potassium salts, and other heavy metal salts such as iron salts, manganese salts, copper salts, cobalt salts, zinc salts, vitamins, and other FKI-3864 as required Those suitable for the production of the substance are added as appropriate.
  • an antifoaming agent such as liquid paraffin, animal oil, vegetable oil, silicon, or surfactant may be added as necessary.
  • the medium may be liquid or solid as long as the nutrient source is contained, but it is usually preferable to culture using a liquid medium.
  • the target substance is industrially produced in large quantities, it is preferable to culture with aeration and stirring.
  • the composition of the medium used for the preculture and the medium used for the production culture may be the same or different.
  • the culture temperature can be appropriately changed within the range in which the strain producing this FKI-3864 substance produces these substances, but is usually 20-30 ° C., preferably around 27 ° C. Cultures may be cultivated alone or in combination.
  • the culture time varies depending on the culture conditions, the production of the FKI-3864 substance is usually about 10 to 16 days when shaking culture and stationary culture are combined.
  • a method usually used for collecting a metabolite from a microorganism culture can be used.
  • the target substance is separated and purified by methods such as extraction with organic solvent, concentration, drying, adsorption, filtration, centrifugation, and chromatography.
  • the whole culture is extracted with a water-miscible organic solvent such as ethanol, and the organic solvent is removed from the extract under reduced pressure. After evaporation, the residue can be subsequently extracted with a water-immiscible organic solvent such as ethyl acetate.
  • a water-miscible organic solvent such as ethanol
  • a water-immiscible organic solvent such as ethyl acetate
  • known methods used for collecting fat-soluble substances for example, adsorption chromatography, gel filtration chromatography, thin layer chromatography, centrifugal countercurrent distribution chromatography, high performance liquid chromatography, etc., are appropriately combined, Alternatively, the FKI-3864 substance can be separated and purified by repetition.
  • This FKI-3864 substance can be further separated into FKI-3864-1 and FKI-3864-2 stereoisomers by separation means such as adsorption chromatography and high performance liquid chromatography.
  • separation means such as adsorption chromatography and high performance liquid chromatography.
  • the physicochemical properties of the FKI-3864-1 substance of the present invention are described below.
  • UV absorption spectrum UV absorption spectrum measured in methanol solution is as shown in FIG.
  • Infrared absorption spectrum The infrared absorption spectrum measured by the potassium bromide tablet method is as shown in FIG. 6, and shows characteristic absorption maxima such as ⁇ max 3403, 2929, 1639 cm ⁇ 1.
  • Specific rotation: [ ⁇ ] D 26 -190.1 ° (c 0.1, methanol)
  • Solubility in solvents Soluble in methanol, chloroform and ethyl acetate. Insoluble in water.
  • Proton and carbon nuclear magnetic resonance spectra The chemical shift of hydrogen (ppm) and the chemical shift of carbon (ppm) measured by Varian 600MHz nuclear magnetic resonance spectrometer in deuterated chloroform are as shown below. .
  • FKI-3864-2 were expected to be stereoisomers. Furthermore, analysis of the circular dichroism spectrum revealed that FKI-3864-1 and FKI-3864-2 are stereoisomers of the shaft part because the first cotton effect is reversed in polarity.
  • FKI-3864-1 and FKI-3864-2 are represented by the following structural formulas [II] and [III], respectively.
  • FFKI-3864 of the present invention has an inhibitory effect on intracellular triacylglycerol production, as shown in the test examples described later.
  • FKI-3864-1 and FKI-3864-2 each independently show an inhibitory action on intracellular triacylglycerol production.
  • the mixture of these two isomers shows various activities according to the mixing ratio, the mixture which shows a desired activity according to the objective can be selected and used. According to the test examples described later, the strongest activity is obtained when the mixture is 1: 1.
  • a disease in which excessive accumulation of intracellular triacylglycerol is involved as it is without separating the FKI-3864 substance of the present invention as it is, or when FKI-3864-1 and FKI-3864-2 are each independently or mixed.
  • it can be used for prevention and treatment of obesity.
  • it can be expected to be useful for the prevention and treatment of lifestyle-related diseases such as hyperlipidemia, diabetes and hypertension caused by obesity.
  • novel substance of the present invention When used as a pharmaceutical product, it is used as an active ingredient, and conventional carriers and excipients, if necessary, binders, disintegrants, lubricants, buffers, suspending agents, stabilizers A pH adjuster, a colorant, a corrigent, a fragrance, and the like may be added and formulated into a solution, suspension, tablet, granule, powder, capsule, etc. by a conventional method.
  • FKI-3864 substance producing method agar slant medium (glycerol 0.1% (Kanto Chemical), KH 2 PO 4 .08% ( Kanto Chemical), K 2 HPO 4 .02% ( Kanto Chemical), MgSO 4 ⁇ H 2 O 0.02 % (Wako Pure Chemical), KCl 0.02% (Kanto Chemical), NaNO 3 0.2% (Wako Pure Chemical), yeast extract 0.02% (oriental yeast), agar 1.5% (fresh water food, adjusted to pH 6.0) the FKI-3864 strain, the seed medium (2% glucose (Wako pure Chemical), 0.5% of polypeptone (Wako pure Chemical), MgSO 4 ⁇ 7H 2 O 0.05% ( Wako pure Chemical), 0.2% yeast extract (Oriental yeast), KH 2 PO 4 0.1% (Kanto Chemical), 0.1% agar (Shimizu food) adjusted to pH 6.0) was inoculated a platinum loop of 100 mL to 500 mL Erlenmeyer flask was dispensed, 3
  • Test Example 2 Using the same method as in Test Example 1, the inhibitory action of FKI-3864-1 substance and FKI-3864-2 substance on the production of intracellular triacylglycerol was measured. Consequently, FKI-3864-1 IC 50 of material 12 [mu] M or more, IC 50 of FKI-3864-2 material was measured to be 0.54 [mu] M. Furthermore, the activity when the FKI-3864-1 substance and the FKI-3864-2 substance are mixed at various ratios is as shown in Table 2. The strongest activity when the ratio is 1: 1 (IC 50 0.054 ⁇ M).

Abstract

　本発明は、トリアシルグリセロール生成の阻害活性を有する、下記式［Ｉ］で表されるFKI-3864物質およびその製造方法を提供する。FKI-3864物質の製造方法としては、ペニシリウム属に属し、FKI-3864物質を生産する能力を有する微生物、特に、ペニシリウム・ピノフィラムFKI-3864  (Penicillium pinophilum FKI-3864) (FERM P-21483)を培養し、培養物中にFKI-3864物質を蓄積せしめ、該培養物からFKI-3864物質を採取する方法がある。この物質は細胞内トリアシルグリセロール生成の阻害作用を有し、肥満の予防または治療に有用である。

Description

新規 FKI-3864 物質およびその製造方法
　本発明は、細胞内トリアシルグリセロールの生成を阻害して肥満やそれに起因する疾病の予防や治療に有用な新規 FKI-3864 物質およびその製造法に関する。また、本発明はこの FKI-3864 物質を生産する能力を有する新規微生物、および FKI-3864 物質の用途に関する。
　肥満は、過剰なエネルギー摂取に伴い、脂肪組織において中性脂肪、主としてトリアシルグリセロールが過剰に蓄積した状態である。肥満個体では脂肪組織が肥大することでアディポサイトカインの調節異常を生じ、その結果、耐糖能異常、高脂血症を引き起こす。そのため、肥満は高脂血症、糖尿病、高血圧症といったいわゆる生活習慣病の大きな危険因子であると考えられている。
　現在使用されている抗肥満薬に、中枢性食欲抑制剤としてノルアドレナリン神経作動薬のマジンドール (ノバルティスファーマ) 、セロトニン・ノルアドレナリン再取り込み阻害薬のシブトラミン (エーザイ) およびカンナビノイド受容体拮抗薬のリモナバン (サノフィ・アベンティス) が、膵リパーゼ阻害剤としてオルリスタット (中外製薬) がある。中枢性食欲抑制剤は食欲を抑えることで脂質吸収を減少させるものであるが、食欲を減退させることでかえって健康を害する場合があり、また、口渇、便秘、幻聴、幻視や依存性などの副作用が生じる。さらに膵リパーゼ阻害剤では下痢、失禁、脂肪便などの消化管性副作用が現れることがあり、副作用のない新たな抗肥満薬の開発が望まれている。
　脂肪組織におけるトリアシルグリセロールの過剰な蓄積が肥満を引き起こすことから、体内におけるトリアシルグリセロールの生成を阻害する物質は既存薬とは異なるメカニズムを有する抗肥満作用を示すと期待される。
　トリアシルグリセロールの蓄積を阻害する物質として、ジアシルグリセロールアシル転移酵素の阻害活性を有する物質が微生物により産生されることが報告されている（特許文献１、２、３）。
特開平8-182496号公報 国際公開第99/41265号 国際公開第00/58491号
　本発明の課題は、より強いトリアシルグリセロール生成の阻害活性を有する新たな物質を提供することである。また、肥満に対する予防、治療に有用な医薬品を提供することである。
　本発明者らは、微生物の生産する代謝産物を対象にトリアシルグリセロール生成阻害剤の検索を行った結果、新たに土壌から分離した糸状菌 FKI-3864 株の培養液中にトリアシルグリセロール生成を阻害する活性を有する物質が産生されていることを見出した。次いで、該培養物からトリアシルグリセロール生成阻害活性物質を分離、精製した結果、後述する化学構造を有する新規な物質であることを見出し、本物質を FKI-3864 物質と称することにした。
　本発明は、かかる知見に基づいて完成されたものであって、下記の式［Ｉ］で表される化合物である FKI-3864 物質に関するものである。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000004
　本発明はまた、下記式［II］で表される化合物及び／又は［III]で表される化合物である上記 FKI-3864 物質にも関する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000005
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000006
　本発明はまた、ペニシリウム属に属し、FKI-3864物質を生産する能力を有する微生物を培地に培養し、培養物中に FKI-3864 物質を蓄積せしめ、該培養物から FKI-3864 物質を採取することを特徴とする、新規 FKI-3864 物質の製造法に関するものである。この方法に用いる微生物としては、ペニシリウム・ピノフィラムFKI-3864  (Penicillium pinophilum FKI-3864) (FERM P-21483)が好ましい。
　さらに本発明は、ペニシリウム属に属し、FKI-3864物質を生産する能力を有する微生物、特に、微生物、ペニシリウム・ピノフィラムFKI-3864  (Penicillium pinophilum FKI-3864)  (FERM P-21483) に関するものである。
　本発明によれば、細胞内トリアシルグリセロールの生成を阻害する新規物質FKI-3864を提供することができる。この物質は、トリアシルグリセロールの蓄積が引き起こす肥満やそれに起因する疾病の予防薬または治療薬として有用であると期待される。さらに、本発明により、ペニシリウム属に属し、FKI-3864物質を生産する能力を有する微生物、特にペニシリウム・ピノフィラムFKI-3864  (Penicillium pinophilum FKI-3864) 株が提供される。
本発明による FKI-3864 物質の紫外部吸収スペクトル（メタノール溶液中）を示したものである。 本発明による FKI-3864 物質の赤外部吸収スペクトル（臭化カリウム法）を示したものである。 本発明による FKI-3864 物質のプロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム中）を示したものである。 本発明による FKI-3864 物質のカーボン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム中）を示したものである。 本発明による FKI-3864-1 物質の紫外部吸収スペクトル（メタノール溶液中）を示したものである。 本発明による FKI-3864-1 物質の赤外部吸収スペクトル（臭化カリウム法）を示したものである。 本発明による FKI-3864-1 物質のプロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム中）を示したものである。 本発明による FKI-3864-1 物質のカーボン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム中）を示したものである。 本発明による FKI-3864-2 物質の紫外部吸収スペクトル（メタノール溶液中）を示したものである。 本発明による FKI-3864-2 物質の赤外部吸収スペクトル（臭化カリウム法）を示したものである。 本発明による FKI-3864-2 物質のプロトン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム中）を示したものである。 本発明による FKI-3864-2 物質のカーボン核磁気共鳴スペクトル（重クロロホルム中）を示したものである。
発明を実施するための形態
　本発明のFKI-3864物質を製造するには、ペニシリウム属に属し、FKI-3864物質を生産する能力を有する微生物を培地に培養し、培養物中に FKI-3864 物質を蓄積せしめ、該培養物から FKI-3864 物質を採取する方法が使用できる。 FKI-3864 物質の生産に使用される菌株としては、一例として、本発明者等によって土壌より新に分離されたPenicillium pinophilum FKI-3864 株が挙げられる。
　本菌株の菌学的性状は以下の通りである。
１．形態的特徴
　本菌株は、ツァペック・イーストエキス寒天培地、麦芽汁寒天培地、ポテト・キャロット寒天培地などで良好に生育し、各種寒天培地で分生子の着生は良好であった。
　ツァペック・イーストエキス寒天培地に生育したコロニーを顕微鏡で観察すると、菌糸は無色で隔壁を有しており、分生子柄（50-180×1.0-2.5 μm ）は、気菌糸より直立して生じ、分岐することはなかった。分生子柄の先端にはペニシルスが形成される。ペニシルスは二輪生で、3-5 本のフィアライドが群生して構成される。フィアライドは円筒型で、大きさ7.5-12.5×2.0-2.5 μm であった。フィアライドの先端からフィアロ型分生子が形成され、培養時間の経過とともに連鎖状となる。分生子は、球形から亜球形、灰緑色、大きさ2.3-2.8 ×2.3-2.8 μm で、表面は滑面であった。
２．培養性状
　各種寒天培地上で、25℃、7 日間培養した場合の肉眼的観察結果を表１に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000007
３．生理的性状
　１）最適生育条件
　　　　本菌株の最適生育条件は　pH 4～ 5、温度26.1～35.7℃である。
　２）生育の範囲
　　　　本菌株の生育範囲は　pH 2～ 8、温度14.4～37.8℃である。
　３）好気性、嫌気性の区別
　　　　好気性
　上記FKI-3864株の形態的特徴、培養性状および生理的性状に基づき、既知菌種との比較を試みた結果、本菌株はペニシリウム・ピノフィラム (Penicillium pinophilum) に属する一菌株と同定し、ペニシリウム・ピノフィラムFKI-3864と命名した。なお本菌株はペニシリウム・ピノフィラムFKI-3864  (Penicillium pinophilum FKI-3864) として、日本国茨城県つくば市東1-1-1 中央第６の独立行政法人産業技術総合研究所特許生物寄託センター（IPOD) に平成19年12月27日に寄託された (受託番号：FERM P-21483) 。
  本発明のFKI-3864物質を製造するには、上記ペニシリウム・ピノフィラムFKI-3864株を用いるのが好ましいが、これに限定されることなく、該株の人工変異株や自然変異株も含めた、ペニシリウム属に属しFKI-3864物質を生産する能力を有する微生物であればすべて使用することができる。
　上記微生物を培養するための培地としては、栄養源に微生物が同化し得る炭素源、消化し得る窒素源、さらに必要に応じて無機塩、ビタミン等を含有させた栄養培地が使用される。同化し得る炭素源としては、グルコース、フラクトース、マルトース、ラクトース、ガラクトース、デキストリン、澱粉等の糖類、大豆油等の植物性油脂類が単独でまたは組み合わせて用いられる。消化し得る窒素源としては、ペプトン、酵母エキス、肉エキス、大豆粉、綿実粉、コーン・スティープ・リカー、麦芽エキス、カゼイン、アミノ酸、尿素、アンモニウム塩類、硝酸塩類が単独でまたは組み合わせて用いられる。その他必要に応じてリン酸塩、マグネシウム塩、カルシウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩などの塩類、鉄塩、マンガン塩、銅塩、コバルト塩、亜鉛塩等の重金属塩類やビタミン類、その他FKI-3864物質の生産に好適なものが適宜添加される。
  培養の際、発泡が激しいときには、必要に応じて液体パラフィン、動物油、植物油、シリコン、界面活性剤等の消泡剤を添加してもよい。上記の培養は、上記栄養源を含有すれば、培地は液体でも固体でもよいが、通常は液体培地を用い培養するのがよい。目的物質を大量に工業生産する場合には、通気攪拌培養するのが好ましい。
  培養を大きなタンクで行う場合には、生産工程において菌の生育遅延を防止するために、はじめに比較的少量の培地に生産菌を接種培養した後、次に培養物を大きなタンクに移して、そこで生産培養するのが好ましい。この場合、前培養に使用する培地および生産培養に使用する培地の組成は、同一であっても異なっていてもよい。
  培養を通気攪拌条件で行う場合は、例えばプロペラやその他機械による攪拌、ファンメーターの回転または振盪、ポンプ処理、空気の吹き込み等、既知の方法が適宜使用される。通気用の空気は滅菌したものを使用する。
  また、培養温度は、本FKI-3864物質の生産菌がこれらの物質を生産する範囲内で適宜変更し得るが、通常は20～30℃、好ましくは27℃前後で、適宜振盪培養と静置培養を単独または組み合わせて培養するのがよい。
　培養時間は培養条件によっても異なるが、FKI-3864物質の生産には、振盪培養と静置培養を組み合わせた場合、通常、10～16日程度である。
　培養物に蓄積された本発明の新規物質を採取するには、微生物培養物から代謝産物を採取するのに通常使用される方法を用いることができる。例えば、有機溶媒による抽出、濃縮、乾燥、吸着、濾過、遠心分離、クロマトグラフィーなどの方法により目的物質を分離・精製する。
　本発明のFKI-3864物質を、ペニシリウム・ピノフィラムFKI-3864株の培養物から採取するには、全培養物をエタノール等の水混和性有機溶媒で抽出し、抽出液より減圧下において有機溶媒を留去した後、続いて残渣を酢酸エチル等の水不混和性有機溶媒で抽出することによって行うことができる。これらの抽出法に加え、脂溶性物質の採取に用いられる公知の方法、例えば吸着クロマトグラフィー、ゲルろ過クロマトグラフィー、薄層クロマトグラフィー、遠心向流分配クロマトグラフィー、高速液体クロマトグラフィー等を適宜組み合わせ、または繰り返すことによってFKI-3864物質を分離、精製することができる。
  このようにして得られた本発明の FKI-3864 物質の理化学的性状について説明する。
（１）性状：黄色粉末
（２）分子式：C46H58O14 
　　　　　　　HRFAB-MS (m/z) [M+H]+ 　計算値835.3905, 実測値835.3934
（３）分子量：834 
　　　　　　　FAB-MS(m/z) で[M+H]+  835 を観測
（４）紫外部吸収スペクトル：メタノール溶液中で測定した紫外部吸収スペクトルは図１に示すとおりであり、λmax (MeOH,ε): 222(26667) 、269(70000)、382(21667)
（５）赤外部吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤法で測定した赤外吸収スペクトルは図２に示すとおりでありνmax 3398, 2924, 1637 cm-1 等に特徴的な吸収極大を示す。
（６）比旋光度： [α] D  26  ＋65.6°（c=0.1 、メタノール）
（７）溶剤に対する溶解性：メタノール、クロロホルムや酢酸エチルに可溶。水に不溶。
（８）プロトン及びカーボン核磁気共鳴スペクトル：重クロロホルム中で、バリアン社製600MHz核磁気共鳴スペクトロメータで測定した水素の化学シフト（ppm ）及び炭素の化学シフト（ppm ）は下記に示すとおりである。
　　δH : 0.89 (3H), 1.30 (6H), 1.49 (2H), 1.63 (2H), 1.88 (1H), 2.13 (1H), 3.09 (2H), 3.83 (3H), 3.92 (1H), 4.20 (1H), 4.87 (1H), 6.70 (1H), 6.96 (1H), 9.67 (1H) ppm
　　δC : 14.0, 22.6, 24.9, 31.7, 32.8, 38.3, 42.3, 42.9, 55.9, 69.5, 73.2, 78.1, 98.1, 99.3, 108.2, 108.4, 116.2, 132.7, 140.1, 155.4, 161.5, 162.8, 171.3 ppm 
　以上のように、FKI-3864物質の各種理化学性状やスペクトルデータを詳細に検討した結果、FKI-3864物質は下記の式［Ｉ］で表される化学構造であることが決定された。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000008
  このFKI-3864物質は、さらに吸着クロマトグラフィーや高速液体クロマトグラフィー等の分離手段により、FKI-3864-1およびFKI-3864-2の立体異性体に分離することができる。
  以下に本発明の FKI-3864-1 物質の理化学的性状について説明する。
（１）性状：黄色粉末
（２）分子式：C46H58O14 
　　　　　　　HRFAB-MS (m/z) [M+H]+ 　計算値835.3905, 実測値835.3923
（３）分子量：834 
　　　　　　　FAB-MS(m/z) で[M+H]+  835 を観測
（４）紫外部吸収スペクトル：メタノール溶液中で測定した紫外部吸収スペクトルは図５に示すとおりであり、λmax (MeOH,ε): 222(27250) 、269(93000)、382(27250)
（５）赤外部吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤法で測定した赤外吸収スペクトルは図６に示すとおりでありνmax 3403, 2929, 1639 cm-1 等に特徴的な吸収極大を示す。
（６）比旋光度： [α] D  26　－190.1 °（c=0.1 、メタノール）
（７）溶剤に対する溶解性：メタノール、クロロホルムや酢酸エチルに可溶。水に不溶。
（８）プロトン及びカーボン核磁気共鳴スペクトル：重クロロホルム中で、バリアン社製600MHz核磁気共鳴スペクトロメータで測定した水素の化学シフト（ppm ）及び炭素の化学シフト（ppm ）は下記に示すとおりである。
　　δH : 0.90 (3H), 1.30 (6H), 1.49 (2H), 1.63 (2H), 1.89 (1H), 2.14 (1H), 3.10 (2H), 3.84 (3H), 3.93 (1H), 4.22 (1H), 4.88 (1H), 6.71 (1H), 6.97 (1H), 9.68 (1H) ppm
　　δC : 14.0, 22.6, 24.9, 31.7, 33.0, 38.4, 42.2, 42.9, 55.9, 69.6, 73.3, 78.2, 98.1, 99.3, 108.2, 108.4, 116.3, 132.7, 140.1, 155.4, 161.5, 162.9, 171.3 ppm 
（９）円二色性スペクトル：λext (MeOH,Δε): 280 (-71), 251 (+85) 
  次に、本発明の FKI-3864-2 物質の理化学的性状について説明する。
（１）性状：黄色粉末
（２）分子式：C46H58O14 
　　　　　　　HRFAB-MS (m/z) [M+H]+ 　計算値835.3905, 実測値835.3934
（３）分子量：834 
　　　　　　　FAB-MS(m/z) で[M+H]+  835 を観測
（４）紫外部吸収スペクトル：メタノール溶液中で測定した紫外部吸収スペクトルは図９に示すとおりであり、λmax (MeOH,ε): 222(24750) 、269(80000)、382(22333)
（５）赤外部吸収スペクトル：臭化カリウム錠剤法で測定した赤外吸収スペクトルは図１０に示すとおりでありνmax 3403, 2929, 1639 cm-1 等に特徴的な吸収極大を示す。
（６）比旋光度： [α] D  26　＋246.3 °（c=0.1 、メタノール）
（７）溶剤に対する溶解性：メタノール、クロロホルムや酢酸エチルに可溶。水に不溶。
（８）プロトン及びカーボン核磁気共鳴スペクトル：重クロロホルム中で、バリアン社製600MHz核磁気共鳴スペクトロメータで測定した水素の化学シフト（ppm ）及び炭素の化学シフト（ppm ）は下記に示すとおりである。
　　δH : 0.90 (3H), 1.30 (6H), 1.49 (2H), 1.63 (2H), 1.88 (1H), 2.14 (1H), 3.10 (2H), 3.85 (3H), 3.92 (1H), 4.20 (1H), 4.88 (1H), 6.71 (1H), 6.97 (1H), 9.67 (1H) ppm
　　δC : 14.0, 22.6, 24.9, 31.7, 32.8, 38.4, 42.1, 42.9, 56.0, 69.5, 73.4, 78.1, 98.1, 99.3, 108.2, 108.4, 116.3, 132.7, 140.1, 155.4, 161.5, 162.8, 171.3 ppm 
（９）円二色性スペクトル：λext (MeOH,Δε): 278 (+48), 255 (-69) 
　以上のように、FKI-3864-1およびFKI-3864-2の理化学的性状およびスペクトルデータはFKI-3864物質とほぼ一致し、比旋光度のみが大きく異なる値を示したことからFKI-3864-1およびFKI-3864-2は立体異性体と予想された。さらに、円二色性スペクトルの解析によって第一コットン効果の正負が逆であるためFKI-3864-1およびFKI-3864-2は軸部分の立体異性体であることが明らかとなった。
  FKI-3864-1およびFKI-3864-2は、それぞれ以下の構造式[II]および[III] で表される。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000009
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000010
  本発明のFKI-3864は、後述の試験例に示すように、細胞内トリアシルグリセロール生成に対する阻害作用を有する。また、FKI-3864-1およびFKI-3864-2もそれぞれ単独で細胞内トリアシルグリセロール生成に対する阻害作用を示す。そして、この２つの異性体の混合物はその混合比に応じて種々の活性を示すので、目的により望ましい活性を示す混合物を選択して使用することができる。後述の試験例によれば、最も強い活性を示すのは１：１で混合した場合である。
　従って、本発明のFKI-3864物質を分離せずにそのまま、あるいはFKI-3864-1およびFKI-3864-2をそれぞれ単独でまたは混合して、細胞内トリアシルグリセロールの過剰な蓄積が関与する疾患、例えば肥満などに対する予防や治療に使用できる。さらに、肥満に起因する高脂血症、糖尿病、高血圧症などの生活習慣病の予防、治療に対しても有用であることが期待できる。
　本発明の新規物質を医薬品として用いる場合は、これを有効成分とし、慣用の担体や賦形剤、必要に応じ結合剤、崩壊剤、滑沢剤、緩衝剤、懸濁化剤、安定化剤、pH調節剤、着色剤、矯味剤、香料などを添加し、常法により製剤化して、溶液、懸濁液、錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤などにすればよい。
　以下に実施例を挙げて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれのみに限定されるものではない。
  FKI-3864物質の製造方法
　寒天斜面培地 (グリセロール 0.1 % (関東化学) 、KH2PO4  .08 %  (関東化学) 、K2HPO4  .02 % ( 関東化学) 、MgSO4 ・  H2O 0.02 % (和光純薬) 、KCl 0.02 % (関東化学) 、NaNO3 0.2 % ( 和光純薬) 、酵母エキス 0.02%（オリエンタル酵母）、寒天 1.5 %（清水食品）、pH 6.0に調整) で培養したFKI-3864株を、種培地 (グルコース 2 % (和光純薬) 、ポリペプトン 0.5 % (和光純薬) 、MgSO4 ・7H2O 0.05 % ( 和光純薬) 、酵母エキス 0.2 % (オリエンタル酵母) 、KH2PO4 0.1 % (関東化学) 、寒天 0.1% （清水食品）pH 6.0に調整) 100 mLを分注した500 mL容三角フラスコに一白金耳ずつ接種し、27°C で 3日間ロータリーシェイカー (210 rpm)で培養した後、生産培地 (サッカロース 3.0 % (和光純薬) 、可溶性デンプン 1.0 % (関東化学) 、麦芽エキス 0.3 % (三光純薬) 、KH2PO4  0.5 % ( 関東化学) 、Mg(SO4)2・8H2O 0.05 % ( 関東化学) 、 pH 6.0 に調整) 200 mLを分注した 1 L容ルーフラスコ (30本) に 1% 植菌し、27°C で 13 日間静置培養した。
　培養終了後、この培養液 (6 L)にエタノール（6 L)を加え、１時間撹拌後抽出液を得た。さらに、減圧下でエタノールを留去して 6 Lの濃縮液とした。この濃縮液より酢酸エチル（6 L)で活性成分を抽出し、酢酸エチル層を濃縮乾固し茶褐色の活性粗物質（4.5 g ）を得た。この粗物質をシリカゲルカラム（シリカゲル 60 、メルク社製、140 g ）にて粗精製を行った。クロロホルムーメタノール（100:0 、10:1、1:1 、0:100 ）の各混合溶媒を展開溶媒とするクロマトグラフィーを行い、溶出液を各条件で 1 Lに分画した。FKI-3864物質を含む画分（10:1フラクション）を濃縮することで、褐色状物質 1.9 gを得た。再度、この粗物質をシリカゲルカラム（シリカゲル 60 、メルク社製、80 g）にて精製を行った。クロロホルムーメタノール（100:0 、100:1 、50:1、100:3 、20:1、10:1、0:100 ）の各混合溶媒を展開溶媒とするクロマトグラフィーを行い、溶出液を各条件で 400 mL に分画した。FKI-3864物質を含む画分（クロロホルムーメタノール 100:3、10:1および0:100 フラクション）を濃縮することで、黄褐色物質866 mgを得た。これを ODSカラムにて精製を行った。50% 、60% 、70% 、80% 、100%アセトニトリル 0.05% H3PO4水溶液の各混合溶媒を展開溶媒とするクロマトグラフィーを行い、溶出液を各条件で 120 mL に分画した。FKI-3864物質を含む画分 (80% アセトニトリル0.05% H3PO4 水溶液画分) を減圧下濃縮し、残査水溶液を酢酸エチル抽出することで黄色物質 62 mgを得た。これを少量のメタノールに溶解し、分取 HPLC ( カラム : PEGASIL ODS、20φ× 250 mm 、センシュー科学) により精製を行った。80% アセトニトリル 0.05% H3PO4水溶液のアイソクラティックを移動相とし、8 mL/minの流速において、UV 270 nm の吸収をモニターした。保持時間 17 min に活性を示すピークを観察し、このピークを分取して分取液を減圧下濃縮し、残渣水溶液を酢酸エチルで抽出し、黄色粉末の FKI-3864 成分を収量 16.7 mgで単離した。
 (試験例１) 
　本発明の FKI-3864 物質の細胞内トリアシルグリセロール生成に対する阻害作用について以下の方法で試験した。
　HAMs F12培地 (10%FBS、Penicillin/Streptomycin を含む) で 5.0×105  cells/mL に調整したチャイニーズハムスター卵巣細胞 (CHO-K1細胞) を 48 穴プレートに 250μｌずつまく。
　次に、5%炭酸ガスインキュベーター内で 37 ℃、12時間培養を行い細胞を付着させた後、FKI-3864物質 (2.5 μｌメタノール溶液) 、[1-14C] オレイン酸（5 μｌ、1.85 kBq、1nmol ）を添加しさらに 6時間培養した。
　培養上清を除去し、 0.1% SDS-Tris/HCl (pH 7.5 120μｌ) を加えて細胞を溶解後、Bligh & Dyer法により細胞内の中性脂質を抽出した。これを濃縮後、TLC （シリカゲルプレート、メルク社製、厚さ0.5 mm）にスポットし、ヘキサン／ジエチルエーテル／酢酸（70: 30: 1 、v/v/v ）の溶媒で展開し、分離した [14C]トリアシルグリセロールの量を BAS 2000(富士フィルム社製) で定量した。その結果、FKI-3864物質は、 [14C]トリアシルグリセロールの形成を阻害し、そのIC50値は、0.093 μM と測定された。
　　FKI-3864-1および FKI-3864-2 物質の製造方法
　　FKI-3864物質 15 mgを少量のメタノールに溶解し、分取 HPLC(カラム : Develosil C30、4.5 φ× 250 mm 、野村科学) により精製を行った。85% アセトニトリル 0.05% H3PO4水溶液のアイソクラティックを移動相とし、0.8 mL/minの流速において、UV 270 nm の吸収をモニターした。保持時間11分および13分に溶出されるピークをそれぞれ分取して分取液を減圧下濃縮し、残渣水溶液を酢酸エチルで抽出し、黄色粉末の FKI-3864-1 を収量 5.0 mg 、FKI-3864-2を収量 7.0 mg で単離した。
 (試験例２) 
  試験例１と同様の方法を用いてFKI-3864-1物質およびFKI-3864-2物質の細胞内トリアシルグリセロール生成に対する阻害作用を測定した。その結果、FKI-3864-1物質のIC50は 12 μM 以上、FKI-3864-2物質のIC50は 0.54 μM と測定された。さらにFKI-3864-1物質およびFKI-3864-2物質を様々な比率で混合した場合の活性は表２に示す通りであり、1:1 の比で混合した場合が最も強い活性 (IC50 0.054μM ) を示した。
      細胞内トリアシルグリセロール生成に対する阻害作用
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000011

Claims (8)

  1. 下記式［Ｉ］で表される化合物である FKI-3864 物質。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
  2. 下記式［II］で表される化合物および／または［III ］で表される化合物である請求項１記載の FKI-3864 物質。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
  3. ペニシリウム属に属し、FKI-3864物質を生産する能力を有する微生物を培地に培養し、培養物中に FKI-3864 物質を蓄積せしめ、該培養物から FKI-3864 物質を採取することを特徴とする、請求項１または２記載の FKI-3864 物質の製造法。
  4. ペニシリウム属に属し、FKI-3864物質を生産する能力を有する微生物が、ペニシリウム・ピノフィラムFKI-3864  (Penicillium pinophilum FKI-3864) (FERM P-21483)である請求項３記載の製造法。
  5. ペニシリウム属に属し、請求項１または２記載のFKI-3864物質を生産する能力を有する微生物。
  6. ペニシリウム・ピノフィラムFKI-3864  (Penicillium pinophilum FKI-3864) (FERM P-21483)である請求項５記載の微生物。
  7. 請求項１または２記載の物質を有効成分とする、細胞内トリアシルグリセロール生成阻害剤。
  8. 請求項１または２記載の物質を有効成分とする、肥満の予防薬または治療薬。
PCT/JP2009/052271 2008-02-13 2009-02-12 新規 fki-3864 物質およびその製造方法 WO2009101956A1 (ja)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US12/867,435 US8378125B2 (en) 2008-02-13 2009-02-12 Substance FKI-3864 and method for preparation thereof

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2008-032172 2008-02-13
JP2008032172A JP5163168B2 (ja) 2008-02-13 2008-02-13 新規ｆｋｉ−３８６４物質およびその製造方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2009101956A1 true WO2009101956A1 (ja) 2009-08-20

Family

ID=40956986

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2009/052271 WO2009101956A1 (ja) 2008-02-13 2009-02-12 新規 fki-3864 物質およびその製造方法

Country Status (3)

Country Link
US (1) US8378125B2 (ja)
JP (1) JP5163168B2 (ja)
WO (1) WO2009101956A1 (ja)

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH08182496A (ja) * 1995-01-06 1996-07-16 Kitasato Inst:The Ｆｏ−２９４２物質およびその製造法
WO1999041265A1 (en) * 1998-02-16 1999-08-19 The Kitasato Institute Novel substances kf-1040 and process for producing the same
WO2000058491A1 (fr) * 1999-03-25 2000-10-05 The Kitasato Institute Nouvelles substances kf-1040t4a, kf-1040t4b, kf-1040t5a et kf-1040t5b et leur procede de production

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH08182496A (ja) * 1995-01-06 1996-07-16 Kitasato Inst:The Ｆｏ−２９４２物質およびその製造法
WO1999041265A1 (en) * 1998-02-16 1999-08-19 The Kitasato Institute Novel substances kf-1040 and process for producing the same
WO2000058491A1 (fr) * 1999-03-25 2000-10-05 The Kitasato Institute Nouvelles substances kf-1040t4a, kf-1040t4b, kf-1040t5a et kf-1040t5b et leur procede de production

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Abstracts of 128th Annual Meeting of Pharmaceutical Society of Japan 2, 05 March, 2008", 5 March 2008, article SATORU OTE ET AL.: "Shinkin FKI-3864 Kabu no Seisan suru Shinki Triacylglycerol Seisei Sogai Busshitsu ni Kansuru Kenkyu", pages: 127 *

Also Published As

Publication number Publication date
US8378125B2 (en) 2013-02-19
US20110105769A1 (en) 2011-05-05
JP2009190996A (ja) 2009-08-27
JP5163168B2 (ja) 2013-03-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR830002801B1 (ko) 고(高) 콜레스테롤혈증치료제, 모나콜린 k의 제조방법
JP2007291075A (ja) 新規化合物ステレニン及びその製造方法
WO2004050890A1 (ja) マクロライド系化合物の製造方法
JP3854866B2 (ja) ミコフェノール酸およびその誘導体の製造方法
KR100366258B1 (ko) 신규 kf-1040 물질 및 그 제조법
WO2009101959A1 (ja) 新規化合物ラクノクロモニン（ｌａｃｈｎｏｃｈｒｏｍｏｎｉｎ）類化合物
JP2022520180A (ja) 納豆菌及びｍｋ－７の生産方法
JP5163168B2 (ja) 新規ｆｋｉ−３８６４物質およびその製造方法
JP5256758B2 (ja) 新規ｆｋｉ−１７４６−１物質およびその製造方法
JP4160149B2 (ja) 新規ｆｏ−６９７９物質およびその製造法
JP2004210648A (ja) 新規マクロライド化合物及びその製造方法
US7192742B2 (en) FO-6979 substances and process for producing the same
JPH0967362A (ja) ５α−還元酵素阻害剤ビスイソフラボン類
Hatori et al. FR171456, a novel cholesterol synthesis inhibitor produced by Sporormiella minima No. 15604 I. taxonomy, fermentation, isolation, physico-chemical properties
KR102141846B1 (ko) 이퀄 생산능을 갖는 신규 락토바실러스 속 균주 및 이를 이용한 이퀄 생산 방법
CN104673722B (zh) 耐氧夏普氏菌及其在二氢大豆异黄酮有氧合成中的应用
JP4836783B2 (ja) 抗腫瘍剤、抗腫瘍剤の製造方法、抗腫瘍剤を含む医薬組成物、及び抗腫瘍剤産生菌
JPWO2007097010A1 (ja) Ｆｋｉ−２３４２物質およびその製造法
JPH04243894A (ja) 新規ｑ−６４０２化合物およびその製造法
JP3641013B2 (ja) 新規な細胞接着阻害剤マクロスフェライドａ及びｂ並びにそれらの製造法
US7060821B2 (en) Osteoclast differentiation inhibitors
JPWO2004033703A1 (ja) 新規マクロファージ泡沫化阻害物質ｆｋａ−２５およびその製造法
WO2006048947A1 (ja) マクロファージ泡沫化阻害物質ｆｋｉ−１８４０およびその製造法
JPWO2006095444A1 (ja) ステンフォン（ｓｔｅｍｐｈｏｎｅ）類およびそれらの製造方法
EP0525846A1 (en) Sporomiella intermedia and processes therefrom

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 09709816

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 12867435

Country of ref document: US

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 09709816

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1